全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员源袁圆愿渊圆冤院园圆圆源 耀 园圆猿猿
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员猿鄄园源鄄员园摇 接受日期院圆园员猿鄄园缘鄄圆愿
基金项目院国家野愿远猿冶计划渊圆园员圆粤粤员园员圆园圆冤袁农业部农业公益性行业科研专项渊圆园员员园猿园园苑冤袁国家自然基金项目渊猿员员园园远员园冤袁国际原子能机构项
目渊砸粤杂缘园缘远冤
作者简介院闫智慧袁女袁主要从事小麦诱发突变与生物技术育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 赠葬灶扎澡蚤澡怎蚤圆园园怨岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院刘录祥袁男袁研究员袁主要从事作物诱发突变与生物技术育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 造怎曾蚤葬灶早岳 圆远猿援 灶藻贼援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员源冤园圆鄄园圆圆源鄄员园
栽陨蕴蕴陨晕郧技术的发展及其在不同植物中的应用
闫智慧员 摇 郭会君员 摇 徐荣旗圆 摇 刘录祥员
渊员 中国农业科学院作物科学研究所 辕农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程 辕国家农作物航天诱
变技术改良中心袁北京摇 员园园园愿员曰圆中国农业科学院生物技术研究所袁北京摇 员园园园愿员冤
摘摇 要院栽陨蕴蕴陨晕郧技术渊栽葬则早藻贼蚤灶早 陨灶凿怎糟藻凿 蕴燥糟葬造 蕴藻泽蚤燥灶泽 陨晕 郧藻灶燥皂藻泽冤经过十多年的快速发展袁已经应用到
多种植物点突变高通量筛选与基因功能研究中袁检测方法也逐渐趋于多样化袁直接测序尧毛细管电泳尧高
分辨熔解曲线等检测方法均得到了较多的应用遥 与此同时 耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧尧阅藻栽陨蕴蕴陨晕郧及 蚤栽陨蕴蕴陨晕郧等相关
技术的发展扩大了 栽陨蕴蕴陨晕郧技术的应用范围遥 本文着重介绍了目前 栽陨蕴蕴陨晕郧 分析中用到的不同检测
方法及相关生物信息学工具袁详细评述了 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术在模式植物尧主要粮食作物尧油料作物尧蔬菜等
其它作物中的应用与研究进展遥
关键词院植物曰栽陨蕴蕴陨晕郧曰化学诱变曰点突变
阅韵陨院员园援 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员源郾 园圆援 园圆圆源
摇 摇 反向遗传学是以已知基因信息为基础袁通过对目
的基因进行加工和修饰袁构建含生物体必需元件的修
饰基因组袁重新装配出一个新的具有生活力的个体袁来
研究基因组或蛋白质的结构和生物学功能袁以及生物
体表型变化尧性状改变等的方法咱员暂 遥 目前已经得到广
泛应用的 栽鄄阅晕粤尧砸晕粤 干扰尧转座子标签技术等都是
基于反向遗传学原理袁但是这些方法都有其局限性遥
栽鄄阅晕粤的插入位点一般为 员 原 圆 个拷贝袁复杂基因组
中功能基因都是多拷贝的袁因此在构建突变体库和表
型筛选上工作量很大咱员暂 遥 砸晕粤蚤 技术需要构建植物表
达载体袁并在转基因植株中研究目的基因的功能遥 载
体的选择尧遗传转化及基因沉默等都会限制这一技术
在不同物种中的应用咱圆暂 遥 反转座子技术曾是构建突
变体库的一个重要方法袁但是对插入热点的要求降低
了其应用价值咱员袁猿暂 遥
栽陨蕴蕴陨晕郧技术是近十几年发展起来的一项反向遗
传学技术袁它以化学诱变材料为基础袁并将化学诱变技
术与 孕悦砸筛选技术尧高通量检测方法联系在一起袁形
成了高通量快速检测目的基因区域点突变的技术体
系咱源暂 遥 它可以有效的排除假阳性袁检测突变位点的准
确性较高袁应用面广袁不受物种限制遥 目前 栽陨蕴蕴陨晕郧
技术已在多种植物中得到了应用袁促进了诱变育种的
发展咱缘暂 遥 本文介绍了 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术的发展袁详细评述
了 栽陨蕴蕴陨晕郧技术在模式植物尧主要粮食作物尧油料作
物等中的应用与研究进展遥
员摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术
栽陨蕴蕴陨晕郧目标突变体的获得与诱变群体构建尧点
突变的检测密切相关袁所以诱变剂的选择及其剂量尧目
的基因选取及突变位点筛选都是 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术中的
关键环节遥
员郾 员 诱变群体的构建
栽陨蕴蕴陨晕郧群体的构建主要包括诱变方法的选择尧
种子处理尧酝圆 叶片 阅晕粤 的提取及 阅晕粤 池的建立等 源
个方面遥
突变群体可以通过任何能产生单碱基突变或小的
插入 辕缺失的诱变剂对野生型材料进行处理而获
得咱远暂 遥 耘酝杂渊耘贼澡赠造 酝藻贼澡葬灶藻 杂怎造枣燥灶葬贼藻冤和 酝晕哉渊酝藻贼澡赠造
晕蚤贼则燥泽燥怎则藻葬冤是目前较常用的化学诱变剂袁诱导点突变
源圆圆
摇 圆 期 栽陨蕴蕴陨晕郧技术的发展及其在不同植物中的应用
的频率较高袁如 耘酝杂 和 酝晕哉 诱导水稻产生的点突变
频率在 员 辕 圆怨园噪遭 到 员 辕 员猿缘噪遭 之间咱源园暂 遥 不同物种或基
因型对诱变剂的敏感性不同袁同时诱变剂的浓度和处
理时间尧处理过程中外界温度和湿度等都会影响其诱
变效果袁因此大批量诱导前的预处理实验是必需的袁用
以确定适宜的诱变剂量及外界环境条件遥 电离辐射也
可应用于 栽陨蕴蕴陨晕郧群体的构建中袁酌 射线辐射处理水
稻可获得目标基因的点突变袁但点突变产生的频率较
低咱愿暂 遥
为了提高 栽陨蕴蕴陨晕郧技术的检测效率袁减少相同点
突变出现的频率袁酝员 植株需严格套袋自交袁并单株收
获袁每株取单粒种植构建 酝圆 群体遥 以 酝圆 植株叶片为
材料提取 阅晕粤袁构建 阅晕粤 池遥 阅晕粤 池中各样品以相
同浓度等量混合遥 水稻等二倍体植物和大豆等四倍体
植物的 阅晕粤池大多为 愿 倍池咱怨暂 袁随着植物材料倍性和
基因组复杂程度的增加袁阅晕粤 池的重叠倍数可适当降
低袁如六倍体小麦一般采用 圆 倍池咱员园暂 遥 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术
对 阅晕粤质量要求比较高袁首先要保证 阅晕粤的纯度袁以
减少蛋白等杂质对后续实验结果的影响曰其次是保证
所提取 阅晕粤 的完整性袁避免产生降解曰第三袁阅晕粤 池
中各样品浓度要保持一致袁以提高点突变检测的准确
性遥
员郾 圆摇 检测方法
植物基因突变包括目的基因部分缺失尧全部缺失
及单碱基缺失或插入等 猿 种类型袁栽陨蕴蕴陨晕郧 技术重点
检测单碱基缺失或插入等点突变遥 目前可用于点突变
检测的 栽陨蕴蕴陨晕郧 方法有直接测序法尧毛细管电泳法
渊悦耘冤尧高效液相色谱分析法渊匀孕蕴悦冤尧高分辨熔解曲线
法渊匀砸酝冤尧基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法
渊酝粤蕴阅陨鄄栽韵云冤等遥 可以分为以下 猿 种类型院
员郾 圆郾 员摇 基于测序技术的点突变检测方法摇 直接测序
法是最简单的 栽陨蕴蕴陨晕郧检测方法袁但也是花费最高的
方法遥 阅晕粤测序是筛选突变体的最高标准袁它可以很
容易得到群体中所有突变位点袁但需要花费大量的时
间和资金咱员员暂 遥 陨造造怎皂蚤灶葬测序是目前应用比较广泛的一
种测序方法袁它采用了微阵列分析技术咱员圆暂 袁可以一次
对大批 阅晕粤样品进行测序袁目前已经应用于小麦和水
稻的 栽陨蕴蕴陨晕郧 检测中袁基于 陨造造怎皂蚤灶葬 测序的 栽陨蕴蕴陨晕郧
技术是利用 悦粤酝月葬 系统检测点突变袁对群体中的突
变位点更加敏感袁检测效率要高于传统 栽陨蕴蕴陨晕郧 技
