全 文 ：第 １３卷第 ２期
２０１５年 ３月
生　 物　 加　 工　 过　 程
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
Ｖｏｌ􀆰 １３ Ｎｏ􀆰 ２
Ｍａｒ􀆰 ２０１５
ｄｏｉ：１０􀆰 ３９６９ ／ ｊ􀆰 ｉｓｓｎ􀆰 １６７２－３６７８􀆰 ２０１５􀆰 ０２􀆰 ０１９
收稿日期：２０１４－０３－２０
基金项目：国家重点基础研究发展计划（９７３计划）（２０１１ＣＢ７１０８０６）；教育部博士点新教师基金（２０１２３３１７１２００４）
作者简介：邹树平（１９８０—），男，湖南常德人，博士，副教授，研究方向：微生物药物发酵与产业化开发；郑裕国（联系人），教授，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｚｈｅｎｇｙｇ＠
ｚｊｕｔ．ｅｄｕ．ｃｎ
棘白菌素 Ｂ提取液脱色工艺
邹树平１，刘　 苗１，钟　 伟１，牛　 坤１，姚黎栋２，郑裕国１
（１􀆰 浙江工业大学 生物工程研究所 生物转化与生物净化教育部工程研究中心，浙江 杭州 ３１００３２；
２􀆰 浙江震元制药有限公司，浙江 绍兴 ３１２０７１）
摘　 要：研究碱性阴离子交换树脂 ＷＤ ６ 对发酵棘白菌素 Ｂ（ＥＣＢ）提取液的脱色效果。 通过对 ＥＣＢ 提取液和
ＥＣＢ标准溶液的全波长扫描，确定 ＥＣＢ提取液中色素的最佳吸收波长为 ３１５ ｎｍ；考察了树脂添加量、脱色温度、摇
床转速和脱色时间对脱色率和 ＥＣＢ 损失率的影响，获得最佳脱色工艺：树脂添加量 ４％ （质量分数），脱色温度
３０ ℃，摇床转速 １５０ ｒ ／ ｍｉｎ，脱色时间 １００ ｍｉｎ。 在此条件下，ＥＣＢ 提取液的脱色率可达 ８８􀆰 ３％，ＥＣＢ 损失率仅
为 ４􀆰 ８％。
关键词：棘白菌素 Ｂ；脱色；离子交换树脂
中图分类号：ＴＱ４６５􀆰 ５　 　 　 　 文献标志码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２－３６７８（２０１５）０２－００９８－０５
Ｄｅｃｏｌｏｒｉｎｇ ｏｆ ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ Ｂ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ＺＯＵ Ｓｈｕｐｉｎｇ１，ＬＩＵ Ｍｉａｏ１，ＺＨＯＮＧ Ｗｅｉ１，ＮＩＵ Ｋｕｎ１，ＹＡＯ Ｌｉｄｏｎｇ２，ＺＨＥＮＧ Ｙｕｇｕｏ１
（１􀆰 Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｂｉｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ａｎｄ Ｂｉｏｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，
Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ ３１００３２，Ｃｈｉｎａ；
２􀆰 Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｚｈｅｎｙｕａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ． Ｌｔｄ．，Ｓｈａｏｘｉｎｇ ３１２０７１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｄｅｃｏｌｏｒｉｎｇ ｏｆ ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ Ｂ （ＥＣＢ） ｅｘｔｒａｃｔ ｂｙ ｉｏｎ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｒｅｓｉｎ ＷＤ⁃６ ｗａｓ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．
