全 文 ：核 农 学 报　 ２０１４，２８（６）：０９７８ ～ ０９８４
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
收稿日期：２０１３⁃１０⁃３１　 接受日期：２０１４⁃０４⁃１０
基金项目：“十二五”农村领域国家科技计划课题（２０１２ＢＡＤ０１Ｂ０３０２）
作者简介：李媛，女，主要从事杨树多倍体育种研究。 Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｌｉ⁃ｙｕａｎ２２２＠ １６３． ｃｏｍ
通讯作者：康向阳，男，教授，主要从事林木倍性育种与细胞遗传学研究。 Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｋａｎｇｘｙ＠ ｂｊｆｕ． ｅｄｕ． ｃｎ
文章编号：１０００⁃８５５１（２０１４）０６⁃０９７８⁃０７
适宜多基因型青杨杂种叶片再生体系建立
李　 媛　 黄　 振　 王沛琦　 李　 赟　 康向阳
（北京林业大学林木育种国家工程实验室 ／林木花卉遗传育种教育部重点实验室，北京　 １０００８３）
摘　 要：以青杨杂种全同胞家系内 ３０ 个基因型的叶片为外植体，研究培养基、基因型及基因型 ×培养基
互作效应对青杨杂种叶片分化的影响，筛选适合多基因型青杨叶片分化的广谱型培养基，为对青杨从群
体水平进行遗传转化和多倍体诱导奠定技术基础。 研究结果表明：（１）基因型、培养基、基因型 ×培养
基互作效应对青杨杂种叶片分化的影响极显著。 （２）筛选出适合多基因型叶片分化的广谱型培养基为
ＭＳ ＋６ － ＢＡ０􀆰 ４ ｍｇ·Ｌ － １ ＋ ＮＡＡ ０􀆰 ０５ ｍｇ·Ｌ － １，可满足 ５６􀆰 ７％的青杨杂种基因型叶片分化，分化率可达
７０％以上。 研究认为：在对群体再生生产中，应充分利用基因型 ×培养基互作效应，通过广谱型培养基
实现大多数基因型青杨杂种叶片分化体系建立，并通过特殊培养基解决特殊基因型的青杨杂种叶片分
化体系建立问题。
关键词：青杨杂种；多基因型；叶片分化；培养基
ＤＯＩ：１０􀆰 １１８６９ ／ ｊ． ｉｓｓｎ． １００⁃８５５１􀆰 ２０１４􀆰 ０６． ０９７８
　 　 植物离体再生体系的建立是实现遗传转化、多倍
体诱导以及规模化快速繁殖的技术基础［１］。 建立植
物离体再生体系所采用的外植体包括茎段、茎尖、原生
质体、叶片、花药、叶柄、未授粉子房、胚乳等［２ － ８］，其中
以叶片应用最为普遍。 由于基因型对叶片分化具有显
著影响［９ － １４］，因此在进行遗传转化或体细胞多倍体诱
导等遗传改良应用时，往往采用一个基因型的叶片离
体再生体系，或者是为不同基因型分别建立一个叶片
离体再生体系。
杨树（Ｐｏｐｕｌｕｓ ｓｐｐ）是我国重要的用材树种，也是林
木遗传变异研究的模式树种［１５］。 目前，在杨树中研究
多基因型叶片离体再生的很少，只有姚娜等［１４］对毛白
杨 ５个基因型进行了不同基因型叶片分化差异的比较
研究，但并未建立适宜多基因型的广谱型叶片离体再生
体系。 研究适合多基因型叶片再生体系，在离体条件下
把杨树遗传研究引入群体水平，对提高杨树遗传改良效
率具有重要意义。 本研究以 ３０ 个青杨 （ Ｐｏｐｕｌｕｓ
ｃａｔｈａｙａｎａ）全同胞家系为材料，在初步探索青杨杂种叶
片分化激素种类及浓度范围的基础上，对多基因型杂种
群体与培养基环境互作进行研究，筛选适合多基因型青
杨杂种叶片分化的广谱型培养基，为优良青杨杂种的遗
传转化和多倍体诱导等奠定技术基础。
１　 材料与方法
１􀆰 １　 试验材料
杂交母本为优良青杨无性系哲引 ３ 号杨（Ｐｏｐｕｌｕｓ
ｐｓｅｕｄｏ⁃ｓｉｍｏｎｉｉ × Ｐ． ｎｉｇｒａ ‘Ｚｈｅｙｉｎ３＃’），取自内蒙古自
治区通辽市奈曼旗兴隆召林场。 父本为北京杨（Ｐ． ×
ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ），取自北京林业大学校园内。 采集父母本
花枝在 ２０℃左右室内切枝水培、杂交，获得哲引 ３ 号
杨 ×北京杨的全同胞杂种种子。 采集成熟而未开裂的
蒴果，经 ７０％酒精与 ３０％ ８４ 消毒液常规消毒后，解剖
蒴果，将去除种毛后的种子接种于不添加任何激素的
ＭＳ基本培养基中萌发生长。 连续继代培养 ３ ～ ５ 次
后，将茎段转接至 ＮＡＡ 浓度为 ０􀆰 ５ ｍｇ·Ｌ － １的 ＭＳ培养
基中进行增殖培养，从而建立含 ２００ 个基因型的青杨
全同胞家系。
１􀆰 ２　 叶片分化培养基筛选
选取基因型 ２、５、３１、３６、６１ 生长 ４０ ｄ 的杂种苗第
８７９
　 ６ 期 适宜多基因型青杨杂种叶片再生体系建立
２ ～ ３ 片健壮叶片，去除叶柄和叶尖端，从垂直于主脉
一侧剪出 ２ 道伤口（伤口要剪过叶片主脉），叶片近轴
面向下，接种于按完全随机区组设计的叶片不定芽诱
导培养基中（表 １），培养 ２０ｄ 后统计叶片分化率。 试
验重复 ３ 次，每处理 ５ 个基因型，每个基因型 １０ 个叶
片。
表 １　 叶片不定芽诱导培养基
Ｔａｂｌｅ １　 Ｔｈｅ ｍｅｄｉｕｍ ｏｆ ｌｅａｖｅｓ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
培养基编号
Ｎｏ． ｏｆ Ｍｅｄｉｕｍ
激素浓度 Ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ／ （ｍｇ·Ｌ － １）
６ － ＢＡ ＮＡＡ ＴＤＺ
ＦＨ１ ０􀆰 ８０ ０􀆰 ２０ ０􀆰 ００
ＦＨ２ ０􀆰 ４０ ０􀆰 ２０ ０􀆰 ００
ＦＨ３ ０􀆰 ２０ ０􀆰 ２０ ０􀆰 ００
ＦＨ４ ０􀆰 ４０ ０􀆰 １０ ０􀆰 ００
ＦＨ５ ０􀆰 ４０ ０􀆰 １０ ０􀆰 ０５
ＦＨ６ １􀆰 ５０ ０􀆰 １０ ０􀆰 ００
Ｆｓ ０􀆰 ４０ ０􀆰 ０５ ０􀆰 ００