术咱员猿暂 遥 随着测序技术的快速发展和检测成本的不断
降低袁未来基于测序技术的点突变检测将会得到更广
泛的应用遥
员郾 圆郾 圆摇 基于酶切反应的点突变检测方法摇 这种方法
是基于核酸内切酶对特异性单碱基错配的识别和切割
而建立的遥 常用的酶有 耘晕阅韵员咱员源暂 尧杂怎则增藻赠燥则咱员缘暂及 悦耘蕴
玉遥 以 悦耘蕴玉为例袁当突变体 阅晕粤 存在点突变时袁就
会与野生型 阅晕粤形成一个包含错配位点的杂合 阅晕粤
双链分子袁经 悦耘蕴玉酶切割后产生 圆 个较短的片断袁在
聚丙烯酰胺凝胶电泳图中可以找到这 圆 个对应片断袁
其长度之和等于目的基因片断长度遥
以 蕴蚤鄄悦燥则源猿园园 阅晕粤 遗传分析系统进行检测分析
时袁孕悦砸 扩增所用两端引物分别以 苑园园 灶皂 和 愿园园 灶皂
的荧光染料进行标记袁电泳过程中通过识别荧光信号
而检测突变序列遥 一次电泳可以检测 怨远 个样品袁每个
样品最多可以包含 员远 个株系袁因此该方法一次最多可
以检测 苑远愿 个二倍体材料遥 但这一方法的缺点是院实
验过程中荧光引物与普通引物混合比例尧阅晕粤 浓度以
及内切酶与 孕悦砸 产物浓度之间的比例都会影响电泳
结果袁且要求目的基因片断长度在 员郾 缘噪遭以下咱员员暂 遥
利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳或琼脂糖凝胶电
泳也可以检测点突变袁 这种方法以结合 砸粤孕阅
渊砸葬灶凿燥皂 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 孕燥造赠皂燥则责澡蚤糟 阅晕粤 冤 及 陨杂允
渊陨灶贼则燥灶 杂责造蚤糟藻 允怎灶糟贼蚤燥灶冤非荧光标记引物的 孕悦砸 为基
础遥 悦澡藻灶咱猿怨暂等利用此方法对晋麦 源苑 酝圆 突变群体进
行 栽陨蕴蕴陨晕郧分析袁同时以传统 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术作为对照
实验袁对 孕责凿鄄阅员袁 砸怎遭蚤泽糟燥 葬糟贼蚤增葬泽藻 粤 和 砸怎遭蚤泽糟燥 葬糟贼蚤增葬泽藻
月三个目的基因进行点突变检测袁群体大小分别为
猿园园 和 缘员圆 株袁得到平均突变频率分别为 员 辕 源苑噪遭 和 员 辕
猿源噪遭遥
毛细管电泳法渊悦耘冤中 阅晕粤片断的检测是通过溴
化乙锭渊耘月冤的插入来实现的遥 酶切反应完成后袁长度
在 员缘遭责至 圆园园园遭责的 阅晕粤片断都可在 员园 皂蚤灶 内完成
检测袁最后所得数据被绘制成色谱图袁由 藻郧藻灶藻爷 泽
月蚤燥悦葬造糟怎造葬贼燥则软件进行分析遥 毛细管电泳法不再要求
对引物进行荧光标记袁同时检测效率也较高袁但该方法
中的 耘月对人体和环境都有一定危害咱员缘暂 遥
员郾 圆郾 猿摇 基于熔点曲线的点突变检测方法摇 阅晕粤 双链
中由于配对碱基所含氢键不同而具有不同的熔点袁而
化学诱变可以诱导产生大量的碱基颠换袁从而改变
阅晕粤的熔点袁高效液相色谱分析方法渊匀孕蕴悦冤和高分
辨熔解曲线法渊匀砸酝冤就是基于这一原理开发的检测
方法遥
高效液相色谱分析方法渊匀孕蕴悦冤应用在早期的
栽陨蕴蕴陨晕郧技术中袁圆园园源 年 悦葬造凿憎藻造造 等咱员远暂对大麦群体的
栽陨蕴蕴陨晕郧分析就是采用 凿匀孕蕴悦 方法遥 但是这种方法
的通量过低袁限制了 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术高通量筛选的潜
力遥
缘圆圆
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
高分辨熔解曲线法渊匀砸酝冤中使用的嵌入染料只
有在与 阅晕粤 结合后才会产生荧光信号遥 当温度逐渐
上升时袁阅晕粤链的解螺旋反应会释放荧光染料袁从而
使整体的荧光信号产生变化袁变化趋势通过温度 原荧
光信号图表现出来遥 当有点突变发生时袁碱基错配致
使 阅晕粤熔解温度发生改变袁因而在温度 原荧光信号图
中会出现一个转折点咱员苑暂 袁此转折点即为突变位点遥
匀砸酝对点突变的检测敏感性较高袁尤其对小片段目标
基因的检测效果较好袁在小麦咱员愿暂 尧蕃茄咱员怨暂 尧拟南芥咱圆园暂
等植物中都有应用袁同时 匀砸酝 法也是 蚤栽陨蕴蕴陨晕郧咱猿圆暂技
术中的主要检测方法遥 阅燥灶早 等咱员愿暂利用 匀砸酝 检测法
在 猿 个 杂杂域同源基因的羧基末端筛选到 员苑 个点突
变袁包括 缘 个纯合突变和 员圆 个杂合突变遥 但是这种方
法受到了扩增片断中 郧悦 含量及片断长度的限制袁典
型的检测区域只有 员缘园 原 缘园园遭责袁比基于酶切和测序方
法检测的片断要短的多咱员员暂 遥
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法渊酝粤蕴阅陨鄄
栽韵云 酝杂冤曾应用于燕麦群体的 栽陨蕴蕴陨晕郧 分析遥 在
酝粤蕴阅陨鄄栽韵云 酝杂方法中袁样品被电离袁然后重新定位于
质谱仪袁在质谱仪中根据自身的质荷比进行分离袁然后
利用专门的软件来分析被发现的离子遥 但这种方法自
动化程度低尧通量低且花费高咱圆员暂 遥
员郾 猿摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术中的一些生物信息学工具
栽陨蕴蕴陨晕郧技术从目的基因选择袁到点突变筛选及
氨基酸序列变化分析袁都会用到一些生物信息学工具遥
郧藻灶月葬灶噪 渊 澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援 灶糟遭蚤援 灶造皂援 灶蚤澡援 早燥增 辕
早藻灶遭葬灶噪 辕 冤收集了各类物种的大量基因序列信息袁研究
者可从中查找所研究物种目标性状的相关基因袁若没
有该物种的对应序列袁则可以通过同源序列比对袁利用
近缘种目标性状的保守序列设计特异性引物从而扩
增尧检测所研究物种的目标基因遥 对禾谷类作物小麦
基因突变的分析多是以水稻中相应性状的保守序列作
为起始扩增序列的遥
栽陨蕴蕴陨晕郧 分析中对引物的特异性要求较高袁孕悦砸
扩增后能够得到且只能得到单一目的条带袁引物设计
软件有 孕则蚤皂藻则猿尧孕则蚤皂藻则缘 及 灾藻糟贼燥则 晕栽陨 等遥 除此之外袁
突变位点及突变频率的预测也是引物设计过程中需要
考虑的重要因素遥 悦韵阅阅蕴耘 软件渊悦燥凿燥灶泽 韵责贼蚤皂蚤扎藻凿 贼燥
阅蚤泽糟燥增藻则 阅藻造藻贼藻则蚤燥怎泽 蕴藻泽蚤燥灶泽曰 澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援 责则燥憎藻遭援 燥则早 辕
糟燥凿凿造藻 辕 冤可以有效预测化学诱变目的基因中点突变产
生频率较高的区域袁以及预测基因编码区内影响基因
功能的点突变区域遥
孕粤砸杂耘杂晕孕咱圆圆暂 渊 孕则燥躁藻糟贼 粤造蚤早灶藻凿 砸藻造葬贼藻凿 杂藻择怎藻灶糟藻泽
葬灶凿 耘增葬造怎葬贼藻 杂晕孕泽曰澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援 责则燥憎藻遭援 燥则早 辕 责葬则泽藻泽灶责 辕 冤
可用来分析突变导致核酸多态性及 杂晕孕泽 对蛋白质功
能的影响渊图 员冤遥 突变序列经 孕粤砸杂耘晕杂晕孕 软件处理
后袁得到碱基突变类型及位置袁分析可能造成的氨基酸
序列变化和对蛋白质功能的影响及由突变诱导产生的
限制性内切酶位点变化袁该软件是对突变基因功能进
行分析预测的重要工具遥
注院孕粤砸杂耘杂晕孕结果中包含了核酸碱基变化渊第 圆 列冤尧相应氨基
酸的变化渊第 猿 列冤及 孕杂杂酝值和相应基因型渊杂合或纯合冤遥
晕燥贼藻院砸藻泽怎造贼泽 枣则燥皂 孕粤砸杂耘晕杂晕孕 泽澡燥憎藻凿 贼澡藻 糟澡葬灶早藻泽 燥枣 遭葬泽藻泽 渊 贼澡藻
泽藻糟燥灶凿 造蚤灶藻冤 葬灶凿 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 渊贼澡藻 贼澡蚤则凿 造蚤灶藻冤袁 孕杂杂酝 增葬造怎藻 葬灶凿 摇 摇
早藻灶燥贼赠责藻 贼赠责藻援
图 员摇 孕粤砸杂耘杂晕孕分析结果示例咱圆圆暂
