全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊缘冤院园缘源缘 耀 园缘缘员允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园猿鄄圆员摇 接受日期院圆园员猿鄄园员鄄圆员
基金项目院科技部国际合作项目渊圆园园愿阅云粤猿员员缘园冤袁福建省科技厅项目渊圆园园愿陨园园园圆冤
作者简介院姜宝杰渊员怨愿源鄄冤袁男袁山东临沂人袁硕士研究生袁研究方向为分子生物学遥 耘鄄皂葬蚤造院遭葬燥躁蚤藻躁蚤葬灶早岳 泽燥澡怎援 糟燥皂
通讯作者院庄伟建渊员怨缘愿鄄冤袁男袁福建惠安人袁博士袁教授袁主要从事花生分子生物学及遗传育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院憎藻蚤躁蚤葬灶扎员岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园缘鄄园缘源缘鄄园苑
环境胁迫诱导的花生全长 糟阅晕粤文库的构建
及序列分析
姜宝杰摇 陈摇 华摇 张摇 冲摇 邓摇 烨摇 蔡铁城摇 石新国摇 庄伟建
渊福建省作物分子与细胞生物学重点实验室袁福建 福州摇 猿缘园园园圆冤
摘摇 要院以花生新品种闽花 远 号为材料袁用生物和非生物因素胁迫处理植株袁采用 杂酝粤砸栽技术构建了花
生受低温尧干旱尧各种激素尧缺钙及黄曲霉等胁迫诱导的混合全长 糟阅晕粤 文库袁原始文库滴度为 愿郾 愿远 伊
员园远 糟枣怎袁重组率达 怨苑郾 远豫 袁插入片段多在 员 耀 圆噪遭之间袁平均大小为 员 猿园园遭责遥 该 糟阅晕粤文库的构建可用于
花生抗逆基因的发掘袁为揭示花生抗逆分子机理及花生品种改良奠定基础遥
关键词院花生曰胁迫曰杂酝粤砸栽技术曰全长 糟阅晕粤文库曰抗逆基因
摇 摇 植物在长期进化过程中袁逐渐形成了自身的防御
机制以抵抗各种不利条件的胁迫遥 植物胁迫应答
渊孕造葬灶贼 泽贼则藻泽泽 则藻泽责燥灶泽藻泽冤涉及多层次尧多途径尧多基因产
物咱员暂 遥 植物识别各式各样胁迫信号袁进行加工和处
理袁激活相应的信号转导途径袁最终诱导大量植物防卫
反应相关基因的转录表达袁从而使植物抗逆性得到表
现咱圆暂 遥 目前植物抗逆性研究工作主要集中在抗性基
因的克隆方面咱猿暂 遥 糟阅晕粤文库的构建和筛选是基因克
隆的重要方法之一袁是目前发掘新基因和研究基因功
能的基本工具咱源 原 缘暂 遥 卜庆云等咱远暂利用 孕悦砸 等方法在
二倍体马铃薯 陨灾孕员园员糟阅晕粤文库中获得马铃薯蛋白酶
抑制剂域的 糟阅晕粤袁牛洪斌等咱苑暂在水稻胚乳 糟阅晕粤 文
库中获得 员 个新的水稻谷蛋白基因全长 糟阅晕粤袁张军
科等咱愿暂筛选 糟阅晕粤文库获得 缘 条东华葡萄受白菌粉接
种诱导产生的基因遥
花生是我国重要的油料和经济作物袁也是世界四
大油料作物之一袁主要种植在热带和亚热带地区遥
花生生长发育易受到各种环境因素诸如低温尧干
旱尧湿涝和病虫等的影响袁从而造成花生减产及品质下
降遥 构建花生各种胁迫混合全长 糟阅晕粤 文库对筛选尧
分离和克隆花生耐受尧抗病基因具有重要作用遥
本试验运用 杂酝粤砸栽技术成功构建了高质量的花
生各种胁迫混合全长 糟阅晕粤文库袁包括脱落酸渊粤月粤冤尧
水杨酸渊杂粤冤尧乙烯利尧多效唑等激素胁迫袁黄曲霉侵
染尧缺钙处理以及低温尧干旱等胁迫袁并对文库质量进
行初步鉴定遥 本文库的构建为大规模表达序列标签