Ｔｈｒｏｕｇｈ ｆｕｌｌ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｏｆ ＥＣＢ ｅｘｔｒａｃｔ ａｎｄ ＥＣＢ ｓｔａｎｄａｒｄ， ｂｅｓｔ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｏｆ ｐｉｇｍｅｎｔ ｗａｓ
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｔ ３１５ ｎｍ． Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｒｅｓｉｎ （ＷＤ⁃６ ｒｅｓｉｎ） ｃｏｎｔｅｎｔ， ｄｅｃｏｌｏｒｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｒｏｔａｔｉｏｎ ｓｐｅｅｄ
ａｎｄ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｎ ｄｅｃｏｌｏｒｉｎｇ ａｎｄ ｌｏｓｓ ｏｆ ＥＣＢ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｓ
ｆｏｌｌｏｗｓ： ｒｅｓｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ４％ （ｗ ／ ｗ）， ｄｅｃｏｌｏｕｒｉｚａｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｔ ３０ ℃， ｒｏｔａｔｉｏｎ ｓｐｅｅｄ １５０ ｒ ／ ｍｉｎ ａｎｄ
ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｔｉｍｅ １００ ｍｉｎ． Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ， ｔｈｅ ｄｅｃｏｌｏｒｉｚａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ａｂｏｖｅ ８８􀆰 ３％，ｗｉｔｈ ＥＣＢ ｌｏｓｓ
ｒａｔｅ ｏｆ ４􀆰 ８％．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ Ｂ；ｄｅｃｏｌｏｒｉｎｇ；ｉｏｎ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｒｅｓｉｎ
　 　 棘白菌素类抗生素是新一代临床治疗真菌感染
的抗真菌药物，该类抗生素能够非竞争性抑制真菌细
胞壁 β １，３ 葡聚糖合成酶的活性，作用机制独特，
毒副作用低，且对一些唑类和两性霉素 Ｂ耐药的真菌
抗菌活性强［１］。 目前已经上市的棘白菌素类药物有
卡泊芬净（ｃａｓｐｏｆｕｎｇｉｎ）、米卡芬净（ｍｉｃａｆｕｎｇｉｎ）和阿
尼芬净（ａｎｉｄｕｌａｆｕｎｇｉｎ） ［２］。 棘白菌素 Ｂ（ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ
Ｂ，ＥＣＢ）是由构巢曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｄｕｌａｎｓ）发酵产生
的一种次级代谢产物，是合成阿尼芬净的前体化合
物［３］。 ＥＣＢ分子式为 Ｃ５２Ｈ８１Ｎ７Ｏ１６，相对分子质量为
１ ０６０􀆰 ２，化学结构式如图 １所示。
图 １　 棘白菌素 Ｂ结构式
Ｆｉｇ􀆰 １　 Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ Ｂ
构巢曲霉发酵生产 ＥＣＢ 的周期较长，发酵后期