云蚤早援 员摇 耘曾葬皂责造藻 燥枣 孕粤砸杂耘杂晕孕 葬灶葬造赠泽蚤泽咱圆圆暂
孕杂杂酝和 杂陨云栽通过相关蛋白序列的比对来分析基
因突变对蛋白质功能的影响遥 在 孕杂杂酝中袁当 孕杂杂酝值
大于 员园 时袁表示 阅晕粤 序列中的碱基突变会影响相应
蛋白质的功能曰而 杂陨云栽可以预测点突变对蛋白质功能
的改变程度袁当 杂陨云栽 值低于 园郾 园缘 时得到的效应与
孕杂杂酝值大于 员园 的效应相同遥 例如院杂造葬凿藻 等咱圆猿暂在四
倍体硬质小麦突变群体中袁利用 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术对
杂月耘陨陨葬粤和 杂月耘陨陨葬月 两个基因进行点突变检测袁对引
起氨基酸序列变化的 圆远 个突变个体进行的 孕杂杂酝 和
杂陨云栽分析显示袁有 员源 个点突变的 孕杂杂酝 值大于 员园袁有
员缘 个点突变的 杂陨云栽值小于 园郾 园缘袁孕杂杂酝 跃员园 和 杂陨云栽 约
园郾 园缘 这两个结果出现在相同点突变上袁这更加确定检
测到的点突变会对相应蛋白质功能产生影响遥
圆摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术的发展
耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧是在自然群体中检测点突变的方法遥
该方法由 悦燥皂葬蚤 等咱圆远暂提出袁最初应用在拟南芥中袁利
远圆圆
摇 圆 期 栽陨蕴蕴陨晕郧技术的发展及其在不同植物中的应用
用 员缘园 个株系对 缘 个目标基因进行研究袁共发现 缘缘 个
单倍型或等位变异遥 耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧 的应用不受物种限
制袁包括杂合体和多倍体在内的物种均有成功应用的
范例遥 目前利用 耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧 技术在多个自然群体中
研究了不同的目的基因袁如院脂肪酸延长酶 员云粤耘员咱圆苑暂 尧
翻译起始因子 藻陨云源耘咱缘愿暂 尧悦燥粤 连接酶 猿 孕燥责贼则源悦蕴猿咱圆愿暂
等遥 郧蚤造糟澡则蚤泽贼 等咱圆愿暂 对 毛 果 杨 的 怨 个 基 因 进 行
耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧检测袁平均每个基因得到 远郾 苑愿 个单碱基
等位变异遥
耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧 结合关联分析可促进复杂性状基因
的分离袁使 栽陨蕴蕴陨晕郧技术在大规模功能基因组学研究
中发挥更大的作用遥 再怎 等咱圆怨暂在 怨缘 个地方水稻品种
中袁利用 耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧 分析与耐旱调节机制相关的 圆源
个转录因子家族的启动子袁平均在一个基因中检测到
猿郾 猿猿 个等位变异曰结合关联分析得到了相关基因在 怨缘
个品种的遗传结构袁结果表明有 猿 个基因与 阅栽
渊阅则燥怎早澡贼 栽燥造藻则葬灶糟藻冤指数关联袁缘 个基因与 阅栽 水平关
联遥
由 砸燥早藻则泽 等咱猿园暂 提出的 阅藻鄄栽陨蕴蕴陨晕郧 渊 阅藻造藻贼蚤燥灶
栽陨蕴蕴陨晕郧冤 技术可用于靶基因敲除的研究中遥 阅藻鄄
栽陨蕴蕴陨晕郧 技术是以抑制野生型序列的扩增为基础袁识
别较大植物群体中特异等位基因缺失为目的遥 对缺失
突变的识别率可达 愿源豫 遥 在作物中袁通过缺失不必要
基因可以改良栽培品种遥 云蚤贼扎早藻则葬造凿 等咱猿员暂在苜蓿中利
用快中子构建了一个约有 员缘远园园园 株的大群体用于
阅藻鄄栽陨蕴蕴陨晕郧研究袁利用其 酝圆 构建了 员猿 个超级 阅晕粤
池袁每个池中有 员圆园园园 个 酝圆 单株 阅晕粤遥 共研究了 员源
个基因袁每个基因选取 缘 个目的片断袁总突变频率为
圆怨豫 遥
蚤栽陨蕴蕴陨晕郧渊蚤灶凿蚤增蚤凿怎葬造蚤扎藻凿 栽陨蕴蕴陨晕郧冤技术改进和简
化了诱变群体种植和取样方式袁引进 陨糟藻鄄悦葬责 方
法咱猿圆 原 猿猿暂以根而非叶的 阅晕粤为扩增模板遥 该方法不需
要对 酝员 进行单株收获袁而是大批量混收袁之后将 酝圆
种子种植于装有琼脂塞的 怨远 孔板中袁在 怨远 孔板下面
组合一个装有水的离心管袁当根系长到水相离心管底
之后袁将下部离心管凝结袁使其中的植株根系与上部植
株分离袁然后提取 阅晕粤遥 蚤栽陨蕴蕴陨晕郧 是一种更加简单尧
高通量的点突变检测技术遥 月怎泽澡 等咱圆园暂以此方法在拟
南芥含 愿园园园 单株的 酝圆 突变群体中检测 酝耘运运员 基
因袁获得 员圆 个突变位点袁突变频率为 员 辕 源员缘噪遭遥
猿摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术在不同植物中的应用
猿郾 员摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术在模式植物拟南芥中的应用
酝葬则贼侏灶等咱猿源暂构建了一个拥有 猿苑员圆 个单株的 耘酝杂
诱变群体渊栽陨蕴蕴耘砸冤袁对 员源 个目的基因进行检测袁每个
基因识别出 圆员 原 源远 个突变位点袁共得到 源缘园 个点突
变袁平均突变频率为 员 辕 愿怨噪遭遥 与其他生物的 栽陨蕴蕴陨晕郧
群体相比袁他们的 栽陨蕴蕴耘砸 群体是目前二倍体物种中
突变频率最高的一个遥
异源多倍染色体往往会比二倍体产生的突变频率
更高袁栽泽葬蚤贼 等咱猿缘暂为证明染色体倍数对突变频率的影
响袁对二倍体拟南芥 悦燥造 原 园 进行染色体加倍袁构建四
倍体拟南芥诱变群体遥 在 缘圆愿 个 酝圆 四倍体株系中袁
每 员郾 缘噪遭目标片断中可检测到 圆愿 个点突变袁包括 猿 个
错义突变和 员郾 猿 个缺失突变袁突变频率是二倍体的 源
倍遥
猿郾 圆摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术在主要粮食作物中的应用
猿郾 圆郾 员摇 小麦摇 杂造葬凿藻 等咱员园暂在 圆园园缘 年首次将 栽陨蕴蕴陨晕郧
技术应用于小麦袁分别用浓度为 园郾 苑缘豫 和 员郾 园豫 的
耘酝杂溶液处理六倍体普通小麦 耘曾责则藻泽泽 和四倍体硬质
小麦 运则燥灶燥泽袁处理时间为 员愿 澡袁得到的 栽陨蕴蕴陨晕郧群体量
分别为 苑远愿 和 猿愿源 个单株袁在这两个群体中对 宰曾鄄粤员尧
宰曾鄄月员尧宰曾鄄阅员 猿 个目的基因的所有功能区域进行点突
变检测袁共得到 圆源远 个等位变异位点袁在 耘曾责则藻泽泽 和
运则燥灶燥泽中的突变频率分别为 员 辕 员愿 噪遭 和 员 辕 猿源 噪遭袁尤为
重要的是袁该研究获得了具有明显表型突变的株系遥
之后 哉葬怎赠 等咱猿远暂利用 园郾 苑豫 耀园郾 苑缘豫的 耘酝杂溶液处理
四倍体硬粒小麦 运则燥灶燥泽 并利用 园郾 怨豫 耀 员郾 园豫的 耘酝杂
溶液处理六倍体普通小麦 哉悦员园源员袁得到 圆 个 栽陨蕴蕴陨晕郧
群体袁大小分别为 员猿远愿 和 员缘猿远 株遥 在 员员 个目的基因
中鉴定出了 圆苑缘 个新的等位变异袁在 运则燥灶燥泽 和 哉悦员园源
中得到的突变频率分别为 员 辕 缘员噪遭 和 员 辕 猿愿噪遭遥 同样是
以 运则燥灶燥泽为野生型袁灾砸晕员 和 灾砸晕圆 两个春化基因的平
均突变率为 员 辕 缘员噪遭咱猿苑暂 遥 杂造葬凿藻 等咱圆猿暂所用四倍体小麦
和六倍体小麦目的基因片断的平均 郧悦 含量分别为
缘愿豫和 缘缘郾 怨豫 袁哉葬怎赠 等咱猿远暂所用两种材料中目的基因
片断的平均 郧悦含量为 猿苑郾 猿豫和 猿愿郾 愿豫 袁而 耘酝杂诱发
点突变的多少与 郧悦含量有关袁目的片断中 郧悦含量不
同可能是造成两个研究中突变频率具有明显差异的主
要原因之一遥 两个研究中四倍体小麦的突变频率均高
于六倍体小麦遥
砸葬憎葬贼等咱猿愿暂为了研究 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术在二倍体小
麦中突变频率的变化袁在 员缘猿圆 个单株的 耘酝杂 群体中