渊耘曾责则藻泽泽藻凿 泽藻择怎藻灶糟藻 贼葬早袁耘杂栽冤测序袁开展基因表达谱
分析袁克隆和鉴定一批花生功能基因袁以及开展重要基
因尤其是花生抗逆相关基因的功能研究奠定了基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料及处理
以下各种处理及对照花生均以本实验室选育的优
良花生品种闽花 远 号为材料遥 其中缺钙材料为大田种
植材料袁其他均为盆栽材料遥
于花生 缘 叶期喷湿不同激素渊粤月粤尧杂粤尧乙烯利尧
多效唑冤袁处理 园尧猿尧远尧员圆尧圆源澡后取第 员尧圆 叶袁经液氮速
冻后保存于 原苑园益冰箱遥 粤月粤浓度为 员园滋早窑皂蕴 原员袁杂粤
浓度为 猿皂皂燥造窑蕴 原员袁乙烯利浓度为 员皂早窑皂蕴 原员袁多效唑
浓度为 员缘园皂早窑蕴 原员袁对照喷湿蒸馏水遥 以上花生材料
为同时种植袁每处理组合设 猿 个重复遥
花生初花期进行干旱处理渊停止浇水冤袁处理 园尧猿尧
远尧怨尧员圆凿 后取花生第 员尧圆 叶及根袁经液氮速冻后保存
于 原苑园益冰箱遥 对照植株每天喷洒约 员园园皂蕴 水保持
湿润袁与处理组同步取样遥 每处理组合设 猿 个重复遥
花生初花期开始进行低温渊源益冤处理袁处理 园尧猿尧
远尧员圆尧圆源尧源愿澡后取第 员尧圆 叶及根袁经液氮速冻后保存
缘源缘
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
于 原苑园益冰箱袁对照组置于 圆愿益袁与处理组同步取样遥
每处理组合设 猿 个重复遥
取沙土盆栽下针后 源园凿 花生袁轻轻剥离花生果仁
周围沙土袁浇灌含黄曲霉孢子的浸液接种黄曲霉渊同
时停止浇水冤袁设置干旱尧湿润 圆 种平行对照袁取处理
后 园尧猿尧远尧员圆凿 源 个时期花生果皮尧种仁为材料袁经液氮
速冻后保存于 原 苑园益冰箱遥 该处理设 圆 种对照袁对照
一每天每株浇水保持湿润袁对照二停止浇水但不接种
黄曲霉遥 每处理组合设 猿 个重复遥
缺钙材料为福建省平潭县花生试验基地缺钙土壤
花生袁花生种后 源园凿开始结荚袁于结荚后 远尧怨尧员缘凿取种
仁做材料袁对照给以施钙渊源园噪早窑远远苑皂 原圆 冤处理遥 材料
经液氮速冻后保存于 原苑园益冰箱遥
员郾 圆摇 砸晕粤提取
称取相同质量的各种处理及对照材料混合放入液
氮预冷的大研钵中袁充分研磨遥 采用 悦栽粤月 法提取不
同材料混合总 砸晕粤袁经紫外分光光度计检测浓度及纯
度袁员郾 园豫琼脂糖凝胶电泳检测其完整性遥
员郾 猿摇 糟阅晕粤第一链和第二链合成摇
以 猿滋早 总 砸晕粤 为 模 板袁 以 杂酝粤砸栽 陨灾
韵造蚤早燥灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻 与 猿忆 孕悦砸 孕则蚤皂藻则 作为引物袁 按照
杂酝粤砸栽文库构建试剂盒操作合成 糟阅晕粤 第一链遥 向
孕悦砸 管中加入 圆滋蕴 单链模板尧圆郾 缘滋蕴员园 伊 耘曾 月怎枣枣藻则尧
园郾 缘滋蕴 员园皂皂燥造窑蕴 原员 凿晕栽孕尧员郾 园滋蕴缘忆 孕悦砸 引物尧园郾 圆缘滋蕴
耘曾 栽葬择袁双蒸水补足至 圆缘滋蕴袁以 蕴阅鄄孕悦砸 法合成 糟阅晕粤
第二条链遥 取 圆滋蕴双链产物电泳检测遥
糟阅晕粤第一链及第二链合成所用引物序列见表 员遥
表 员摇 糟阅晕粤第一链及第二链合成所用引物序列