有大量的色素产生［４］。 ＥＣＢ 存在于构巢曲霉菌丝
体内，用有机溶剂浸提 ＥＣＢ 时，由于色素物质的存
在，提取液一般呈橙黄色。 若不经过脱色处理，不
仅会降低后续产品的回收率及纯度，还会影响最终
产品的色泽［５］。 张雪霞等［６］在提取 ＥＣＢ过程中，通
过树脂吸附解吸后，在解吸液中添加 １％活性炭脱
色，脱色不完全。 Ｋｅｒｙ 等［７］在用异丁醇萃取 ＥＣＢ
后，浓缩异丁醇相，用酸洗后加入活性炭脱色，可以
使萃取液澄清，但 ＥＣＢ损失较大。 张磊等［８］在浓缩
液中加入有效组分 ２􀆰 ５倍体积的 Ａｌ２Ｏ３于 ２０ ℃下脱
色，虽然脱色效果良好，但使用的脱色剂 Ａｌ２Ｏ３价格
昂贵，难以工业化应用。 本文中笔者选用广泛使用
的碱性阴离子交换树脂 ＷＤ ６ 对 ＥＣＢ 提取液进行
脱色研究，以期获得良好的脱色效果。
１　 材料与方法
１􀆰 １　 仪器与材料
高效液相色谱，日本岛津公司；酶标仪，美谷分
子仪器（上海）有限公司；Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ ５８１０Ｒ 型离心
机，德国 Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ 公司；蛋白层析仪，美国 Ｂｉｏ⁃Ｒａｄ
公司。
ＥＣＢ发酵菌丝体，浙江工业大学生物工程研究
所 ＺＪＢ０９２２３ 构巢曲霉发酵；ＥＣＢ 标准品，澳大利亚
ＢｉｏＡｕｓｔｒａｌｉｓ公司；ＷＤ ６ 碱性阴离子树脂，安徽皖
东树脂有限公司；甲醇、乙腈（色谱纯），中国百灵威
试剂公司；其他试剂均为国产分析纯。
１􀆰 ２　 ＥＣＢ提取液的制备
将构巢曲霉发酵液离心，收集菌丝体，称取一
定质量菌丝体，按照 ｍ（菌丝体） ∶ Ｖ（乙醇） ＝ １ ∶ １􀆰 ５
加入乙醇溶液，于 ３５ ℃下搅拌浸提 ２ ｈ，总共浸提 ３
次。 收集乙醇浸提液，用蒸馏水将乙醇稀释到体积
分数 ４０％，加入预处理好的 ＨＰ２０ 大孔吸附树脂吸
附 ４ ｈ，吸附完成后加入纯乙醇解吸 ３ ｈ，解吸后的
ＥＣＢ溶液，调 ｐＨ为 ６，即为本实验用到的样品。
１􀆰 ３　 树脂的预处理
将 ＷＤ ６ 碱性阴离子树脂用质量分数 ５％的
ＮａＣｌ溶液浸泡 ４ ｈ，接着用蒸馏水反复洗涤，洗净表
面的 ＮａＣｌ，然后加入 ５％的 ＮａＯＨ 溶液浸泡 ４ ｈ，用
蒸馏水反复洗涤，直到洗出液的 ｐＨ为 ７，于 ６０ ℃下
烘干。
１􀆰 ４　 静态和动态吸附实验
静态吸附实验：在恒温水浴摇床中进行，测定
ＷＤ ６树脂吸附前后提取液中色素的吸光值以及
ＥＣＢ 的浓度，计算提取液的脱色率和 ＥＣＢ 的损
失率。
动态吸附实验：在 Ｂｉｏ⁃Ｒａｄ 蛋白层析柱中进行，
装载 ＷＤ ６ 树脂 ８ ｇ，通过自动收集装置，毎 ５ ｍＬ
流出液收集 １次，实验完成后需测定样品收集液中
色素的吸光值和 ＥＣＢ的浓度，计算提取液的脱色率
和 ＥＣＢ的损失率，绘制脱色洗脱曲线图。
１􀆰 ５　 分析方法
１􀆰 ５􀆰 １　 色度的测定
在波长为 ２００～４５０ ｎｍ范围内对 ＥＣＢ提取液和
ＥＣＢ标准溶液进行对比扫描，以确定提取液中色素
的最佳吸收波长。
１􀆰 ５􀆰 ２　 脱色率的计算
提取液脱色率计算按式（１）进行。
脱色率 ＝
Ａ１ － Ａ２
Ａ１
× １００％ （１）
式中：Ａ１为脱色前吸光值，Ａ２为脱色后吸光值。
１􀆰 ５􀆰 ３　 ＥＣＢ浓度及损失率的计算
采用高效液相色谱法测定 ＥＣＢ 的浓度，高效液
相色谱条件参照文献［９］。 色谱柱：伊利特 Ｈｙｐｅｒｓｉｌ
ＯＤＳ２ ５ μｍ×４􀆰 ６ ｍｍ×２５０ ｍｍ；检测器为 ＰＤＡ；检测
波长 ２２２ ｎｍ；流动相 Ｖ（甲醇） ∶ Ｖ（超纯水） ∶ Ｖ（乙
腈）＝ ７ ∶ ２ ∶ １；进样量 ２０ μＬ；流速 １ ｍＬ ／ ｍｉｎ；柱温箱
４０ ℃。 ＥＣＢ的损失率按照式（２）计算。
ＥＣＢ的损失率 ＝
ρ１ － ρ２
ρ１