对 猿 个木质素合成相关基因和 员 个 憎葬曾赠 基因进行
栽陨蕴蕴陨晕郧检测袁得到 远苑 个点突变遥 憎葬曾赠 基因尧木质素
合成途径中的相关基因 悦韵酝栽员尧 匀悦栽圆 和 源悦蕴员 在二
倍体小麦的突变频率分别为 员 辕 怨园尧员 辕 愿远尧 员 辕 怨圆 和 员 辕
苑圆圆
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
员园园 噪遭袁源 个基因的平均突变频率为 员 辕 怨圆噪遭遥 相同基
因在二倍体小麦中的突变频率低于其在四倍体和六倍
体小麦中的突变率袁进一步证明突变频率与染色体倍
数间存在相关性袁染色体倍数越高袁则突变频率越高遥
猿郾 圆郾 圆摇 水稻摇 栽蚤造造 等咱源园暂在水稻的 粤扎鄄酝晕哉 诱变群体
中对 员园 个目的基因进行点突变筛选袁得到 猿园 个碱基
突变位点袁突变频率为 员 辕 猿园园噪遭遥 杂怎扎怎噪蚤 等咱源员暂在另一
个 酝晕哉 诱变水稻群体中检测到的突变频率为 员 辕
猿缘噪遭遥 以 猿园 原 员圆园郧赠酌射线处理水稻产生的群体对色
氨酸合成途径上的 韵粤杂粤员 基因进行点突变筛选袁共得
到 猿员 个点突变袁突变频率为 员 辕 圆园源噪遭遥 在这些点突变
中袁有 猿 个点突变 酝砸灾陨陨 原 怨尧酝砸灾陨陨 原 猿猿 和 酝砸灾陨陨 原
猿苑 导致氨基酸序列的改变袁提高了相应突变体种子中
储藏蛋白中色氨酸的含量咱源圆暂 遥
表 员摇 源 个大豆群体点突变情况咱源远暂
栽葬遭造藻 员摇 孕燥蚤灶贼 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶 源 皂怎贼葬早藻灶蚤扎藻凿 责燥责怎造葬贼蚤燥灶泽 燥枣 泽燥赠遭藻葬灶咱源远暂
群体
孕燥责怎造葬贼蚤燥灶
诱变剂
酝怎贼葬早藻灶
浓度
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕 皂酝
处理时间
栽则藻葬贼皂藻灶贼 贼蚤皂藻 辕 澡
群体大小
孕燥责怎造葬贼蚤燥灶 泽蚤扎藻
材料
酝葬贼藻则蚤葬造
点突变数
孕燥蚤灶贼 皂怎贼葬贼蚤燥灶
突变频率
酝怎贼葬贼蚤燥灶 云则藻择怎藻灶糟赠 辕 渊员 辕 噪遭冤
粤 耘酝杂 源园 愿 缘圆怨 云燥则则藻泽贼 猿圆 员源园
月 耘酝杂 源园 愿 苑远愿 宰蚤造造蚤葬灶泽愿圆 员圆 缘缘园
悦 耘酝杂 缘园 愿 苑远愿 宰蚤造造蚤葬灶泽愿圆 圆缘 圆缘园
阅 晕酝哉 圆郾 缘 愿 苑远愿 宰蚤造造蚤葬灶泽愿圆 源苑 员源园
猿郾 圆郾 猿摇 高粱摇 高粱中含有蜀黍氰甙袁能够释放氰化
氢袁对人类和动物产生不良影响遥 悦再孕苑怨粤员 是细胞色
素 孕源缘园 酶袁是催化蜀黍氰甙合成的关键酶遥 用 耘酝杂
处理高粱种子并通过 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术筛选氰化氢潜能
降低的突变体袁得到能够分解或降低氰化氢释放的
悦再孕苑怨粤员 突变体咱源猿暂 遥
猿郾 圆郾 源摇 玉米摇 栽蚤造造等咱源源暂于 圆园园源 年首次将 栽陨蕴蕴陨晕郧 技
术应用于玉米中袁在 苑缘园 个突变单株中对 员员 个基因进
行 栽陨蕴蕴陨晕郧检测袁得到 员苑 个突变体遥 其中有 员 个基因
是 阅酝栽员园圆 染色体甲基化酶基因袁该基因共获得了 猿
个错义突变的等位基因系遥
猿郾 圆郾 缘摇 大麦摇 月燥增蚤灶葬等咱源缘暂利用 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术研究了
大麦淀粉合成代谢中的相关基因袁淀粉代谢过程中的
生物合成基因及生物调节基因突变常会产生形态不规
则的淀粉颗粒及其它分子特性遥 在 缘 个大麦淀粉合成
相关基因 月皂赠员尧郧月杂杂陨尧蕴阅粤员尧杂杂陨 和 杂杂陨陨 中检测到 圆怨
个突变位点袁突变频率为 员 辕 缘圆园噪遭遥 大多数位点都为
悦鄄栽或 郧鄄粤 的突变袁其中部分会导致氨基酸序列产生
变化袁这些突变可能会导致表型性状的改变遥 有 源 个
点突变为终止突变或剪接变化袁这 圆 类突变都会对相
应蛋白质产生较大影响遥
猿郾 猿摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术在油料作物中的应用
猿郾 猿郾 员摇 大豆 摇 悦燥燥责藻则 等咱源远暂构建了大豆的 猿 个 耘酝杂
诱变群体和 员 个 晕酝哉诱变群体袁将 栽陨蕴蕴陨晕郧技术应用
于大豆的突变体筛选中遥 在 苑 个目的基因中共发现了
员员远 个诱导突变位点遥 利用 耘酝杂 和 晕酝哉 两种诱变剂
构建的突变群体都可以应用于 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术中袁同时
材料种类及诱变剂浓度对突变频率都有影响渊表 员冤遥
摇 摇 普通大豆由于富含多元未饱和脂肪酸渊孕哉云粤冤而
极容易氧化袁脂肪酸去饱和酶 云粤阅圆 能降低 孕哉云粤 水
平遥 大豆基因组中含有 缘 个 云粤阅圆 基因同系物袁其中
至少有 猿 个有功能遥 匀燥泽澡蚤灶燥等咱源苑暂利用 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术
在两个不同的大豆 耘酝杂 诱变群体中对 郧皂云粤阅圆 原 员遭
基因的编码区进行检测袁识别出 源 个点突变袁月员圆 和
耘员员 这两个点突变引起氨基酸的改变袁分别为
栽澡则员愿怨孕则燥和 郧造赠员园猿灾葬造袁相应突变体的油酸含量也发
生了显著变化遥
大豆胞囊线虫渊杂悦晕冤是降低大豆产量的主要原因
之一遥 蕴蚤怎 等咱源愿暂在 砸澡早源 位点定位并克隆了抑制胞囊
线虫侵染的主效基因 砸澡早员 和 砸澡早源袁分别编码丝氨酸
羟甲基转移酶渊杂匀酝栽冤和类枯草杆菌蛋白酶渊杂哉月员冤遥
利用 栽陨蕴蕴陨晕郧技术检测到 云燥则则藻泽贼渊大豆的一个品种冤
的 圆 个突变体 云远圆远远 和 云远苑缘远袁这 圆 个突变都在 杂匀酝栽
基因上袁并导致了氨基酸位点的改变 耘远员运 和 酝员圆缘陨袁
酝员圆缘陨突变单株在 酝猿 表现明显的 杂悦晕抗性遥猿郾 猿郾 圆摇 花生摇 少数人食用花生或花生制品会产生过
敏反应袁改变这种状况的方法之一是通过诱导突变来
改变或消除引起过敏反应的蛋白质遥 运灶燥造造 等咱源怨暂在
耘酝杂诱变处理四倍体花生获得的 猿源圆园 株 酝圆 群体中
对脂肪酸脱氢酶 粤澡云粤阅员 和 粤澡云粤阅圆 两个过敏原基因
进行 栽陨蕴蕴陨晕郧 检测袁 其突变频率为 员 辕 怨远苑噪遭曰 在
粤澡云粤阅圆 基因中检测得到了一个移码突变袁导致
粤澡云粤阅圆 基因编码的 粤澡云粤阅圆月蛋白质断裂和失活遥
猿郾 猿郾 猿摇 油菜摇 匀葬则造燥枣枣等咱缘园暂利用 耘酝杂构建了油菜的 圆
个突变群体袁一个群体的野生型为春性油菜 再晕园员 原
源圆怨袁另一个群体的野生型为冬性油菜 耘曾责则藻泽泽 远员苑遥 圆
愿圆圆
摇 圆 期 栽陨蕴蕴陨晕郧技术的发展及其在不同植物中的应用
个群体的大小分别为 缘猿远员 和 猿源愿愿 株遥 利用 栽陨蕴蕴陨晕郧
技术对芥子酸胆碱合成途径中的 月灶葬载援 杂郧栽和 月灶葬载援
砸耘云员 基因进行检测袁分别得到 圆圆怨 和 猿源员 个点突变袁
在 再晕园员 原源圆怨 中突变频率分别为 员 辕 圆苑 和 员 辕 远园噪遭袁在
耘曾责则藻泽泽 远员苑 中的突变频率分别为 员 辕 员圆 和 员 辕 圆圆噪遭遥
表 圆摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术在不同植物中的应用咱缘袁 圆缘暂
栽葬遭造藻 圆摇 贼澡藻 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 栽陨蕴蕴陨晕郧 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责造葬灶贼泽咱缘袁 圆缘暂
物种
杂责藻糟蚤藻泽
倍性
孕造燥蚤凿赠
诱变剂
酝怎贼葬早藻灶
酝圆 群体渊株冤孕燥责怎造葬贼蚤燥灶 泽蚤扎藻
目的基因渊个冤
栽葬则早藻贼 早藻灶藻