栽葬遭造藻 员摇 孕则蚤皂藻则泽 怎泽藻凿 蚤灶 贼澡藻 泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 燥枣 贼澡藻 枣蚤则泽贼 葬灶凿 泽藻糟燥灶凿 泽贼葬灶凿
引物名称 孕则蚤皂藻则 灶葬皂藻 引物序列 孕则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻
猿忆孕悦砸 责则蚤皂藻则 粤粤郧悦粤郧栽郧郧栽粤栽悦粤粤悦郧悦粤郧粤郧栽郧郧悦悦郧粤郧郧悦郧郧悦悦郧粤鄄凿 渊栽冤 猿园晕 原 员晕
杂酝粤砸栽 陨灾 韵造蚤早燥灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻 粤粤郧悦粤郧栽郧郧栽粤栽悦粤粤悦郧悦粤郧粤郧栽郧郧悦悦粤栽栽粤悦郧郧悦悦郧郧郧
缘忆孕悦砸 责则蚤皂藻则 粤粤郧悦粤郧栽郧郧栽粤栽悦粤粤悦郧悦粤郧粤郧栽
员郾 源摇 糟阅晕粤文库构建
取 缘园滋蕴双链 糟阅晕粤 的 孕悦砸 产物袁加入 圆滋蕴 蛋白
酶 运渊圆园早窑蕴 原员冤袁源缘益温育 圆园皂蚤灶灭活 阅晕粤聚合酶袁经
抽提尧沉淀后溶于 苑怨滋蕴去离子水遥 加入 员缘滋蕴 泽枣蚤玉酶
于 缘园益酶切 圆澡袁再以 员郾 缘豫琼脂糖凝胶电泳酶切双
链袁回收 苑缘园遭责以上片段遥 回收产物经乙醇尧醋酸钠尧
糖原 原圆园益共沉淀后袁以 苑滋蕴 去离子水溶解袁保存于
原苑园益备用遥
酶切产物在 栽源 阅晕粤 连接酶作用下袁与质粒载体责阅晕砸 鄄 蕴陨月渊 经 泽枣蚤玉酶处理过冤 于 员远益下连接袁连接
体系为 缘滋蕴遥 连接产物经电击转化入 源缘滋蕴 感受态细
胞渊大肠杆菌 阅匀缘葬冤 后迅速加入 怨缘园滋蕴 蕴月 培养基袁
于 猿苑益震荡培养 员澡袁即得原始文库遥
员郾 缘摇 文库的鉴定及扩增
吸取 员滋蕴原始文库菌液均匀地涂在含 猿园皂早窑蕴 原员
氯霉素的 蕴月 培养板上袁培养过夜遥 统计培养板上的
单克隆数袁计算原始文库量袁原始文库量 越生长单克隆
数 伊 员园猿遥 随机挑取 源猿 个单克隆做菌液 孕悦砸袁鉴定文
库重组率遥 扩增条件为 怨源益 猿皂蚤灶曰怨源益 猿园泽袁缘缘益
猿园泽袁苑圆益 圆皂蚤灶袁猿圆 个循环曰苑圆益 员园皂蚤灶遥 随机挑取 员员
个单菌落摇菌提取质粒袁杂枣蚤玉酶切后在 员郾 园豫的琼脂
糖凝胶上电泳检测文库 糟阅晕粤插入片段大小遥 随机挑
取 猿园 个单菌落做穿刺 泽贼燥糟噪并送上海国家人类基因组
南方研究中心进行测序袁并对测序结果进行生物信息
学分析遥
按 缘园 万单克隆 辕板将剩余原始文库菌液涂于含
猿园皂早窑蕴 原员氯霉素的 蕴月 培养板上袁猿苑益过夜培养袁每板
用 员园滋蕴液体 蕴月培养基洗脱后混匀即为扩增文库袁扩
增文库用终浓度为 圆缘豫的甘油分装保存于 原 愿园益遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 砸晕粤提取结果
悦栽粤月法提取的各种处理及对照混合总 砸晕粤袁紫
外分光光度计测定 韵阅圆远园 辕 韵阅圆愿园值为 圆郾 园猿袁表明获得的砸晕粤纯度较高袁没有基因组 阅晕粤尧蛋白质及小分子污
染遥 经 员郾 园豫 的琼脂糖凝胶电泳显示 渊图 员 冤袁 圆愿杂
则砸晕粤和 员愿杂 则砸晕粤 条带清晰袁亮度比接近 圆 颐 员袁说明
砸晕粤没有降解袁比较完整遥
圆郾 圆摇 高质量 凿泽 糟阅晕粤的合成
参照 糟造燥灶贼藻糟澡公司 杂酝粤砸栽 文库构建试剂盒所示