表 ２　 青杨杂种叶片在不同分化培养基中的分化率与形态变化
Ｔａｂｌｅ ２　 Ｌｅａｖｅｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｎｄ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｄｉｕｍ
培养基
Ｍｅｄｉｕｍ
接种基因型
Ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ ｇｅｎｏｔｙｐｅ
分化基因型
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｇｅｎｏｔｙｐｅ
分化率 ／ ％
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ
叶片形态变化描述
Ｔｈｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｌｅａｖｅｓ
ＦＨ１ ５ ４ ２８􀆰 ７ ± ４􀆰 ４ｃ 叶片变脆，芽黄绿，分化芽数少
ＦＨ２ ５ ２ １０􀆰 ７ ± ３􀆰 １ｄ 叶片枯黄，分化率低，芽黄小
ＦＨ３ ５ ０ ０􀆰 ０ｅ 叶片枯黄，少有突起的芽点
ＦＨ４ ５ ３ ４６􀆰 ０ ± ４􀆰 ０ｂ 叶片绿，芽绿色，芽数少但大
ＦＨ５ ５ ０ ０􀆰 ０ｅ 叶片增厚，变脆、玻璃化
ＦＨ６ ５ ２ １０􀆰 ０ ± ０ｄ 叶片增厚，变脆，分化叶子，无茎
Ｆｓ ５ ５ ５９􀆰 ３ ± ３􀆰 １ａ 叶片绿色，芽数多且伸长
　 　 注：表中小写字母表示 Ｐ ＜ ０􀆰 ０５ 水平差异显著。 表 ５、表 ６ 与此相同。
Ｎｏｔｅ： Ｔｈｅ ｓｍａｌｌ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ ０􀆰 ０５． Ｔｈｅ ｓａｍｅ ａｓ ｔａｂｌｅ ５ ａｎｄ ６．
１􀆰 ３　 培养基、基因型以及基因型 ×培养基互作效应对
叶片分化效果的影响
从 ２００ 个青杨杂种基因型中选取 ３０ 个基因型，分
别将其叶片接种于 Ｆｄ（ＭＳ ＋０􀆰 ２ ｍｇ·Ｌ － １ ６ － ＢＡ ＋０􀆰 ０２
ｍｇ·Ｌ － １ ＮＡＡ）、Ｆｓ（ＭＳ ＋０􀆰 ４ ｍｇ·Ｌ － １ ６ － ＢＡ ＋ ０􀆰 ０５ ｍｇ
·Ｌ － １ＮＡＡ）以及 Ｆｇ（ＭＳ ＋０􀆰 ８ ｍｇ·Ｌ － １ ６ － ＢＡ ＋０􀆰 １ ｍｇ·
Ｌ － １ＮＡＡ）三种叶片分化培养基中进行多基因型叶片
分化。 培养 ２０ ｄ后，统计叶片分化率。 然后将分化的
叶片切成 １ｃｍ ×０􀆰 ５ｃｍ的小块，再转入相同培养基中，
培养 １５ｄ后统计有效芽（高度≥１ｃｍ 的不定芽为有效
芽）数目。 试验重复 ３ 次，每处理 １０ 个叶片。
１􀆰 ４　 培养条件
培养温度为 ２５ ± ２℃，光照强度 ２０００ ｌｘ，光照周期
为 １４ ｈ光 ／ １０ ｈ暗，培养基 ｐＨ值为 ６􀆰 ０ ± ０􀆰 ２。
１􀆰 ５　 统计分析方法
分化率 ＝发生分化的外植体数 ／接种外植体总数
× １００％ ；增殖系数 ＝有效芽总数 ／分化叶片总数。
数据分析采用 Ｅｘｃｅｌ 和 ＳＰＳＳ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２０ 统计分
析软件进行方差分析和多重比较。 本研究中所涉及的
百分比数据需经反正弦变换后再进行差异显著性分
析。
２　 结果与分析
２􀆰 １　 青杨杂种叶片分化培养基筛选
５ 个青杨杂种基因型叶片在 ７ 种分化培养基中培
养 ２０ｄ后，分别调查其叶片分化率并记录叶片形态变
化。 ５ 个基因型在不同分化培养基中的分化率和叶片
形态变化情况见表 ２。
表 ３　 不同培养基青杨杂种叶片分化率的方差分析
Ｔａｂｌｅ ３　 Ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｌｅａｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ ｏｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｄｉｕｍ
变异来源
Ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｓｏｕｒｃｅ
自由度
ｄｆ
均方
ＭＳ Ｆ Ｐ
培养基 Ｍｅｄｉｕｍ ６ １１５９􀆰 １ １９９􀆰 ０ ０． ０００
随机误差 Ｒａｎｄｏｍ ｅｒｒｏｒ １４ ５􀆰 ８
总计 Ｔｏｔａｌ ２０
　 　 由表 ２ 可知，５ 种青杨杂种基因型叶片在添加不
同浓度 ６ － ＢＡ、ＮＡＡ以及 ＴＤＺ的分化培养基中分化率
以及发生分化的基因型数目具有明显的差异，其中以
９７９
核　 农　 学　 报 ２８ 卷
６ － ＢＡ浓度为 ０􀆰 ４ ｍｇ·Ｌ － １、ＮＡＡ 浓度为 ０􀆰 ０５ ｍｇ·Ｌ － １
的分化培养基中的分化率最高且分化的基因型数量
多，叶片分化率达 ５９􀆰 ３％ ，叶片一直保持绿色，不定芽
数目多且生长快；６ － ＢＡ 浓度为 ０􀆰 ２ ｍｇ·Ｌ － １、ＮＡＡ 浓
度为 ０􀆰 ２ ｍｇ·Ｌ － １或 ６ － ＢＡ 浓度为 ０􀆰 ４ ｍｇ·Ｌ － １、ＮＡＡ
浓度为 ０􀆰 １ ｍｇ·Ｌ － １的分化培养基中叶片基本不分化。
从表 ２ 还可以看出，高浓度的 ６ － ＢＡ或添加 ＴＤＺ的培
养基易导致叶片增厚、变脆、玻璃化。 ６ － ＢＡ ／ ＮＡＡ 浓
度比降低则易导致叶片枯黄，至不分化。 ５ 种青杨杂
种基因型叶片在 ７ 种分化培养基中分化率的方差分析
结果表明，分化培养基对青杨杂种基因型的叶片分化
具有极显著的影响。 Ｆｓ 分化培养基的叶片分化率显
著高于其它 ６ 种分化培养基的分化率，初步筛选出适
宜青杨杂种叶片分化的培养基为 Ｆｓ培养基。