片断总长度
云则葬早皂藻灶贼
造藻灶早贼澡 辕 酝遭
突变体数渊个冤
酝怎贼葬贼蚤燥灶
灶怎皂遭藻则
突变频率
酝怎贼葬贼蚤燥灶
枣则藻择怎藻灶糟赠 辕 噪遭
参考文献
砸藻枣藻则藻灶糟藻
拟南芥 圆 伊 耘酝杂 原 员怨圆 缘苑远 员愿怨园 猿园园 咱缘缘暂
粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 耘酝杂 远怨员圆 员园园 猿园员援 远 员苑苑源 员苑园 咱缘远暂
耘酝杂 猿苑员圆 员源 源园 源缘园 愿怨 咱猿源暂
耘酝杂 缘圆愿 员缘 原 原 员怨援 源 辕 酝遭 咱猿缘暂
小麦 宰澡藻葬贼 远 伊 耘酝杂 圆远员园 猿 猿援 猿 缘远 源怨援 远 咱猿怨暂
耘酝杂 员园园园园 圆 源 员怨远 圆源 咱员园暂
耘酝杂 员缘猿远 猿 员员援 缘 员愿远 猿愿 咱猿远暂
匀陨陨鄢 圆园园园园 员 圆源援 苑 圆怨源 愿源 咱猿员暂
小麦 宰澡藻葬贼 源 伊 原 圆猿园源 圆 原 原 缘员 咱猿苑暂
小麦 宰澡藻葬贼 圆 伊 耘酝杂 员缘猿圆 源 源援 愿 远苑 怨圆 咱猿愿暂
大麦 月葬则造藻赠 圆 伊 原 源怨园远 缘 员缘援 员 圆怨 缘圆园 咱源缘暂
水稻 砸蚤糟藻 圆 伊 耘酝杂 苑远愿 员园 愿 圆苑 圆怨源 咱源园暂
晕葬晕猿 原 酝晕哉 苑远愿 员园 愿 猿园 圆远缘 咱源园暂
酝晕哉 苑远苑 猿 猿援 圆 圆源 员猿缘 咱员缘暂
高粱 杂燥则早澡怎皂 圆 伊 耘酝杂 缘源缘员 员 猿 圆猿 员猿圆 咱源猿暂
耘酝杂 员远园园 源 远援 缘 缘 缘圆远 咱缘苑暂
大豆 杂燥赠遭藻葬灶 源 伊 耘酝杂 缘圆怨 苑 源援 缘 猿圆 员源园 咱源远暂
耘酝杂 苑远愿 苑 猿 员圆 圆缘园 咱源远暂
耘酝杂 苑远愿 苑 员猿援 愿 圆缘 缘缘园 咱源远暂
晕酝哉 苑远愿 苑 远援 远 源苑 员源园 咱源远暂
花生 孕藻葬灶怎贼 源 伊 耘酝杂 猿源圆园 远 圆远援 员 圆苑 怨远远 咱源怨暂
油菜 砸葬责藻泽藻藻凿 源 伊 耘酝杂 缘猿远员 圆 员远 员园园 员远园 咱缘园暂
耘酝杂 猿源愿愿 圆 圆园援 怨 缘愿猿 猿缘援 愿 咱缘园暂
玉米 酝葬蚤扎藻 圆曾 耘酝杂 苑缘园 员员 员圆援 愿 员苑 源愿缘 咱源源暂
香蕉 月葬灶葬灶葬 猿 伊 耘酝杂 苑远愿 员员 员圆援 缘 猿猿 猿苑愿 咱缘源暂
烟草 栽燥遭葬糟糟燥 源 伊 耘酝杂 猿园苑圆 源 员猿援 源 苑 员源猿圆 咱缘猿暂
蕃茄 栽燥皂葬贼燥 圆 伊 耘酝杂 远远远苑 苑 怨援 缘 远远 源源愿 咱缘圆暂
耘酝杂 猿园缘圆 远 源远援 怨 猿缘 员圆圆猿 咱缘员暂
摇 摇 注院匀陨陨表示重离子处理遥
摇 摇 晕燥贼藻院匀陨陨 皂藻葬灶泽 澡藻葬增赠 蚤燥灶 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶援
猿郾 源摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术在其它作物中的应用
猿郾 源郾 员摇 蕃茄 摇 酝蚤灶燥蚤葬 等咱缘员暂用浓度为 园郾 苑豫和 员郾 园豫
的 耘酝杂 溶液处理蕃茄栽培品种 砸藻凿杂藻贼贼藻则 种子袁建立
了蕃茄的表型数据库要蕴赠糟燥栽陨蕴蕴袁同时也建立了蕃茄
的 栽陨蕴蕴陨晕郧 研究平台要砸藻凿杂藻贼贼藻则栽陨蕴蕴陨晕郧 渊 澡贼贼责院 辕 辕
憎憎憎援 葬早则燥遭蚤燥泽援 蚤贼 辕 贼蚤造造蚤灶早 辕 泽藻藻凿援 澡贼皂造冤遥 利用该平台对 苑
个蕃茄基因进行 栽陨蕴蕴陨晕郧检测袁得到 远远 个核苷酸突变
位点袁员郾 园豫和 园郾 苑豫 耘酝杂 诱变群体的突变频率分别
为 员 辕 猿圆圆 和 员 辕 缘苑源噪遭遥 在外显子区的点突变中有
怨圆圆
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
猿苑郾 远豫是沉默突变袁远圆郾 源豫是错义突变袁其中 缘苑郾 员源豫
的错义突变对相关蛋白质功能有负作用遥
在 砸藻凿杂藻贼贼藻则栽陨蕴蕴陨晕郧 基础上袁韵噪葬遭藻 等咱缘圆暂建立了
酝蚤糟则燥鄄栽燥皂 栽陨蕴蕴陨晕郧平台袁加速了蕃茄功能基因组的研
究遥 这个平台拥有大小为 猿园缘圆 株的 耘酝杂 突变群体袁
耘酝杂处理浓度为 园郾 缘豫和 员郾 园豫 袁同时利用 酌射线处理
构建了一个物理诱变群体袁具体信息可在 栽韵酝粤栽韵酝粤
数据库 渊 澡贼贼责院 辕 辕 贼燥皂葬贼燥皂葬援 灶遭则责援 躁责 辕 冤 中得到遥 利用
酝蚤糟则燥鄄栽燥皂 栽陨蕴蕴陨晕郧平台对 远 个乙烯受体基因 杂造耘栽砸员
原 杂造耘栽砸远 进行 栽陨蕴蕴陨晕郧 检测袁用 耘晕阅韵员 酶进行酶切
反应袁得到 猿缘 个点突变袁平均突变频率为 员 辕 员圆圆猿噪遭袁
其中 杂造藻贼则员 基因的等位变异可以减弱乙烯反应袁发生
突变的单株果实成熟期延迟袁同时延长了果实的保鲜
时间遥 酝蚤糟则燥鄄栽燥皂 栽陨蕴蕴陨晕郧 平台加快了蕃茄重要农艺
性状的分离袁同时对水果的生物学研究具有重要意义遥
猿郾 源郾 圆摇 烟草摇 提高叶片产量是烟草育种的关键目标遥
砸藻凿凿赠等构建了大小为 苑愿园园 株的 耘酝杂 诱变群体袁从
中选择 猿园苑圆 株进行 栽陨蕴蕴陨晕郧 检测遥 得到 苑 个与叶片
生物量及次级代谢相关的突变体遥 这个群体的总突变
频率为 员 辕 员源猿圆噪遭遥 同时这一群体中也包含叶片数量
增加或叶片变宽的表型突变单株咱缘猿暂 遥
猿郾 源郾 猿摇 香蕉 摇 为建立无性繁殖作物 栽陨蕴蕴陨晕郧 平台袁
栽蚤造造等咱缘源暂利用 耘酝杂 处理已分离的香蕉茎顶端分生组
织袁在成活的幼苗中筛选被诱导的突变体袁经过
栽陨蕴蕴陨晕郧检测袁发现群体中有高密度的 郧鄄粤 或 悦鄄栽 转
换突变袁这个结果与有性繁殖植物中得到的结果类似遥
通过对突变体的遗传分析发现袁诱变处理产生的基因
异构型干细胞在分生组织中快速修正为一个单一基因
型遥 突变基因型在遗传后代中趋于稳定遥 同时在对自
然核酸变异的评价中发现了潜在有害杂合等位变异的
堆积袁这表明诱变可能会导致隐性特性出现遥 该研究
提供了基于功能基因组学的无性繁殖作物改良突变平
台渊表 圆冤遥
源摇 栽陨蕴蕴陨晕郧技术的应用前景与展望
栽陨蕴蕴陨晕郧是基于非转基因研究的突变体筛选技
术袁其应用范围不受物种尧繁殖方式尧染色体倍数尧基因
组大小等因素的影响袁有效弥补了 栽鄄阅晕粤尧砸晕粤 干扰
及转座子标签等技术的不足曰同时 栽陨蕴蕴陨晕郧 是一种定
向点突变筛选技术袁对目标突变体的筛选不受遗传背
景尧基因互作尧表型特征尧生长环境等因素的影响袁鉴定
准确性高曰栽陨蕴蕴陨晕郧 又是一种高通量的筛选方法袁能够
实现大群体尧多基因尧多性状的快速高效鉴定袁提高突
变体筛选效率袁因此该技术有望成为植物功能基因组
研究的主要反向遗传学方法之一遥
农作物育种过程中袁耐逆性等由微效多基因调控
以及品质尧育性等相关性状一直是新材料创制的难点袁
难以实现筛选压的均一化或材料的早代选择袁由
栽陨蕴蕴陨晕郧分析所鉴定的大量目标突变体分别含有不同
的或新的等位变异袁通过与常规育种技术的有效结合袁
能够实现目标性状优良等位变异的基因聚合袁从而创
制综合性状优良的育种新材料袁促进农作物耐逆尧高
产尧优质新品种的培育遥
参考文献院
咱 员 暂摇 汪念援 甘蓝型油菜 耘酝杂突变体库的构建 栽陨蕴蕴陨晕郧袁耘悦韵栽陨蕴蕴陨晕郧
技术的应用研究 咱阅暂援 武汉院华中农业大学袁圆园园怨
咱 圆 暂摇 李丽文袁 朱延明袁 李杰袁 柏锡袁 才华援 砸晕粤蚤 技术在植物功能基
因组学中的研究进展 咱 允暂 援 东北农业大学学报袁 圆园园苑袁 猿愿渊员冤院
员员怨 原 员圆源
咱 猿 暂摇 李宏袁 黄晓天援高等植物转座子的超家族及其应用渊综述冤 咱 允暂 援
亚热带植物科学袁 圆园员园袁 猿怨渊猿冤院 怨猿 原 怨远
咱 源 暂摇 李春寿袁 阮关海袁 张琳琳袁 吴殿星援 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术的原理尧特点
及其在点突变筛选中的应用 咱允暂 援 核农学报袁 圆园园缘袁 员怨渊源冤院 猿员苑
原 猿猿圆