× １００％ （２）
式中： ρ１和 ρ２分别为脱色前、后 ＥＣＢ 质量浓度
（ｍｇ ／ Ｌ）。
１􀆰 ５􀆰 ４　 平衡吸附量及平衡时溶液中色素浓度的
测定［１０］
当吸附平衡后，单位质量树脂所吸附色素的量
９９　 第 ２期 邹树平等：棘白菌素 Ｂ提取液脱色工艺
称为平衡吸附量（ｇ ／ ｇ），用 Ｑｅ 表示，计算见式（３）；
剩余色素的相对含量用 Ｃ表示，其计算见式（４）。
Ｑｅ ＝
Ａ１ － Ａ２
Ａ１ｍ
（３）
Ｃ ＝
Ａ２
Ａ１
× １００％ （４）
２　 结果与讨论
２􀆰 １　 ＥＣＢ提取液色度的确定
取一定 ＥＣＢ 提取液和 ＥＣＢ 标准液，在波长范
围为 ２００ ～ ４５０ ｎｍ 范围内对样品进行扫描，结果如
图 ２所示。 由图 ２ 可知，有色素的提取液与标准液
的吸光度最大差值在 ３１０～３２０ ｎｍ处，所以选取 ３１５
ｎｍ为提取液中色素的测定波长。
图 ２　 样品和标准品全波长扫描
Ｆｉｇ􀆰 ２　 Ｃｕｒｖｅｓ ｏｆ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｂｅｔｗｅｅｎ
ｓａｍｐｌｅ ａｎｄ ｓｔａｎｄａｒｄ
２􀆰 ２　 树脂添加量对脱色效果的影响
在脱色过程中，既要保证树脂对色素尽可能大
的吸附量，又要减少对 ＥＣＢ 的吸附。 取 １０ ｍＬ ＥＣＢ
提取液，添加不同质量的 ＷＤ ６ 脱色树脂，在 ３０
℃、１５０ ｒ ／ ｍｉｎ 条件下，静态吸附 ３ ｈ，结果如图 ３ 所
示。 由图 ３可知：树脂添加量（质量分数）从 ２％增
加到 ４％时，提取液脱色率也明显提高；但当树脂添
加量超过 ４％后，脱色率基本不变，这可能是树脂对
色素的吸附已达到平衡。 而随着树脂添加量的增
大，ＥＣＢ损失率却不断上升，可能是树脂对 ＥＣＢ 仍
有一定的吸附作用。 因此，综合考虑到脱色率和
ＥＣＢ损失率这 ２个因素，以 ４％作为 ＷＤ ６ 树脂的
最适添加量。
２􀆰 ３　 温度对脱色效果的影响
取 １０ ｍＬ ＥＣＢ 提取液，添加质量分数 ４％
ＷＤ ６树脂，摇床转速为 １５０ ｒ ／ ｍｉｎ，在不同温度下
图 ３　 树脂添加量对脱色的影响
Ｆｉｇ􀆰 ３　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ＷＤ⁃６ ｒｅｓｉｎ ｏｎ ｄｅｃｏｌｏｕｒｉｎｇ ｒａｔｅ
静态吸附 ３ ｈ，实验结果如图 ４ 所示。 由图 ４ 可以
看出：随着温度的上升，脱色率缓慢上升。 这可能
是由于温度上升后加速了分子扩散的速度，对色
素的吸附有利，从而提高脱色率［１１］ 。 温度升高后，
ＥＣＢ的损失率也逐渐上升，一方面可能是由于温
度的升高加速了 ＥＣＢ 与树脂间的吸附作用；另一
方面也可能是温度的升高使得 ＥＣＢ 部分降解，导
致损失率上升。 因此，综合考虑，选择 ３０ ℃为最
佳脱色温度。
图 ４　 温度对脱色效果的影响
Ｆｉｇ􀆰 ４　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｅｃｏｌｏｒｉｚａｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
ｏｎ ｄｅｃｏｌｏｕｒｉｎｇ ｒａｔｅ
２􀆰 ４　 摇床转速对脱色效果的影响
取 ２０ ｍＬ ＥＣＢ提取液，添加质量分数 ４％ ＷＤ
６树脂，恒温水浴摇床温度为 ３０ ℃，摇床转速分别
为 ５０、１００、１５０和 ２００ ｒ ／ ｍｉｎ，在此条件下静态吸附 ３
ｈ，结果如图 ７所示。 由图 ７ 可知，ＥＣＢ 的损失率并
没有太大变化。 对于脱色率，当摇床转速在 ５０～１５０
ｒ ／ ｍｉｎ时，脱色率略有上升，而随着转速继续增加，脱
色率却稍有下降，可能的原因是，当摇床转速提高
后，ＥＣＢ 提取液与 ＷＤ ６ 脱色树脂呈高速分散状
态，导致二者交换吸附并不充分，故而脱色率反而