表 ４　 不同基因型在不同培养基上的叶片分化率和增殖系数方差分析
Ｔａｂｌｅ ４　 Ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｌｅａｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｎｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｏｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｄｉｕｍ
变异来源
Ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｓｏｕｒｃｅ
自由度
ｄｆ
均方 ＭＳ Ｆ Ｓｉｇ．
分化率
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
增殖系数
Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ
分化率
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
增殖系数
Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ
分化率
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
增殖系数
Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ
培养基 Ｍｅｄｉｕｍ ２ １９０３４􀆰 ８０ １０６８􀆰 ７０ １８５􀆰 ６０ １４３􀆰 ６０ ０． ００ ０． ００
基因型 Ｇｅｎｏｔｙｐｅ ２９ １６８７􀆰 ００ ９７􀆰 ４０ １６􀆰 ５０ １３􀆰 １０ ０． ００ ０． ００
Ｇ × Ｅ ５８ ７７４􀆰 ４０ ４１􀆰 ４０ ７􀆰 ６０ ５􀆰 ６０ ０． ００ ０． ００
误差 Ｅｒｒｏｒ １８０ １０２􀆰 ５０ ７􀆰 ４４
总计 Ｔｏｔａｌ ２６９
２􀆰 ２　 培养基、基因型以及培养基 ×基因型互作效应对
叶片分化的影响
２􀆰 ２􀆰 １　 培养基对青杨杂种叶片分化的影响　 围绕初
步筛选出的适宜叶片分化的培养基开展培养基、基因
型以及培养基 ×基因型互作效应对青杨杂种叶片分化
的影响。 ３０ 个基因型的叶片在 Ｆｄ、Ｆｓ 以及 Ｆｇ３ 种叶
片分化培养基中培养 １０ｄ 后，大部分基因型的叶片切
口处开始形成浅绿色突起；培养 ２０ｄ后，叶脉及切口处
出现大量丛生不定芽（图 ３ － Ａ）。 此时，将分化叶片
转接至相同培养基中继续 １０ｄ 后，丛生芽明显伸长
（图 ３ － Ｂ）。 分别调查培养基对青杨杂种叶片分化率
和增殖系数的影响，结果分别见图 １、图 ２。
　 　 由图 １、图 ２ 可知，３０ 个青杨杂种叶片在 ３ 种分化
培养基中的分化率和增殖系数存在明显的差异，其中
以 Ｆｓ分化培养基的分化率和增殖系数最高，平均分化
率和平均增殖系数分别为 ７１􀆰 ４％ 、８􀆰 ３；Ｆｇ分化培养基
的分化率和增殖系数最低，平均分化率和平均增殖系
数分别为 ３２􀆰 ６％ 、１􀆰 ４。 ３０ 个基因型在 ３ 种不同分化
图 １　 培养基对青杨杂种叶片分化率的影响
Ｆｉｇ． １　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｅｄｉａ ｏｎ ｌｅａｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ ｉｎ ｈｙｂｒｉｄｓ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ ｃａｔｈａｙａｎａ
图 ２　 培养基对青杨杂种叶片
增殖系数的影响
Ｆｉｇ． ２　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｅｄｉａ ｏｎ ｌｅａｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｉｎ ｈｙｂｒｉｄｓ ｏｆ
Ｐｏｐｕｌｕｓ ｃａｔｈａｙａｎａ
０８９
　 ６ 期 适宜多基因型青杨杂种叶片再生体系建立
培养基中的平均分化率和平均增殖系数的方差分析结
果表明，培养基对青杨杂种叶片分化率以及增殖系数
的影响均达到了极显著水平（表 ４）。 进一步对不同培
养基的叶片分化率以及增殖系数进行多重比较，结果
显示 Ｆｓ分化培养基的叶片分化率以及增殖系数均显
著高于 Ｆｄ以及 Ｆｇ２ 种分化培养基的叶片分化率和增
殖系数（图 １、图 ２）。 这表明 Ｆｓ 培养基为适宜青杨杂
种叶片分化的 １ 种广谱型分化培养基。
２􀆰 ２􀆰 ２　 基因型对青杨杂种叶片分化的影响　 ３０ 个青
杨杂种基因型的平均叶片分化率和平均增殖系数统计
结果见表 ５。
表 ５　 基因型对青杨杂种叶片分化的影响
Ｔａｂｌｅ ５　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｏｎ ｌｅａｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｈｙｂｒｉｄｓ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ ｃａｔｈａｙａｎａ
基因型
Ｇｅｎｏｔｙｐｅ
平均分化率
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ／ ％
平均增殖系数
Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ／个
基因型
Ｇｅｎｏｔｙｐｅ
平均分化率
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ／ ％