咱 缘 暂摇 宰葬灶早 栽 蕴袁 哉葬怎赠 悦袁 砸燥遭泽燥灶 云袁 栽蚤造造 月 允援 栽陨蕴蕴陨晕郧 蚤灶 藻曾贼则藻皂蚤泽 咱允暂 援
孕造葬灶贼 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 允燥怎则灶葬造袁 圆园员圆袁 员园渊苑冤院 苑远员 原 苑苑圆
咱 远 暂摇 悦燥燥责藻则 允 蕴袁 匀藻灶蚤噪燥枣枣 杂袁 悦燥皂葬蚤 蕴袁 栽蚤造造 月 允援 栽陨蕴蕴陨晕郧 葬灶凿 耘糟燥贼蚤造造蚤灶早
枣燥则 砸蚤糟藻 咱允暂 援 酝藻贼澡燥凿泽 蚤灶 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁 圆园员猿袁 怨缘远院 猿怨 原 缘远
咱 苑 暂摇 栽蚤造造 月 允袁 在藻则则 栽袁 悦燥皂葬蚤 蕴袁 匀藻灶蚤噪燥枣枣 杂援 粤 责则燥贼燥糟燥造 枣燥则 栽陨蕴蕴陨晕郧 葬灶凿
耘糟燥贼蚤造造蚤灶早 蚤灶 责造葬灶贼泽 葬灶凿 葬灶蚤皂葬造泽 咱允暂 援 晕葬贼怎则藻 责则燥贼燥糟燥造袁 圆园园远袁 员渊缘冤院
圆源远缘 原 圆源苑苑
咱 愿 暂摇 杂葬贼燥 再袁 杂澡蚤则葬泽葬憎葬 运袁 栽葬噪葬澡葬泽澡蚤 再袁 晕蚤泽澡蚤皂怎则葬 酝袁 晕蚤泽澡蚤燥 栽援
酝怎贼葬灶贼 泽藻造藻糟贼蚤燥灶 枣则燥皂 责则燥早藻灶赠 燥枣 早葬皂皂葬鄄则葬赠鄄蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 则蚤糟藻 遭赠 阅晕粤
澡藻贼藻则燥凿怎责造藻曾 糟造藻葬增葬早藻 怎泽蚤灶早 月则葬泽泽蚤糟葬 责藻贼蚤燥造藻 藻曾贼则葬糟贼 咱 允暂 援 月则藻藻凿蚤灶早
杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园远袁 缘远渊圆冤院 员苑怨 原 员愿猿援
咱 怨 暂 摇 载蚤灶 在 郧袁 宰葬灶早 酝 蕴袁 月葬则噪造藻赠 晕 粤袁 月怎则燥憎 郧袁 云则葬灶噪泽 悦袁 孕藻凿藻则泽燥灶
郧袁 月怎则噪藻 允援 粤责责造赠蚤灶早 早藻灶燥贼赠责蚤灶早 渊 栽陨蕴蕴陨晕郧冤 葬灶凿 责澡藻灶燥贼赠责蚤灶早
葬灶葬造赠泽藻泽 贼燥 藻造怎糟蚤凿葬贼藻 早藻灶藻 枣怎灶糟贼蚤燥灶 蚤灶 葬 糟澡藻皂蚤糟葬造造赠 蚤灶凿怎糟藻凿 泽燥则早澡怎皂
皂怎贼葬灶贼 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园愿袁 愿院 员园猿
咱员园暂摇 杂造葬凿藻 粤 允袁 云怎藻则泽贼藻灶遭藻则早 杂 陨袁 蕴燥藻枣枣造藻则 阅袁 杂贼藻蚤灶藻 酝 晕袁 云葬糟糟蚤燥贼贼蚤 阅援
粤 则藻增藻则泽藻 早藻灶藻贼蚤糟袁 灶燥灶贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 葬责责则燥葬糟澡 贼燥 憎澡藻葬贼 糟则燥责
蚤皂责则燥增藻皂藻灶贼 遭赠 栽陨蕴蕴陨晕郧 咱 允暂 援 晕葬贼怎则藻 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园园缘袁 圆猿
渊员冤院 苑缘 原 愿员
咱员员暂摇 杂蚤噪燥则葬 孕袁 悦澡葬憎葬凿藻 粤袁 蕴葬则泽泽燥灶 酝袁 韵造泽泽燥灶 允袁 韵造泽泽燥灶 韵援 酝怎贼葬早藻灶藻泽蚤泽
葬泽 葬 贼燥燥造 蚤灶 责造葬灶贼 早藻灶藻贼蚤糟泽袁 枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造 早藻灶燥皂蚤糟泽 葬灶凿 遭则藻藻凿蚤灶早 咱 允暂 援
陨灶贼藻则灶葬贼蚤燥灶葬造 允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼 郧藻灶燥皂蚤糟泽袁 圆园员员袁渊员冤院员 原 员猿
咱员圆暂摇 周晓光袁 任鲁风袁 李运涛袁 张猛袁 俞育德袁 于军援 下一代测序技
术院技术回顾与展望 咱允暂 援 中国科学袁 圆园员园袁 源园渊员冤院 圆猿 原 猿苑
咱员猿暂摇 栽泽葬蚤 匀袁 匀燥憎藻造 栽袁 晕蚤贼糟澡藻则 砸袁 酝蚤泽泽蚤则蚤葬灶 灾袁 宰葬贼泽燥灶 月袁 晕早燥 运 允袁
蕴蚤藻遭藻则皂葬灶 酝袁 云葬泽泽 允袁 哉葬怎赠 悦袁 栽则葬灶 砸 运袁 运澡葬灶 粤 粤袁 云蚤造噪燥增 灾袁
栽葬蚤 栽 匀袁 阅怎遭糟燥增泽噪赠 允袁 悦燥皂葬蚤 蕴援 阅蚤泽糟燥增藻则赠 燥枣 则葬则藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶
责燥责怎造葬贼蚤燥灶泽院 栽陨蕴蕴陨晕郧 遭赠 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早 咱允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园员员袁
园猿圆
摇 圆 期 栽陨蕴蕴陨晕郧技术的发展及其在不同植物中的应用
员缘远渊猿冤院员圆缘苑 原 员圆远愿
咱员源暂摇 栽则蚤择怎藻泽 运袁 孕蚤藻凿灶燥蚤则 耘袁 阅葬造皂葬蚤泽 酝袁 杂糟澡皂蚤凿贼 允援 酝怎贼葬贼蚤燥灶 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶
怎泽蚤灶早 耘晕阅韵员院 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 贼燥 凿蚤泽藻葬泽藻 凿蚤葬早灶燥泽贼蚤糟泽 蚤灶 澡怎皂葬灶泽 葬灶凿
栽陨蕴蕴陨晕郧 葬灶凿 耘糟燥鄄栽陨蕴蕴陨晕郧 蚤灶 责造葬灶贼泽 咱允暂 援 月酝悦 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁
圆园园愿袁 怨院 源圆
咱员缘暂摇 杂怎扎怎噪蚤 栽袁 耘蚤早怎糟澡蚤 酝袁 运怎皂葬皂葬则怎 栽袁 杂葬贼燥澡 匀袁 酝葬贼泽怎泽葬噪葬 匀袁
酝燥则蚤早怎糟澡蚤 运袁 晕葬早葬贼燥 再袁 运怎则葬贼葬 晕援 酝晕哉鄄蚤灶凿怎糟藻凿 皂怎贼葬灶贼 责燥燥造泽 葬灶凿
澡蚤早澡 责藻则枣燥则皂葬灶糟藻 栽陨蕴蕴陨晕郧 藻灶葬遭造藻 枣蚤灶凿蚤灶早 燥枣 葬灶赠 早藻灶藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 蚤灶
则蚤糟藻 咱允暂 援 酝燥造藻糟怎造葬则 郧藻灶藻贼 郧藻灶燥皂蚤糟泽袁 圆园园愿袁 圆苑怨渊猿冤院 圆员猿 原 圆圆猿
咱员远暂摇 悦葬造凿憎藻造造 阅 郧袁 酝糟悦葬造造怎皂 晕袁 杂澡葬憎 孕袁 酝怎藻澡造遭葬怎藻则 郧 允袁 酝葬则泽澡葬造造 阅
云袁 宰葬怎早澡 砸援 粤 泽贼则怎糟贼怎则藻凿 皂怎贼葬灶贼 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 枣燥则 枣燥则憎葬则凿 葬灶凿 则藻增藻则泽藻
早藻灶藻贼蚤糟泽 蚤灶 月葬则造藻赠 渊 匀燥则凿藻怎皂 增怎造早葬则藻 蕴援 冤 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 允燥怎则灶葬造袁
圆园园源袁 源园渊员冤院 员源猿 原 员缘园
咱员苑暂摇 郧怎灶凿则赠 悦 晕袁 灾葬灶凿藻则泽贼藻藻灶 允 郧袁 砸藻藻泽 郧 匀袁 孕则赠燥则 砸 允袁 悦澡藻灶 允袁
宰蚤贼贼憎藻则 悦 栽援 粤皂责造蚤糟燥灶 皂藻造贼蚤灶早 葬灶葬造赠泽蚤泽 憎蚤贼澡 造葬遭藻造藻凿 责则蚤皂藻则泽院 葬
糟造燥泽藻凿鄄贼怎遭藻 皂藻贼澡燥凿 燥则 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤灶早 澡燥皂燥扎赠早燥贼藻泽 葬灶凿 澡藻贼藻则燥扎赠早燥贼藻泽
咱允暂 援 悦造蚤灶蚤糟葬造 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁 圆园园猿袁 源怨渊猿冤院 猿怨圆 原 源园远
咱员愿暂摇 阅燥灶早 悦袁 灾蚤灶糟藻灶贼 运袁 杂澡葬则责 孕援 杂蚤皂怎造贼葬灶藻燥怎泽 皂怎贼葬贼蚤燥灶 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣
贼澡则藻藻 澡燥皂燥藻燥造燥早燥怎泽 早藻灶藻泽 蚤灶 憎澡藻葬贼 遭赠 匀蚤早澡 砸藻泽燥造怎贼蚤燥灶 酝藻造贼蚤灶早
葬灶葬造赠泽蚤泽 葬灶凿 酝怎贼葬贼蚤燥灶 杂怎则增藻则燥则 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园怨袁 怨院
员源猿
咱员怨暂摇 郧葬凿赠 粤 蕴 云袁 匀藻则皂葬灶泽 云 宰 运 袁 宰葬造 酝 匀 灾 阅袁 蕴燥燥 耘 晕 灾袁 灾蚤泽泽藻则
砸 郧 云袁 月葬糟澡藻皂 悦 宰 月援 陨皂责造藻皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 燥枣 贼憎燥 澡蚤早澡 贼澡则燥怎早澡鄄责怎贼
贼藻糟澡灶蚤择怎藻泽 蚤灶 葬 灶燥增藻造 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶院 凿藻贼藻糟贼蚤灶早 责燥蚤灶贼 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶 造葬则早藻
耘酝杂 皂怎贼葬贼藻凿 责造葬灶贼 责燥责怎造葬贼蚤燥灶泽 咱允暂 援 孕造葬灶贼 酝藻贼澡燥凿泽袁 圆园园怨袁 缘院 员猿
咱圆园暂摇 月怎泽澡 杂袁 运则赠泽葬灶 孕援 蚤栽陨蕴蕴陨晕郧院 葬 责藻则泽燥灶葬造蚤扎藻凿 葬责责则燥葬糟澡 贼燥 贼澡藻
蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 蚤灶凿怎糟藻凿 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 咱 允 暂 援 孕造葬灶贼
孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园员园袁 员缘源渊员冤院 圆缘 原 猿缘
咱圆员暂摇 悦澡葬憎葬凿藻 粤袁 杂蚤噪燥则葬 孕袁 月则覿怎贼蚤早葬皂 酝袁 蕴葬则泽泽燥灶 酝袁 灾蚤增藻噪葬灶葬灶凿 灾袁
晕葬噪葬泽澡 酝 粤袁 悦澡藻灶 栽袁 韵造泽泽燥灶 韵援 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬灶凿 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶
燥枣 葬灶 燥葬贼 栽陨蕴蕴陨晕郧鄄责燥责怎造葬贼蚤燥灶 葬灶凿 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶
造蚤早灶蚤灶 葬灶凿 茁 原 早造怎糟葬灶 遭蚤燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 早藻灶藻泽 咱 允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁
圆园员园袁 员园院 愿远
咱圆圆暂摇 栽葬赠造燥则 晕 耘袁 郧则藻藻灶藻 耘 粤援 孕粤砸杂耘杂晕孕院 葬 贼燥燥造 枣燥则 贼澡藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣
灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂泽 咱允暂 援 晕怎糟造藻蚤糟 粤糟蚤凿泽 砸藻泽藻葬则糟澡袁 圆园园猿袁 猿员
渊员猿冤院 猿愿园愿 原 猿愿员员
咱圆猿暂摇 杂造葬凿藻 粤 允袁 酝糟郧怎蚤则藻 悦袁 蕴燥藻枣枣造藻则 阅袁 酝怎造造藻灶遭藻则早 允袁 杂噪蚤灶灶藻则 宰袁 云葬扎蚤燥
郧袁 匀燥造皂 粤袁 月则葬灶凿贼 运 酝袁 杂贼藻蚤灶藻 酝 晕袁 郧燥燥凿泽贼葬造 允 云袁 运灶葬怎枣 灾 悦援
阅藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 澡蚤早澡 葬皂赠造燥泽藻 憎澡藻葬贼 贼澡则燥怎早澡 栽陨蕴蕴陨晕郧 咱 允暂 援 月酝悦
孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园员圆袁 员圆院 远怨
咱圆源暂摇 酝蚤造遭怎则灶 阅袁 蕴葬泽噪燥憎泽噪蚤 砸 粤袁 栽澡燥则灶贼燥灶 允 酝援 杂藻择怎藻灶糟藻泽 葬灶灶燥贼葬贼藻凿 遭赠
泽贼则怎糟贼怎则藻院 葬 贼燥燥造 贼燥 枣葬糟蚤造蚤贼葬贼藻 贼澡藻 怎泽藻 燥枣 泽贼则怎糟贼怎则葬造 蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 蚤灶
泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 咱允暂 援 孕则燥贼藻蚤灶 耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早袁 员怨怨愿袁 员员渊员园冤院 愿缘缘 原
愿缘怨
咱圆缘暂摇 运怎则燥憎泽噪葬 酝袁 阅葬泽扎噪燥憎泽噪葬鄄郧燥造藻糟 粤袁 郧则怎泽扎噪葬 阅袁 酝葬则扎藻糟 酝袁
杂扎怎则皂葬灶 酝袁 杂扎葬则藻躁噪燥 陨袁 酝葬造怎泽扎赠灶泽噪蚤 酝援 栽陨蕴蕴陨晕郧 鄄 葬 泽澡燥则贼糟怎贼 蚤灶
枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造 早藻灶燥皂蚤糟泽 咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 粤责责造蚤藻凿 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 圆园员员袁 缘圆院
猿苑员 原 猿怨园
咱圆远暂摇 悦燥皂葬蚤 蕴袁 再燥怎灶早 运袁 栽蚤造造 月 允袁 砸藻赠灶燥造凿泽 杂 匀袁 郧则藻藻灶藻 耘 粤袁 悦燥凿燥皂燥
悦 粤袁 耘灶灶泽 蕴 悦袁 允燥澡灶泽燥灶 允 耘袁 月怎则贼灶藻则 悦袁 韵凿凿藻灶 粤 砸袁 匀藻灶蚤噪燥枣枣 杂援
耘枣枣蚤糟蚤藻灶贼 凿蚤泽糟燥增藻则赠 燥枣 阅晕粤 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂泽 蚤灶 灶葬贼怎则葬造 责燥责怎造葬贼蚤燥灶泽 遭赠
耘糟燥贼蚤造造蚤灶早 咱允暂 援 孕造葬灶贼 允燥怎则灶葬造袁 圆园园源袁 猿苑渊缘冤院 苑苑愿 原 苑愿远
咱圆苑暂摇 允蚤灶 允袁 悦澡藻灶 蕴袁 再葬燥 酝袁 宰葬灶早 载袁 酝葬 悦袁 允蚤灶 允 匝袁 悦澡藻灶 蕴袁 再葬燥 酝
在袁 宰葬灶早 载 悦袁 酝葬 悦 蕴援 杂蚤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧 贼藻糟澡灶蚤择怎藻 枣燥则
贼藻葬 责造葬灶贼 咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 栽藻葬 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园员园袁 猿园渊员冤院 员怨 原 圆远
咱圆愿暂摇 郧蚤造糟澡则蚤泽贼 耘 允袁 匀葬怎早澡灶 郧 宰袁 再蚤灶早 悦 悦袁 韵贼贼燥 粤 孕袁 在澡怎葬灶早 允袁
悦澡藻灶怎灶早 阅袁 匀葬皂遭藻则早藻则 月袁 粤遭燥怎贼燥则葬遭蚤 云袁 运葬造赠灶赠葬噪 栽袁 允燥澡灶泽燥灶 蕴袁
月燥澡造皂葬灶灶 允袁 耘造造蚤泽 月 耘袁 阅燥怎早造葬泽 悦 允袁 悦则燥灶噪 匝 悦援 哉泽藻 燥枣 耘糟燥贼蚤造造蚤灶早
葬泽 葬灶 藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 杂晕孕 凿蚤泽糟燥增藻则赠 贼燥燥造 贼燥 泽怎则增藻赠 早藻灶藻贼蚤糟 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 蚤灶 憎蚤造凿