有所下降。 因此，选择 １５０ ｒ ／ ｍｉｎ 为脱色过程中的
转速。
００１ 生　 物　 加　 工　 过　 程　 　 第 １３卷　
图 ５　 转速对脱色效果的影响
Ｆｉｇ􀆰 ５　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｒｏｔａｔｅ ｓｐｅｅｄ ｏｎ ｄｅｃｏｌｏｕｒｉｎｇ ｒａｔｅ
２􀆰 ５　 脱色时间对脱色效果的影响
对于固液之间的吸附反应，达到吸附平衡过程
需要一定的时间。 一般吸附时间延长后，溶液中色
素的浓度会越来越低，当吸附剂表面与溶液中色素
浓度相等，即吸附平衡时，吸附便不再发生［１２］。 取
５０ ｍＬ提取液，添加质量分数 ４％ ＷＤ ６树脂，摇床
转速设置为 １５０ ｒ ／ ｍｉｎ，于 ３０ ℃下静态吸附 ６ ｈ，每
次间隔 ４５ ｍｉｎ 取样，测定不同时间下色素的吸光值
和溶液中剩余 ＥＣＢ 浓度，并计算提取液脱色率和
ＥＣＢ损失率，结果如图 ６所示。 由图 ６可以看出：在
前 １００ ｍｉｎ脱色率缓慢增加，在吸附 １００ ｍｉｎ后吸附
基本达到饱和，但 ＥＣＢ 损失率随时间延长继续上
升。 考虑到脱色效果以及 ＥＣＢ 损失率这 ２ 个因素，
确定脱色时间为 １００ ｍｉｎ。 在此优化条件下，ＥＣＢ
提取液脱色率为 ８８􀆰 ３％，ＥＣＢ损失率仅为 ４􀆰 ８％。
图 ６　 脱色时间对脱色效果的影响
Ｆｉｇ􀆰 ６　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｅｃｏｌｏｒｉｚａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｏｎ ｄｅｃｏｌｏｕｒｉｎｇ ｒａｔｅ
２􀆰 ６　 脱色吸附等温线
目前研究吸附平衡模型的方程主要有以下 ３
种［１３］。 Ｈｅｎｒｙ型吸附模型的表达式：Ｇ ＝ ＫＣ＋ｂ（Ｋ、ｂ
为常数）；Ｌａｎｇｍｕｉｒ型吸附模型表达式：Ｃ ／ Ｇ ＝ １ ／ ａｂ＋
Ｃ ／ ａ（ａ、ｂ 为常数）；Ｆｒｅｕｎｄｌｉｃｈ 型吸附模型表达式：
ｌｇ Ｇ＝Ｋ＋Ｎｌｇ Ｃ（Ｋ、Ｎ为常数）。
根据 ３种吸附等温线公式，于 ３０ ℃下对 ＷＤ
６树脂吸附 ＥＣＢ 提取液中色素的实验数据进行拟
合，其拟合方程和相关系数见表 １。
表 １　 吸附等温线的线性拟合结果
Ｔａｂｌｅ １　 Ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｌｉｎｅａｒ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｓｏｔｈｅｒｍ ｌｉｎｅ
模型 拟合方程式 相关系数（Ｒ２）
Ｈｅｎｒｙ型 Ｇ＝ ３Ｃ－０􀆰 ６９８ ０􀆰 ９９１ ４６
Ｌａｎｇｍｕｉｒ型 Ｃ ／ Ｇ＝ ２􀆰 ８Ｃ－０􀆰 ８７９ ０􀆰 ９８４ ０６
Ｆｒｅｕｎｄｌｉｃｈ型 ｌｇ Ｇ＝ －０􀆰 ３９９ １􀆰 ３ ｌｇＣ ０􀆰 ９８５ ４３
由表 １ 结果可知：３ 种吸附模型都可以描述
ＷＤ ６树脂对 ＥＣＢ提取液中色素的吸附，但是比较
相关系数 Ｒ２，该吸附更符合 Ｈｅｎｒｙ 模型。 其拟合结
果如图 ５所示。 由图 ５可知：此吸附等温式为线性，
根据 Ｈｅｎｒｙ模型的特点，说明该吸附是在低浓度下
的吸附，并且吸附过程只存在单一分子的现象。
图 ７　 ＷＤ ６吸附树脂的吸附等温线
Ｆｉｇ􀆰 ７　 Ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｉｓｏｔｈｅｒｍ ｌｉｎｅ ｏｆ ＷＤ⁃６ ｒｅｓｉｎ
２􀆰 ７　 动态吸附实验
准确称取经过预处理的 ＷＤ ６ 干树脂 ８􀆰 ０ ｇ，
用湿法装柱装入蛋白层析柱中，样品总共 １５０ ｍＬ。
在室温下，将流速设置为 ０􀆰 ５ ｍＬ ／ ｍｉｎ 进行动态脱
色实验，每 １０ ｍｉｎ收集 １ 管样品，通过酶标仪和高