平均增殖系数
Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ／个
２ ５２􀆰 ２ ± １􀆰 ３ｅｆｇ ５􀆰 ５ ± １􀆰 ３ｃｄｅｆｇｈ ６９ ７３􀆰 ３ ± ２􀆰 １ａｂ ９􀆰 ４ ± ２􀆰 １ｂ
３ ５５􀆰 ６ ± １􀆰 １ｄｅｆ ４􀆰 ８ ± １􀆰 １ｃｄｅｆｇｈｉ ７１ ５０􀆰 ０ ± １􀆰 ２ｅｆｇ ３􀆰 ４ ± １􀆰 ２ｆｇｈｉｊｋｌ
５ ５５􀆰 ６ ± １􀆰 ０ｄｅｆ ４􀆰 ４ ± １􀆰 ０ｄｅｆｇｈｉ ７２ ５５􀆰 ６ ± ３􀆰 ２ｄｅｆ ５􀆰 ８ ± ３􀆰 ２ｃｄｅｆｇ
８ ３２􀆰 ２ ± ０􀆰 ２ｈｉｊ １􀆰 ０ ± ０􀆰 ２ｊｋｌ ７５ ６７􀆰 ８ ± ２􀆰 ２ａｂｃｄ ７􀆰 ３ ± ２􀆰 ２ｂｃｄ
９ ６７􀆰 ８ ± ３􀆰 ４ａｂｃｄ １２􀆰 ８ ± ３􀆰 ４ａ ７７ ７７􀆰 ８ ± １􀆰 ４ａ ６􀆰 ７ ± １􀆰 ４ｂｃｄｅ
２１ ５８􀆰 ９ ± ０􀆰 ７ｃｄｅｆ ３􀆰 ８ ± ０􀆰 ７ｅｆｇｈｉｊｋ ８２ ４１􀆰 １ ± １􀆰 ０ｇｈ ２􀆰 ７ ± １􀆰 ０ｈｉｊｋｌ
２４ ４７􀆰 ８ ± ２􀆰 ７ｅｆｇ ５􀆰 ８ ± ２􀆰 ７ｃｄｅｆｇ １２１ ５７􀆰 ８ ± １􀆰 ２ｃｄｅｆ ３􀆰 ７ ± １􀆰 ２ｅｆｇｈｉｊｋｌ
３１ ５０􀆰 ０ ± ０􀆰 ６ｅｆｇ ４􀆰 ０ ± ０􀆰 ６ｅｆｇｈｉｊ １２３ ２７􀆰 ８ ± ０􀆰 ４ｈｉｊｋ １􀆰 １ ± ０􀆰 ４ｊｋｌ
３６ ５２􀆰 ２ ± ０􀆰 ５ｅｆｇ ２􀆰 ７ ± ０􀆰 ５ｈｉｊｋｌ １２５ １５􀆰 ６ ± ０􀆰 ３ｋ ０􀆰 ７ ± ０􀆰 ３ｌ
３８ ７４􀆰 ４ ± ３􀆰 ６ａｂ １４􀆰 １ ± ３􀆰 ６ａ １２９ ２６􀆰 ７ ± ０􀆰 ７ｉｊｋ １􀆰 ８ ± ０􀆰 ７ｉｊｋｌ
４０ ３１􀆰 １ ± １􀆰 １ｈｉｊ ２􀆰 ３ ± １􀆰 １ｉｊｋｌ １５９ ７４􀆰 ４ ± ２􀆰 １ａｂ ７􀆰 ４ ± ２􀆰 １ｂｃ
４３ ４５􀆰 ６ ± ０􀆰 ８ｆｇ ２􀆰 ８ ± ０􀆰 ８ｇｈｉｊｋｌ １６２ ６２􀆰 ２ ± ０􀆰 ７ｂｃｄｅ ３􀆰 ８ ± ０􀆰 ７ｅｆｇｈｉｊｋ
５０ ３８􀆰 ９ ± １􀆰 ３ｇｈｉ ２􀆰 ８ ± １􀆰 ３ｇｈｉｊｋｌ １６３ １８􀆰 ９ ± ０􀆰 ５ｊｋ ０􀆰 ９ ± ０􀆰 ５ｊｋｌ
５７ ４７􀆰 ８ ± １􀆰 ８ｅｆｇ ４􀆰 ７ ± １􀆰 ８ｃｄｅｆｇｈｉ １７１ ７１􀆰 １ ± １􀆰 ９ａｂｃ ７􀆰 ６ ± １􀆰 ９ｂｃ
６１ ５７􀆰 ８ ± １􀆰 ８ｃｄｅｆ ６􀆰 ４ ± １􀆰 ８ｃｄｅｆ １７２ ２２􀆰 ２ ± ０􀆰 ４ ｊｋ ０􀆰 ９ ± ０􀆰 ４ｋｌ
　 　 由表 ５ 可以可知，３０ 个青杨杂种的平均分化率以
及平均增殖系数间存在一定的差异，不同基因型的平
均分化率变动范围介于 １５􀆰 ６％ ～ ７７􀆰 ８％ ，而增殖系数
则在 ０􀆰 ７ ～ １４􀆰 １ 之间变化。 ３０ 个青杨杂种基因型的
叶片分化率和增殖系数的方差分析结果表明，基因型
对叶片分化和增殖系数均有极显著的影响（表 ４）。 ３０
个基因型的叶片分化率和增殖系数的 Ｄｕｎｃａｎ 多重比
较结果显示，基因型 ７７、３８、１５９、６９ 以及 １７１ 这 ５ 种基
因型的叶片分化率均高于 ７０％ ，显著大于 ３、５、７２ 等
１９ 种基因型的叶片分化率；基因型 ３８、９ 这 ２ 种基因
型的增殖系数高于 １２􀆰 ０，显著大于 ６９、１７１、１５９、７５ 以
及 ７７ 等 ２８ 种基因型的增殖系数。 由此可见，不同基
因型青杨杂种叶片分化能力存在极显著的差异。
２􀆰 ２􀆰 ３　 基因型 ×培养基互作效应对叶片分化影响　
３０ 个青杨杂种基因型叶片在 ３ 种分化培养基中平均
分化率和平均增殖系数见表 ６。
　 　 由 ７ 可知，３０ 个青杨杂种基因型在不同分化培养
基中的叶片分化率和增殖系数存在较大差异，其中在
Ｆｄ分化培养基中的分化率以及增殖系数的变化范围
分别为 ０ ～ ９３􀆰 ３％ 、０ ～ １３􀆰 ４，在 Ｆｓ 分化培养基中的分
化率以及增殖系数的变化范围分别为 ３３􀆰 ３ ～ ９６􀆰 ７％ 、
０􀆰 ７ ～ ２０􀆰 ４，在 Ｆｇ 分化培养基中的分化率的变化范围
为 ０ ～ ６０􀆰 ０％ 、０ ～ ４􀆰 ０。 ３０ 个青杨杂种基因型在 ３ 种
不同培养基中叶片分化率以及增殖系数的差异显著性
分析结果表明，基因型 ×培养基互作效应对叶片分化
以及增殖系数的影响均达到了极显著水平（表 ４）。 叶
片分化率以及增殖系数的基因型 ×培养基互作效应多
重比较结果显示，基因型 ９、１５９、１７１、７５、６１、７７、６９、
１６２、３８ 适宜在分化培养基 Ｆｄ 中进行叶片分化培养，
分化可达 ７６􀆰 ７％ ～ ９３􀆰 ３％ ，增殖系数为 ５􀆰 １ ～ １５􀆰 ５；基
因型 ７２、７５、９、３８、７７、１２１、５７、５０、６９、８２、３、６１ 等 １７ 种
基因型适宜在分化培养基 Ｆｓ中进行叶片分化培养，分
化可达 ７０􀆰 ０％ ～９６􀆰 ７％ ，增殖系数为 ４􀆰 １ ～ ２０􀆰 ４；３０ 个
青杨杂种基因型在分化培养基 Ｆｇ 中的分化率均低
６０􀆰 ０％ ，增殖系数均小于 ３􀆰 ０，不适宜于青杨杂种的叶
１８９
核　 农　 学　 报 ２８ 卷
　 　 　 　 　 　 表 ６　 基因型 ×培养基互作效应对青杨杂种叶片分化的影响
Ｔａｂｌｅ． ６　 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｇｅｎｏｔｙｐｅ × ｍｅｄｉｕｍ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｎ ｌｅａｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｈｙｂｒｉｄｓ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ ｃａｔｈａｙａｎａ