的逆转录体系合成第一条链袁采用 蕴阅鄄孕悦砸 技术合成
凿泽 糟阅晕粤袁双链产物经 员郾 园豫琼脂糖凝胶电泳检测袁呈
现从小到大均匀分布的 杂皂藻葬则 条带袁凿泽 糟阅晕粤 片段大
远源缘
摇 缘 期 环境胁迫诱导的花生全长 糟阅晕粤文库的构建及序列分析
小分布在 园郾 圆 耀 猿郾 园噪遭之间渊图 圆冤袁主要集中于 员园园园遭责
以上袁基本代表了 皂砸晕粤的特征遥
图 员摇 花生受环境胁迫诱导的
混合总 砸晕粤电泳图
云蚤早援 员摇 郧藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 贼燥贼葬造
砸晕粤 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 责藻葬灶怎贼 贼蚤泽泽怎藻泽 憎蚤贼澡
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽贼则藻泽泽藻泽
员院阅蕴圆园园园酝葬则噪藻则曰圆院总 砸晕粤
员院 阅蕴圆园园园 酝葬则噪藻则曰 圆院 贼燥贼葬造 砸晕粤
图 圆摇 花生受环境胁迫诱导的
混合 凿泽 糟阅晕粤电泳图
云蚤早援 圆摇 郧藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 凿泽 糟阅晕粤
燥枣 责藻葬灶怎贼 贼蚤泽泽怎藻泽 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽贼则藻泽泽藻泽
员院 凿泽糟阅晕粤袁 圆院 员缘园园园 酝葬则噪藻则
员院 凿泽糟阅晕粤袁 圆院 员缘园园园 酝葬则噪藻则
圆郾 猿摇 文库质量检测结果
双链 糟阅晕粤转化感受态大肠杆菌后涂板袁培养过
夜袁统计培养板上的克隆数袁经计算袁原始文库得到
愿郾 愿远 伊 员园远个重组子遥 随机挑取 源猿 个单菌落扩增培
养袁并进行菌液 孕悦砸 扩增袁琼脂糖凝胶电泳结果显示
源圆 个克隆有插入片段袁重组率达 怨苑郾 远豫 渊图 猿冤遥 随机
挑取 员员 个单菌落扩增培养袁提取质粒后袁用 杂枣蚤 陨 酶切
后电泳渊图 源冤显示袁有 苑 个插入片段高于 员园园园 遭责袁比
例为 远猿郾 远豫 袁平均长度约 员猿园园 遭责遥 重组率及插入片
段大小说明该文库达到文库质量要求袁基本包含花生
全长功能基因遥
圆郾 源摇 文库随机测序和生物信息学分析
圆郾 源郾 员摇 序列 遭造葬泽贼结果及分析摇 从文库中随机挑选 猿园
个单克隆进行双向测序袁利用 阅晕粤序列常规分析软件
月蚤燥载酝 圆郾 远 进行拼接袁共有 圆猿 个基因测序成功袁且均
具有开放阅读框结构遥 去掉引物及载体序列后将测序
结果进行 月造葬泽贼分析遥
月造葬泽贼灶分析结果显示袁圆猿 个测通基因中有 员员 个基
因获得全长袁全长率为 源苑郾 愿豫 遥 其中有 猿 个基因与花
生基因具有较高同源性袁员缘 个与大豆基因具有较高同
源性袁各有 员 个与蒺藜苜蓿基因尧水梨基因尧蓖麻基因尧
毛果杨基因尧珊瑚藻基因具有较高同源性遥 仅有 缘 个
基因功能已知院圆 个与核糖体 员袁缘鄄二磷酸羧化酶基因
具有较高同源性袁员 个为花生成熟酶亚单位相似基因袁
员个为微卫星序列基因袁员 个为 圆猿杂核糖体 砸晕粤基因遥
结果表明花生大部分基因的功能尚未揭示袁有待进一
步研究遥
月造葬泽贼曾分析结果显示袁所有克隆编码序列都与已
知的植物氨基酸序列相似袁其中 猿 个与花生尧员员 个与