效液相色谱检测样品的吸光值和 ＥＣＢ 的浓度，结
果见图 ８。 由图 ８ 可以看出：当流出液体积越来越
大时，其脱色率下降较快。 当提取液流出体积约
８０ ｍＬ时，脱色率下降近一半；随着流出液体积增
大，脱色效果越来越差，而 ＥＣＢ 的损失率在下降到
一定阶段后不再下降。 可能是在动态吸附过程
中，树脂与色素的接触时间较短，使得色素不能完
全被吸附。 而 ＷＤ ６ 树脂对 ＥＣＢ 有轻微吸附作
用，随着时间的延长，树脂对 ＥＣＢ 吸附饱和后，损
失率不再升高。
１０１　 第 ２期 邹树平等：棘白菌素 Ｂ提取液脱色工艺
图 ８　 ＥＣＢ提取液动态脱色曲线
Ｆｉｇ􀆰 ８　 Ｄｅｃｏｌｒｉｚａｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅｓ ｏｆ ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ Ｂ ｅｘｔｒａｃｔ
３　 结论
研究碱性阴离子交换树脂 ＷＤ ６ 对发酵棘白
菌素 Ｂ（ＥＣＢ）提取液的脱色效果。 当 ＷＤ ６ 树脂
添加量为 ４％（质量分数）、脱色温度为 ３０ ℃、摇床
转速为 １５０ ｒ ／ ｍｉｎ、脱色时间为 １００ ｍｉｎ 时，ＷＤ ６
树脂对 ＥＣＢ提取液的脱色率可达到 ８８􀆰 ３％以上，而
ＥＣＢ损失率仅为 ４􀆰 ８％。 说明 ＷＤ ６ 树脂能够较
好地吸附 ＥＣＢ提取液中的色素。 对 ＷＤ ６ 树脂吸
附 ＥＣＢ提取液中色素的吸附等温线的研究表明，该
吸附反应符合 Ｈｅｎｒｙ等温吸附模型。
参考文献：
［ １ ］　 Ｋｒｅｕｚｍａｎ Ａ Ｊ，Ｈｏｄｇｅｓ Ｒ Ｌ，Ｓｗａｒｔｌｉｎｇ Ｊ Ｒ，ｅｔ ａｌ．Ｍｅｍｂｒａｎｅ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ
ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ Ｂ ｄｅａｃｙｌａｓｅ ｏｆ Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ ｕｔａｈｅｎｓｉｓ： ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ， ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｄｅａｃｙｌａｔｉｏｎ
ｒｅａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｉｎｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ，２０００，２４（３）：１７３⁃１８０．
［ ２ ］ 　 Ｓｈａｏ Ｌｅｉ， Ｌｉ Ｊｉａｎ， Ｌｉｕ Ａｉｊｕａｎ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｂｉｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｏｆ
ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ Ｂ ｔｏ ｉｔｓ ｎｕｃｌｅｕｓ ｂｙ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｄｅａｃｙｌａｓｅ
ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｈｏｓｔ ｓｔｒａｉｎｓ［Ｊ］ ．Ａｐｐｌ Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１２，
７９（４）：１１２６⁃１１３３．
［ ３ ］ 　 曹国颖，傅德兴．新型棘白菌素类抗真菌药阿尼芬净［ Ｊ］ ．中国