基因型
Ｇｅｎｏｔｙｐｅ
Ｆｄ Ｆｓ Ｆｇ
平均分化率 ／ ％
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｒａｔｅ
平均增殖系
Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ数 ／个
平均分化
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ率 ／ ％
平均增殖系数
Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ／个
平均分化率
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
ｒａｔｅ ／ ％
平均增殖系数
Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ／个
２ ４３􀆰 ３ ± ２０􀆰 ３ｅｆｇｈ ３􀆰 ４ ± １􀆰 ０ｅｆ ６３􀆰 ３ ± ６􀆰 ７ｃｄｅｆｇｈ ７􀆰 ２ ± ３􀆰 １ｂｃｄ ５０􀆰 ０ ± １１􀆰 ６ａｂ ２􀆰 ９ ± ０􀆰 ６ａｂｃ
３ ４３􀆰 ３ ± １４􀆰 ５ ｅｆｇｈ ３􀆰 ０ ± １􀆰 ３ａｂ ８３􀆰 ３ ± ８􀆰 ８ ａｂｃｄｅ ６􀆰 ３ ± ２􀆰 ７ ｂｃｄ ４０􀆰 ０ ± １０􀆰 ０ａｂｃ ２􀆰 ８ ± １􀆰 ２ａｂｃｄ
５ ６３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ ｃｄｅ ３􀆰 ６ ± ０􀆰 ４ｅｆ ６６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ｂｃｄｅｆｇｈ ４􀆰 ９ ± ２􀆰 ２ ｂｃｄ ３６􀆰 ７ ± ８􀆰 ８ｂｃｄ １􀆰 ５ ± ０􀆰 ６ ｃｄｅｆｇｈｉｊ
８ ４６􀆰 ７ ± ３􀆰 ３ ｅｆｇｈ １􀆰 ７ ± ０􀆰 ３ｅｆ ３３􀆰 ３ ± ８􀆰 ８ｉ ０􀆰 ７ ± ０􀆰 ４ｄ １６􀆰 ７ ± ３􀆰 ３ｄｅｆ ０􀆰 ４ ± ０􀆰 １ｈｉｊ
９ ９３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ａ １３􀆰 ５ ± １􀆰 ４ａｂ ９３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ａｂ １６􀆰 ８ ± ７􀆰 ２ａｂ １６􀆰 ７ ± ３􀆰 ３ｄｅｆ ０􀆰 ７ ± ０􀆰 １ｇｈｉｊ
２１ ５０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ｅｆｇ ４􀆰 １ ± ０􀆰 ４ｅｆ ７６􀆰 ７ ± ８􀆰 ８ ａｂｃｄｅｆ ４􀆰 ５ ± ２􀆰 ３ ｂｃｄ ５０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａｂ １􀆰 ７ ± ０􀆰 ６ ｂｃｄｅｆｇｈｉ
２４ １０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ｉｊ ０􀆰 ２ ± ０􀆰 １ｆ ７３􀆰 ３ ± １２􀆰 ０ａｂｃｄｅｆｇ １３􀆰 ７ ± ５􀆰 ９ａｂｃ ６０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａ １􀆰 ７ ± ０􀆰 ２ ｂｃｄｅｆｇｈｉ
３１ ６０􀆰 ０ ± １０􀆰 ０ ｃｄｅｆ ４􀆰 ２ ± ０􀆰 ７ｅｆ ５３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ｆｇｈｉ ３􀆰 ６ ± １􀆰 ６ｃｄ ３６􀆰 ７ ± １２􀆰 ０ｂｃｄ ２􀆰 ３ ± ０􀆰 ８ｂｃｄｅｆｇ
３６ ６６􀆰 ６７ ± ８􀆰 ８２ ｂｃｄｅ ３􀆰 ２ ± １􀆰 ０ｅｆ ５３􀆰 ３ ± ６􀆰 ７ｆｇｈｉ ２􀆰 ４ ± １􀆰 １ｃｄ ３６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ｂｃｄ １􀆰 １ ± ０􀆰 ２ｅｆｇｈｉｊ
３８ ７６􀆰 ７ ± ８􀆰 ８ ａｂｃｄ １０􀆰 ９ ± １􀆰 ４ａｂｃ ９３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ａｂ ２０􀆰 ４ ± ９􀆰 ４ａ ５３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ａｂ ４􀆰 ０ ± １􀆰 ３ａ
４０ ３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ｊ ０􀆰 １ ± ０􀆰 １ｆ ６６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ ｂｃｄｅｆｇｈ ４􀆰 ０ ± ２􀆰 ５ ｃｄ ２３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ｃｄｅ ０􀆰 ９ ± ０􀆰 ２ ｆｇｈｉｊ
４３ ６６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ｂｃｄｅ ４􀆰 ５ ± ０􀆰 ３ｅｆ ６０􀆰 ０ ± １０􀆰 ０ｄｅｆｇｈｉ ２􀆰 ９ ± １􀆰 ７ｃｄ １０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ｅｆ ０􀆰 ２ ± ０􀆰 ２ ｉｊ