大豆氨基酸序列相似遥 但其中大部分只是与功能未知
蛋白或假定蛋白序列同源性很高袁已知功能的氨基酸
序列包括二磷酸核酮糖羧化酶尧乙二醛酶 陨陨尧核糖体蛋
白尧氧化还原酶尧粤栽孕 合成酶尧预测的抗病相关氨基酸
序列等遥 有 源 个克隆与其他植物已知功能氨基酸序列
具有较高相似性渊大于 愿园豫 冤袁结果见表 圆遥
圆郾 源郾 圆摇 序列 月蕴粤杂栽圆郧韵功能注释结果摇 将测序结果
通过 月蕴粤杂栽圆郧韵进行注释和统计分析遥 结果显示袁本
文库含有信息量较丰富袁基本包含了花生各种信息袁如
参与各种生物过程尧各种分子功能的基因等遥
圆猿个序列涉及的分子功能中钙离子结合尧粤栽孕 结
合尧铁离子结合尧核桐糖二磷酸化尧单氧化酶活性等功
能基因较多袁此外还含有镁离子结合尧锌离子结合尧催
化活性尧水解酶活性尧电子载体活性尧蛋白激酶活性尧结
构组成等 圆愿 种功能的基因渊图 缘冤遥
参与氧化还原尧糖代谢尧光呼吸等生物过程基因较
丰富袁此外还含有参与生物运输尧蛋白代谢尧生物合成尧
苑源缘
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
蛋白修饰尧电子转移尧生物过程调控尧细胞组织和生物
发生尧蛋白合成尧转录尧胁迫反应尧阅晕粤 代谢尧器官组织
与发生等生物过程的基因渊图 远冤遥
图 猿摇 花生受环境胁迫诱导的混合全长 糟阅晕粤文库菌液 孕悦砸电泳图
云蚤早援 猿摇 郧藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 糟燥造燥灶蚤藻泽 遭赠 孕悦砸 皂藻贼澡燥凿 枣则燥皂 枣怎造造鄄造藻灶早贼澡 糟阅晕粤 蕴蚤遭则葬则赠
燥枣 责藻葬灶怎贼 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽贼则藻泽泽藻泽
酝员院阅晕粤 皂葬则噪藻则 圆 园园园曰酝圆 院阅晕粤 皂葬则噪藻则 员 缘园园园曰员 耀 源猿院糟阅晕粤插入片段
酝员院阅晕粤 皂葬则噪藻则 圆 园园园袁 酝圆院 阅晕粤 皂葬则噪藻则 员 缘园园园袁 员 原 源猿院 蚤灶泽藻则贼藻凿 糟阅晕粤 枣则葬早皂藻灶贼
图 源摇 花生受环境胁迫诱导的混合全长 糟阅晕粤文库单菌落质粒电泳图
云蚤早援 源摇 郧藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 凿蚤早藻泽贼藻凿 责造葬泽皂蚤凿泽 枣则燥皂 枣怎造造鄄造藻灶早贼澡 糟阅晕粤 蕴蚤遭则葬则赠 燥枣
责藻葬灶怎贼 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽贼则藻泽泽藻泽
酝院阅晕粤 皂葬则噪藻则 圆 园园园曰员 耀 员员院单克隆质粒
酝院 阅晕粤 皂葬则噪藻则 圆 园园园袁 员 耀 员员院 责则燥凿怎糟贼 燥枣 藻葬糟澡 凿蚤早藻泽贼藻凿 责造葬泽皂蚤凿
愿源缘
摇 缘 期 环境胁迫诱导的花生全长 糟阅晕粤文库的构建及序列分析
表 圆摇 花生受环境胁迫诱导的混合全长 糟阅晕粤文库中与其他植物已知功能蛋
白氨基酸序列具有较高相似性渊大于 愿园豫冤的克隆
栽贼葬遭造藻 圆摇 悦造燥灶藻泽 憎蚤贼澡 澡蚤早澡 泽蚤皂蚤造葬则蚤贼赠渊皂燥则藻 贼澡葬灶 愿园豫冤 贼燥 噪灶燥憎灶 责则燥贼藻蚤灶 泽藻择怎藻灶糟藻泽 燥枣 燥贼澡藻则 责造葬灶贼泽 蚤灶