新药杂志，２００５，１４（１１）：１３５８⁃１３６１．
［ ４ ］ 　 郑裕国，邹树平，牛坤，等．一种发酵法制备棘白菌素 Ｂ 的方
法及菌株：中国，２０１３１０４７７６７０．８［Ｐ］．２０１３⁃１０⁃１２．
［ ５ ］ 　 秦为辉，张晓琳，陈新，等．多杀菌素提取液的脱色工艺研究
［Ｊ］ ．中国抗生素杂志，２０１１，３６（１）：４８⁃５２．
［ ６ ］ 　 张雪霞，王海燕，李晓露，等．Ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ Ｂ 的分离纯化工艺
研究［Ｊ］ ．中国抗生素杂志，２０１２，３７（３）：２１６⁃２１９．
［ ７ ］ 　 Ｋｅｒｙ Ｖ， Ｃｓｏｒｖａｓｉ Ａ， Ｓｅｒｅｓｓ Ｐ， ｅｔ ａｌ． Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ ｆｏｒ
ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ⁃ｔｙｐｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ： ＵＳ， ２００８０１０８８０６［Ｐ］． ２００８⁃
０５⁃０８．
［ ８ ］ 　 张磊，杨洋，郭东初，等．一种从发酵液中提取棘白菌素类物
质的方法：中国，２０１２１００６４４１１．１［Ｐ］．２０１３⁃０９⁃１８．
［ ９ ］ 　 李继安，卢亮，颜晨晨，等．棘白菌素 Ｂ的纯化：中国，２００９１０１⁃
３３１１７．６［Ｐ］．２００９⁃０４⁃０１．
［１０］ 　 刘元法，裘爱泳，王兴国．Ｆｒｅｕｎｄｌｉｃｈ方程在不同吸附剂的油脂
脱色体系中的应用［ Ｊ］ ．食品与生物技术学报，２００７，２６（１）：
１⁃４．
［１１］ 　 欧阳艳，李紫薇，腊萍，等．棉籽壳木聚糖提取液的脱色工艺
研究［Ｊ］ ．食品研究与开发，２０１３，３４（５）：６０⁃６５．
［１２］ 　 江波，陈超，沐万孟，等．苯乳酸发酵液脱色体系中活性炭吸
附的研究［Ｊ］ ．食品工业科技，２００８，２９（３）：５９⁃６３．
［１３］ 　 于瑞莲，胡恭任．苯酚在滩涂沉积物上的吸附特性［Ｊ］ ．生态环
境，２００４，１３（４）：５３５⁃５３７．
（责任编辑　 管　 珺）
􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌􀤌
（上接第 ９７页）
［１３］　 吴桢．普洱茶渥堆发酵过程中主要生化成分的变化［Ｄ］．重
庆：西南大学，２００８．
［１４］ 　 杨希，陈杰，张春枝，等．普洱茶发酵过程中茶多酚和茶色素
的变化［Ｊ］ ．农业机械，２０１２ （８）：１１８⁃１２０．
［１５］ 　 梁名志，夏丽飞，陈林波，等．人工接种真菌发酵普洱茶的化
学成分变化研究［Ｊ］ ．中国茶叶，２００９（１）：１１⁃１３．
［１６］ 　 张新富，龚加顺，周红杰，等．云南普洱茶中多酚类物质与品
质的关系研究［Ｊ］ ．食品科学，２００８，２９（４）：２３０⁃２３３．
［１７］ 　 魏景超．真菌鉴定手册［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，１９７９．
［１８］ 　 巴尼特．酵母菌的特征与鉴定手册［Ｍ］．青岛：青岛海洋大学
出版社，１９９１．
［１９］ 　 布坎南 Ｒ Ｅ，吉本斯 Ｎ Ｅ．伯杰细菌鉴定手册［Ｍ］．８ 版．北京：
科学出版社，１９８４．
［２０］ 　 Ｚｈａｏ Ｚ Ｊ，Ｔｏｎｇ Ｈ Ｒ，Ｚｈｏｕ Ｌ，ｅｔ ａｌ．Ｆｕｎｇａｌ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｕ′ｅｒｈ
ｔｅａ ｉｎ Ｙｕｎｎａｎ［Ｊ］ ．Ｆｏｏｄ Ｓａｆｅｔｙ，２０１０，３０（４）：７６９⁃７８４．
（责任编辑　 荀志金）
２０１ 生　 物　 加　 工　 过　 程　 　 第 １３卷