５０ ０􀆰 ０ｊ　 　 ０􀆰 ０ｆ　 　 ９０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａｂｃ ６􀆰 ３ ± ３􀆰 ０ｂｃｄ ２６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ｃｄｅ ０􀆰 ９ ± ０􀆰 １ｆｇｈｉｊ
５７ ５３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ｄｅｆｇ ２􀆰 ６ ± ０􀆰 ３ｅｆ ９０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａｂｃ ７􀆰 ３ ± ３􀆰 ７ ｂｃｄ ０􀆰 ０ｆ　 　 ０􀆰 ０ｊ　 　
６１ ８０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａｂｃ ９􀆰 ６ ± ２􀆰 １ｂｃｄ ７６􀆰 ７ ± ３􀆰 ３ ａｂｃｄｅｆ ７􀆰 １ ± ４􀆰 ２ ｂｃｄ １６􀆰 ７ ± ３􀆰 ３ｂｃｄ ０􀆰 ８ ± ０􀆰 １ｇｈｉｊ
６９ ７６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ ａｂｃｄ １３􀆰 ４ ± ４􀆰 ０ａｂ ８６􀆰 ７ ± ８􀆰 ８ ａｂｃｄ ９􀆰 ７ ± ４􀆰 ２ ａｂｃｄ ５６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ａｂ ３􀆰 ０ ± ０􀆰 ６ａｂｃ
７１ ２３􀆰 ３ ± ８􀆰 ８ ｈｉｊ ０􀆰 ７ ± ０􀆰 ３ｆ ７３􀆰 ３ ± １４􀆰 ５ａｂｃｄｅｆｇ ６􀆰 ８ ± ２􀆰 ９ ｂｃｄ ５３􀆰 ３ ± ８􀆰 ８ａｂ １􀆰 ８ ± ０􀆰 ３ｂｃｄｅｆｇｈｉ
７２ ３０􀆰 ０ ± １０􀆰 ０ ｇｈｉ １􀆰 ０ ± ０􀆰 ４ｆ ９６􀆰 ７ ± ３􀆰 ３ａ １３􀆰 ７ ± ８􀆰 ４ ａｂｃｄ ４０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａｂｃ １􀆰 ２ ± ０􀆰 ２ ｄｅｆｇｈｉｊ
７５ ８３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ａｂｃ １５􀆰 ５ ± １􀆰 ２ａ ９６􀆰 ７ ± ３􀆰 ３ａ ４􀆰 １ ± １􀆰 ８ ｃｄ ２３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ｃｄｅ ０􀆰 ６ ± ０ｈｉｊ
７７ ８０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａｂｃ ６􀆰 ９ ± １􀆰 ３ｃｄｅ ９３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ａｂ ８􀆰 ５ ± ４􀆰 ０ ｂｃｄ ６０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａ ２􀆰 ５ ± ０􀆰 ３ｂｃｄｅ
８２ １０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ｉｊ ０􀆰 ３ ± ０􀆰 ２ａ ８６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ ａｂｃｄ ４􀆰 ４ ± １􀆰 ９ ｂｃｄ ２６􀆰 ７ ± ８􀆰 ８ｃｄｅ １􀆰 ３ ± ０􀆰 ３ｄｅｆｇｈｉｊ
１２１ ２３􀆰 ３ ± ８􀆰 ８ｈｉｊ ０􀆰 ８ ± ０􀆰 ２ａ ９３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ａｂ ５􀆰 ５ ± ２􀆰 ６ ｂｃｄ ５６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ａｂ ２􀆰 ４ ± ０􀆰 ３ ｂｃｄｅｆ
１２３ ３６􀆰 ７ ± ８􀆰 ８ｆｇｈ １ ± ０􀆰 ３ｆ ４６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ｇｈｉ １􀆰 ７ ± ０􀆰 ８ ｃｄ ０􀆰 ０ｆ　 　 ０􀆰 ０ｊ　 　
１２５ ０􀆰 ０ｊ　 　 ０􀆰 ０ｆ　 　 ４０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ｈｉ １􀆰 ４ ± ０􀆰 ６ｃｄ ６􀆰 ７ ± ３􀆰 ３ｅｆ ０􀆰 ３ ± ０􀆰 ２ ｉｊ
１２９ ３３􀆰 ３ ± ３􀆰 ３ｇｈｉ １􀆰 ２ ± ０􀆰 １ｆ ４６􀆰 ７ ± １４􀆰 ５ｇｈｉ ３􀆰 ０ ± １􀆰 ７ｃｄ ０􀆰 ０ｆ　 　 ０􀆰 ０ｊ　 　
１５９ ９０􀆰 ０ ± １０􀆰 ０ａｂ １１􀆰 ２ ± ５􀆰 ７ａｂｃ ７６􀆰 ７ ± ８􀆰 ８ ａｂｃｄｅｆ ６􀆰 １ ± ２􀆰 ７ ｂｃｄ ５６􀆰 ７ ± ６􀆰 ７ａｂ ３􀆰 １ ± ０􀆰 ９ａｂ
１６２ ７６􀆰 ７ ± ８􀆰 ８ａｂｃｄ ５􀆰 １ ± １􀆰 ５ｄｅｆ ６０􀆰 ０ ± １０􀆰 ０ｄｅｆｇｈｉ ３􀆰 ５ ± １􀆰 ７ｃｄ ５０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａｂ １􀆰 ７ ± ０􀆰 １ ｂｃｄｅｆｇｈｉ
１６３ ０􀆰 ０ｊ　 　 ０􀆰 ０ｆ　 　 ４６􀆰 ７ ± １２􀆰 ０ｇｈｉ １􀆰 １ ± ０􀆰 ５ｃｄ １０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ｅｆ ０􀆰 ４ ± ０􀆰 ２ｉｊ
１７１ ９０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ａｂ １０􀆰 ４ ± ２􀆰 ８ａｂｃ ７０􀆰 ０ ± ５􀆰 ７ａｂｃｄｅｆｇ ５􀆰 １ ± ２􀆰 ２ ｂｃｄ ５３􀆰 ３ ± ６􀆰 ７ａｂ ２􀆰 ０ ± ０􀆰 ４ｂｃｄｅｆｇｈ