枣怎造造鄄造藻灶早贼澡 造蚤遭则葬则赠 燥枣 责藻葬灶怎贼 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽贼则藻泽泽藻泽
克隆号
悦造燥灶藻 晕燥援
注册号
粤糟糟藻泽泽蚤燥灶 晕燥援
基因名称
晕葬皂藻
相似度
陨凿藻灶贼蚤贼赠
最佳匹配
月藻泽贼 皂葬贼糟澡
耘值
耘鄄增葬造怎藻
孕栽源 早遭 渣 粤粤蕴圆怨远怨园郾 员 渣 责蚤则燥枣蚤造蚤灶 缘苑 辕 远远 渊愿远豫 冤 杂燥造葬灶怎皂 造赠糟燥责藻则泽蚤糟怎皂 猿藻 原 缘源
孕栽员愿 早遭 渣 粤阅阅远园圆源圆郾 员 渣 葬造责澡葬鄄枣燥则皂 则怎遭泽糟燥 葬糟贼蚤增葬泽藻 圆员圆 辕 圆源园 渊愿愿豫 冤 郧造赠糟蚤灶藻 皂葬曾 园郾 园
孕栽圆员 泽责 渣 匝源圆愿圆猿郾 员 渣 砸月杂赃郧蕴再栽粤 砸藻糟晕葬皂藻 怨源 辕 员员源 渊愿圆豫 冤 郧造赠糟蚤灶藻 贼葬遭葬糟蚤灶葬 圆藻 原 缘猿
孕栽圆圆 凿遭躁 渣 月粤郧园远远苑愿郾 员 渣 责则燥贼藻蚤灶 噪蚤灶葬泽藻 愿源 辕 怨苑 渊愿远豫 冤 孕澡葬泽藻燥造怎泽 增怎造早葬则蚤泽 猿藻 原 猿愿
图 缘摇 序列 郧韵注释要分子功能注释结果
云蚤早援 缘摇 郧韵 葬灶灶燥贼葬贼蚤燥灶要皂燥造藻糟怎造葬则 枣怎灶糟贼蚤燥灶
猿摇 讨论
猿郾 员摇 逆境胁迫对植物的影响
干旱尧低温等恶劣环境会降低细胞含水量尧破坏细
胞膜尧抑制光合作用尧使植物物质代谢紊乱袁植物生长
发育迟缓甚至死亡咱怨暂 遥 逆境条件下袁植物作出多种抗
逆性反应咱员园暂 袁产生新蛋白质从而引起大量生理和代谢
上的变化咱员员暂 遥 研究发现晚期胚胎发生富集蛋白渊蕴耘粤
蛋白冤 咱员圆鄄员猿暂 尧水分通道蛋白渊粤择怎葬责燥则蚤灶冤 咱员源暂 尧砸怎遭蚤泽糟燥 活
化酶咱员缘暂等蛋白基因表达量的增加可显著提高植物的
抗脱水能力遥 目前已发现多种基因参与植物抗低温反
应咱员远暂 袁编码转录因子 悦月云尧阅砸耘月员咱员苑暂的基因超量表达
图 远摇 序列 郧韵注释要生物过程注释结果
云蚤早援 远 郧韵 葬灶灶燥贼葬贼蚤燥灶要遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 责则燥糟藻泽泽
可提高植物抗低温能力袁许多下游蛋白袁如水孔蛋白
渊粤匝孕泽冤 咱员愿暂 袁在植物抗低温功能中同样发挥重要作用遥
钙是植物生长发育不可缺少的营养元素之一袁缺
钙引起的花生胚败育直接影响花生产量和品质形成遥
汪仁等咱员怨暂证实在可溶性钙为 怨园滋早窑早 原员的土壤中施加
钙 圆园园皂早窑噪早 原员土和 愿园园皂早窑噪早 原员土时袁花生分别增产
源缘豫和 缘圆豫 遥
粤月粤尧水杨酸尧乙烯利尧多效唑等植物激素是植物
胁迫相关信号传导途径中的重要组成部分咱圆园暂 遥 粤月粤
参与调控植物对逆境胁迫袁如干旱尧高盐尧低温等产生
的应答咱圆员暂 袁苍晶等咱圆圆暂研究表明袁随着温度的降低袁小
麦叶片和根部的 粤月粤 含量逐渐增加遥 乙烯利是广泛
应用的植物生长调节剂袁对作物有促进果实成熟尧改变
怨源缘
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
雌尧雄花比例尧促进种子发芽尧提高产量等作用咱圆猿暂 遥 水
杨酸渊泽葬造蚤糟赠造蚤糟 葬糟蚤凿袁杂粤冤是植物体内普遍存在的一种简
单的小分子酚类化合物袁杂粤在植物体内的生理作用广
泛袁调控植物生长尧发育尧成熟尧衰老等生理过程袁诱导