１７２ ０． ０ｊ　 　 ０． ０ｆ　 　 ５６􀆰 ７ ± １４􀆰 ５ ｅｆｇｈｉ ２􀆰 ０ ± ０􀆰 ９ ｃｄ １０􀆰 ０ ± ５􀆰 ８ｅｆ ０􀆰 ３ ± ０􀆰 ２ｉｊｂ
片分化培养。
３　 讨论
植物器官离体再生主要受自身遗传因素、培养基、
基因型 ×培养基的交互作用以及培养环境条件的影
响。 基因型是影响植物离体再生的内在因素。 Ｇａｒｙ
等［１６］对 ５ 个黑杨基因型的茎段不定芽再生能力进行
了研究，发现基因型是影响黑杨茎段不定芽的再生的
主要因素，无性系 ８９Ｍ１１ 的茎段再生能力最强。 姚娜
等［１４］对 ５ 个毛白杨基因型的叶片再生能力开展了研
究，发现不同基因型毛白杨叶片分化所适宜的培养基
不同。 这些研究均表明，基因型对杨树植物叶片或茎
段不定芽再生影响显著。 本研究对 ３０ 个青杨杂种基
２８９
　 ６ 期 适宜多基因型青杨杂种叶片再生体系建立
因型进行叶片分化研究结果与前者基本一致，认为青
杨基因型对叶片分化具有极显著地影响，不同青杨杂
种基因型间叶片分化率和增殖系数差异显著。
培养基中的植物生长调节剂是影响植物组织培养
定向发育的重要因素。 杨树离体叶片分化主要使用的
生长调节剂是 ６ － ＢＡ、ＴＤＺ和 ＮＡＡ［１７ － １８，２２］。 研究认为
银白杨［１９］、小青杨［５］的叶片不定芽再生率高低不仅与
植物生长调节剂的种类组合及绝对浓度有关，细胞分
裂素和生长素浓度的比值也是影响其叶片分化的重要
因素。 在本研究中，细胞分裂素与生长素的绝对浓度
及浓度比值均对青杨杂种叶片分化有重要影响，适宜
其叶片分化的广谱型培养基中 ６ － ＢＡ、ＮＡＡ 浓度分别
为 ０􀆰 ４ ｍｇ·Ｌ － １、０􀆰 ０５ ｍｇ·Ｌ － １，浓度比值为 ８􀆰 ０。 也有
研究认为多种细胞分裂素配合使用较单独使用效果
好。 在有关毛白杨、新疆杨以及河北杨的组织培养研
究中就发现了此种现象［２０ － ２２］。 但是本研究中发现，添
加 ＴＤＺ易引起青杨杂种叶片增厚、玻璃化，不利于青
杨杂种叶片分化。 这可能与 ＴＤＺ 的活性高，而青杨杂
种对细胞分裂素比较敏感有关。
在遗传测定中，林木性状遗传力估算往往要受到
基因型 ×环境互作（ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｂｙ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ
ＧＥＩ）效应的影响。 Ｋａｎｇ［２３］认为这主要是由基因型对
环境刺激、生物胁迫、非生物胁迫、表现型的可塑性等
引起的，这就提示在林业生产应用中应重视环境和品
种合理配置。 本研究中，不同培养基就相当于植物生
长的微环境，不同基因型与培养基之间同样存在互作
效应。 ３０ 个青杨杂种基因型在 ３ 种不同培养基中叶
片分化效果表明，基因型 ×培养基互作效应对叶片分
化率以及增殖系数的影响均达到了极显著的水平。 ３０
个基因型中的 １７ 个基因型适于在 Ｆｓ培养基中分化，９
个基因型适于在 Ｆｄ培养基中分化。
注：Ａ： 培养 ２０ｄ的叶片分化情况；Ｂ： 继代 １０ｄ时叶片分化情况。
Ｎｏｔｅ： Ａ： Ｌｅａｆ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｆｔｅｒ ２０ｄａｙｓ’ｃｕｌｔｕｒｅ； Ｂ： Ｌｅａｆ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｆｔｅｒ １０ｄａｙｓ’ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ．
图 ３　 青杨杂种叶片不定芽分化
Ｆｉｇ． ３　 Ｌｅａｆ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｙｂｒｉｄｓ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ ｃａｔｈａｙａｎａ
４　 结论
本研究表明基因型、培养基、基因型 ×培养基互作
效应对青杨杂种叶片分化的影响极显著。 筛选出适合
多基因型叶片分化的广谱型培养基为 ＭＳ ＋ ６ － ＢＡ０􀆰 ４
ｍｇ·Ｌ － １ ＋ ＮＡＡ ０􀆰 ０５ ｍｇ·Ｌ － １，可满足 ５６􀆰 ７％的青杨杂
种基因型叶片分化，分化率可达 ７０％以上。 本研究认
为，在多基因型青杨杂种叶片分化时，可以根据情况对
基因型进行分组培养。 这样，可以充分利用基因型 ×
培养基互作效应，通过广谱型培养基实现大多数基因
型的青杨杂种叶片分化体系建立，并通过特殊培养基
解决特殊基因型的青杨杂种叶片分化体系建立问题。
本研究筛选出的广谱型培养基，为从群体水平进行遗
传转化，以及展开秋水仙素处理离体叶片诱导不定芽
染色体加倍选育四倍体奠定了一定的技术基础。
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２５２
Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｅａｆ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ Ｈｙｂｒｉｄｓ ｏｆ
Ｐｏｐｕｌｕｓ Ｃａｔｈａｙａｎａ Ｒｅｈｄ．
ＬＩ Ｙｕａｎ　 ＨＵＡＮＧ Ｚｈｅｎ　 ＷＡＮＧ Ｐｅｉ⁃ｑｉ　 ＬＩ Ｙｕｎ　 ＫＡＮＧ Ｘｉａｎｇ⁃ｙａｎｇ
（Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｉｎ Ｆｏｒｅｓｔ Ｔｒｅｅｓ ａｎｄ Ｏｒｎａｍｅｎｔａｌ Ｐｌａｎｔｓ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ
Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ／ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ Ｔｒｅｅ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ， Ｂｅｉｊｉｎｇ　 １０００８３）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｅｄｉｕｍ（Ｅ）、ｇｅｎｏｔｙｐｅ（Ｇ） ａｎｄ Ｇ × Ｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｎ ｔｈｅ ｌｅａｆ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ
ｃａｔｈａｙａｎａ，ａｎｄ ｔｏ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｔｈｅ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｍｅｄｉｕｍ， ｌｅａｖｅｓ ｏｆ ｔｈｉｒｔｙ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｆｕｌｌ⁃ｓｉｂ ｆａｍｉｌｙ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ
ｅｘｐｌａｎｔｓ． Ｒｅｌａｔｅｄ ｓｔｕｄｉｅｓ ｗｉｌｌ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｇｅｎｅｔｉｃ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｏｌｙｐｌｏｉｄｙ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ
ｃａｔｈａｙａｎａ ａｔ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｌｅｖｅｌ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｇｅｎｏｔｙｐｅ （Ｇ）， ｍｅｄｉｕｍ （Ｅ） ａｎｄ Ｇ × Ｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｈａｄ
ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｓｈｏｏｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｙｂｒｉｄｓ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ． Ｔｈｅ ｗｉｄｅｌｙ⁃ｕｓｅｄ ｍｅｄｉｕｍ ｏｆ ｓｈｏｏｔｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｌｅａｖｅｓ
ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ， ｉｔ ｉｓ ｔｈｅ ＭＳ ｍｅｄｉｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ０􀆰 ４ ｍｇ·Ｌ － １ ６ － ＢＡ ａｎｄ ０􀆰 ０５ ｍｇ·Ｌ － １ ＮＡＡ． Ｉｔ ｃａｎ ｉｎｄｕｃｔ ５６􀆰 ７％
ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ ｃａｔｈａｙａｎａ ｔｏ ｇｅｎｅｒａｔｅ ｓｈｏｏｔｓ， ｗｈｉｃｈ ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ｒｅａｃｈｅｓ ７０％ 。 Ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｔｈａｔ， ｆｏｒ ｐｌａｎｔ
ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｌｅｖｅｌ， Ｇ × Ｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｔａｋｅ ａ ｆｕｌｌ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｗｉｄｅｌｙ ｕｓｅｄ ｍｅｄｉｕｍ ｃａｎ
ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ｌｅａｆ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｔｈｅ ｍａｊｏｒｉｔｙ ｈｙｂｒｉｄｓ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ ｃａｔｈａｙａｎａ ｇｅｎｏｔｙｐｅ．
Ｈｏｗｅｖｅｒ， ｔｈｅ ｓｐｅｃｉａｌ ｍｅｄｉａ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｆｏｒ ａ ｃｅｒｔａｉｎ ｇｅｎｏｔｙｐｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｈｙｂｒｉｄｓ ｏｆ Ｐｏｐｕｌｕｓ Ｃａｔｈａｙａｎａ Ｒｅｈｄ． ； Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ； Ｌｅａｆ Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ； Ｍｅｄｉｕｍ
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