抗盐尧抗旱尧抗低温尧抗紫外线尧抗重金属等抗逆反应过
程袁水杨酸还可诱导植物产生系统获得性抗性
渊杂粤砸冤咱圆源暂 遥 多效唑是一种高效低毒的植物生长延缓
剂袁能延缓植物地上部伸长尧促进根生长尧提高抗逆
性咱圆缘暂 曰可促进花生的下针结荚袁提高产量遥
花生在收获前后尧贮运和加工过程中都易感染黄
曲霉袁受黄曲霉毒素污染的花生对人畜具有强致癌作
用遥 初步研究发现袁几丁质酶和 茁 原 员袁猿 原葡聚糖酶对
黄曲霉侵染具有明显的抵御作用和协同抑制作用咱圆远暂 遥
梁炫强等咱圆苑暂研究发现花生抗病品种受侵染后能迅速
产生足量的酚类化合物尧木质素尧类黄酮和植保素等抗
菌物质袁抵御黄曲霉菌的侵入和产生过敏性反应杀死
黄曲霉菌袁感病品种则反之遥
目前关于花生的各种文库构建已多有报道袁但多
为单个器官或者单一逆境胁迫的文库袁含不同逆境胁
迫处理的花生文库尚未见报道遥 本试验通过对闽花 远
号花生施以不同的逆境胁迫处理并构建全长 糟阅晕粤文
库袁为花生逆境胁迫相关基因研究奠定了基础遥
猿郾 圆摇 本文库构建的意义
本研究在花生受到多种生物及非生物胁迫袁包括
干旱尧低温尧缺钙尧激素渊粤月粤尧杂粤尧乙烯利尧多效冤处理
以及黄曲霉侵染等条件下袁构建了库容达 愿郾 愿远 伊 员园远
糟枣怎的高质量花生全长 糟阅晕粤 文库遥 经随机挑选测序
和生物信息学分析表明袁文库包含有氧化还原尧糖代
谢尧光呼吸等功能基因袁参与生物运输尧物质代谢和生
物发生尧蛋白合成尧转录尧胁迫反应尧阅晕粤 代谢尧器官组
织与发生等生物过程的基因袁但大多数为未知基因遥
这为克隆抗旱尧寒相关基因和受旱寒胁迫的功能基因
以及分离克隆受钙尧各种激素以及黄曲霉诱导的功能
基因提供了有用的材料袁也为揭示调控花生产量尧品质
形成的分子机制以及遗传改良花生品种奠定了基础遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 刘 武袁戴良英援 植物抗逆相关 耘砸云转录因子研究综述咱允暂 援中国
农学通报袁 圆园园苑袁圆猿渊源冤院苑愿 原 愿员
咱 圆 暂 摇 杂藻噪蚤 酝袁 晕葬则怎泽葬噪葬 酝袁 粤遭藻 匀袁 运葬泽怎早葬 酝袁 杂澡蚤灶灶燥扎葬噪蚤 杂 运袁 悦葬则灶蚤灶糟蚤
孕袁 匀葬赠葬泽澡蚤扎葬噪蚤 再袁 杂澡蚤灶灶燥扎葬噪蚤 运援 酝燥灶蚤贼燥则蚤灶早 贼澡藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 责葬贼贼藻则灶
燥枣 员猿园园 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 早藻灶藻泽 怎灶凿藻则 凿则燥怎早澡贼 葬灶凿 糟燥造凿 泽贼则藻泽泽藻泽 遭赠 怎泽蚤灶早 葬
枣怎造造鄄造藻灶早贼澡 糟阅晕粤 皂蚤糟则燥葬则则葬赠咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造袁 圆园园员袁员猿院远员 原 苑圆
咱 猿 暂 摇 杂藻噪蚤 酝袁 晕葬则怎泽葬噪葬 酝袁 陨泽澡蚤凿葬 允袁 晕葬灶躁燥 栽袁 云怎躁蚤贼葬 酝袁 韵燥灶燥 再袁
运葬皂蚤赠葬 粤袁 晕葬噪葬躁蚤皂葬 酝袁 耘灶躁怎 粤袁 杂葬噪怎则葬蚤 栽袁 杂葬贼燥怎 酝袁 粤噪蚤赠葬皂葬 运袁
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