责燥责怎造葬贼蚤燥灶泽 燥枣 孕燥责怎造怎泽 贼则蚤糟澡燥糟葬则责葬 咱 允暂 援 酝燥造藻糟怎造葬则 耘糟燥造燥早赠袁 圆园园远袁
员缘院 员猿远苑 原 员猿苑愿
咱圆怨暂摇 再怎 杂 宰袁 蕴蚤葬燥 云 载袁 宰葬灶早 云 晕袁 宰藻灶 宰 宰袁 蕴蚤 允 允袁 酝藻蚤 匀 宰袁 蕴怎燥
蕴 允援 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 则蚤糟藻 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶 枣葬糟贼燥则泽 葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿 憎蚤贼澡 凿则燥怎早澡贼
贼燥造藻则葬灶糟藻 怎泽蚤灶早 贼澡藻 耘糟燥贼蚤造造蚤灶早 皂藻贼澡燥凿 咱 允暂 援 孕蕴燥杂 韵晕耘袁 圆园员圆袁 苑
渊圆冤院 藻猿园苑远缘
咱猿园暂摇 砸燥早藻则泽 悦袁 宰藻灶 允 匝袁 悦澡藻灶 砸 允袁 韵造凿则燥赠凿 郧援 阅藻造藻贼蚤燥灶鄄遭葬泽藻凿 则藻增藻则泽藻
早藻灶藻贼蚤糟泽 蚤灶 酝藻凿蚤糟葬早燥 贼则怎灶糟葬贼怎造葬 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园园怨袁 员缘员
渊猿冤院 员园苑苑 原 员园愿远
咱猿员暂摇 云蚤贼扎早藻则葬造凿 栽 蕴袁 运葬扎葬灶 运袁 蕴蚤 在袁 酝燥则藻造造 酝 运袁 酝葬灶灶藻则泽 允 酝援 粤 澡蚤早澡鄄
贼澡则燥怎早澡责怎贼 皂藻贼澡燥凿 枣燥则 贼澡藻 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 澡燥皂燥造燥早燥怎泽 早藻灶藻 凿藻造藻贼蚤燥灶泽 蚤灶
澡藻曾葬责造燥蚤凿 憎澡藻葬贼 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园员园袁 员园院 圆远源
咱猿圆暂摇 运则赠泽葬灶 孕允援 陨糟藻鄄糟葬责院 葬 澡蚤早澡鄄贼澡则燥怎早澡责怎贼 皂藻贼澡燥凿 枣燥则 糟葬责贼怎则蚤灶早 责造葬灶贼
贼蚤泽泽怎藻 泽葬皂责造藻泽 枣燥则 早藻灶燥贼赠责藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园园源袁
员猿缘渊猿冤院 员员远圆 原 员员远怨
咱猿猿暂摇 悦造葬则噪 运 粤袁 运则赠泽葬灶 孕 允援 孕则燥贼燥糟燥造院 葬灶 蚤皂责则燥增藻凿 澡蚤早澡鄄贼澡则燥怎早澡责怎贼
皂藻贼澡燥凿 枣燥则 早藻灶藻则葬贼蚤灶早 贼蚤泽泽怎藻 泽葬皂责造藻泽 蚤灶 怨远 原 憎藻造造 枣燥则皂葬贼 枣燥则 责造葬灶贼
早藻灶燥贼赠责蚤灶早 渊陨糟藻鄄悦葬责 圆郾 园冤 咱允暂 援 孕造葬灶贼 酝藻贼澡燥凿泽袁 圆园园苑袁 猿院 愿
咱猿源暂摇 酝葬则贼侏灶 月袁 砸葬皂蚤则燥 酝袁 酝葬则贼侏灶藻扎鄄在葬责葬贼藻则 允 酝袁 粤造燥灶泽燥鄄月造葬灶糟燥 悦援 粤
澡蚤早澡鄄凿藻灶泽蚤贼赠 糟燥造造藻糟贼蚤燥灶 燥枣 耘酝杂鄄蚤灶凿怎糟藻凿 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 枣燥则 栽陨蕴蕴陨晕郧 蚤灶
蕴葬灶凿泽遭藻则早 藻则藻糟贼葬 早藻灶藻贼蚤糟 遭葬糟噪早则燥怎灶凿 燥枣 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼
月蚤燥造燥早赠袁 圆园园怨袁 怨院 员源苑
咱猿缘暂摇 栽泽葬蚤 匀袁 酝蚤泽泽蚤则蚤葬灶 灾袁 晕早燥 运 允袁 栽则葬灶 砸 运袁 悦澡葬灶 杂 砸袁 灾葬灶噪葬贼藻泽葬灶
杂袁 悦燥皂葬蚤 蕴援 孕则燥凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 葬 澡蚤早澡 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 栽陨蕴蕴陨晕郧 责燥责怎造葬贼蚤燥灶
贼澡则燥怎早澡 责燥造赠责造燥蚤凿蚤扎葬贼蚤燥灶 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园员猿袁 员远员 渊源冤院
员远园源 原 员远员源
咱猿远暂摇 哉葬怎赠 悦袁 孕葬则葬蚤泽燥 云袁 悦燥造葬泽怎燥灶灶燥 孕袁 栽则葬灶 砸 运袁 栽泽葬蚤 匀袁 月藻则葬则凿蚤 杂袁
悦燥皂葬蚤 蕴袁 阅怎遭糟燥增泽噪赠 允援 粤 皂燥凿蚤枣蚤藻凿 栽陨蕴蕴陨晕郧 葬责责则燥葬糟澡 贼燥 凿藻贼藻糟贼
蚤灶凿怎糟藻凿 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 葬灶凿 澡藻曾葬责造燥蚤凿 憎澡藻葬贼 咱 允暂 援 月酝悦
孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园怨袁 怨院 员员缘
咱猿苑暂摇 阅怎遭糟燥增泽噪赠 允袁 悦澡藻灶 粤袁 蕴蚤 悦 载援 哉泽藻 燥枣 栽陨蕴蕴陨晕郧 皂怎贼葬灶贼泽 贼燥 凿蚤泽泽藻糟贼
贼澡藻 憎澡藻葬贼 枣造燥憎藻则蚤灶早 责葬贼澡憎葬赠 咱悦暂 辕 辕 孕造葬灶贼 葬灶凿 粤灶蚤皂葬造 郧藻灶燥皂藻袁 杂葬灶
阅蚤藻早燥袁 圆园员猿院 憎猿怨愿
咱猿愿暂摇 砸葬憎葬贼 晕袁 杂藻澡早葬造 杂 运袁 允燥泽澡蚤 粤袁 砸燥贼澡藻 晕袁 宰蚤造泽燥灶 阅 蕴袁 酝糟郧则葬憎 晕袁
灾葬凿造葬灶蚤 孕 灾袁 蕴蚤 宰袁 郧蚤造造 月 杂援 粤 凿蚤责造燥蚤凿 憎澡藻葬贼 栽陨蕴蕴陨晕郧 则藻泽燥怎则糟藻 枣燥则
憎澡藻葬贼 枣怎灶糟贼蚤燥灶葬造 早藻灶燥皂蚤糟泽 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园员圆袁 员圆院 圆园缘
咱猿怨暂摇 悦澡藻灶 蕴袁 匀怎葬灶早 蕴袁 酝蚤灶 阅袁 孕澡蚤造造蚤责泽 粤袁 宰葬灶早 杂袁 酝葬凿早憎蚤糟噪 孕 允袁
孕葬则则赠 酝 粤 允袁 匀怎 再 郧援 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬灶凿 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 葬 灶藻憎
栽陨蕴蕴陨晕郧 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 燥枣 糟燥皂皂燥灶 遭则藻葬凿 憎澡藻葬贼 渊栽则蚤贼蚤糟怎皂 葬藻泽贼蚤增怎皂 蕴援 冤
咱允暂 援 孕蕴燥杂 韵晕耘袁 圆园员圆袁 苑渊苑冤院 藻源员缘苑园
咱源园暂摇 栽蚤造造 月 允袁 悦燥燥责藻则 允袁 栽葬蚤 栽 匀袁 悦燥造燥憎蚤贼 孕袁 郧则藻藻灶藻 耘 粤袁 匀藻灶蚤噪燥枣枣 杂袁
悦燥皂葬蚤 悦援 阅蚤泽糟燥增藻则赠 燥枣 糟澡藻皂蚤糟葬造造赠 蚤灶凿怎糟藻凿 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶 则蚤糟藻 遭赠
栽陨蕴蕴陨晕郧 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园苑袁 苑院 员怨
咱源员暂摇 杂怎扎怎噪蚤 栽袁 耘蚤早怎糟澡蚤 酝袁 运怎皂葬皂葬则怎 栽袁 杂葬贼燥澡 匀袁 酝葬贼泽怎泽葬噪葬 匀袁
酝燥则蚤早怎糟澡蚤 运袁 晕葬早葬贼燥 再袁 运怎则葬贼葬 晕援 酝晕哉鄄蚤灶凿怎糟藻凿 皂怎贼葬灶贼 责燥燥造泽 葬灶凿
员猿圆
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
澡蚤早澡 责藻则枣燥则皂葬灶糟藻 栽陨蕴蕴陨晕郧 藻灶葬遭造藻 枣蚤灶凿蚤灶早 燥枣 葬灶赠 早藻灶藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 蚤灶
则蚤糟藻 咱允暂 援 酝燥造藻糟怎造葬则 郧藻灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 郧藻灶燥皂蚤糟泽袁 圆园园愿袁圆苑怨渊猿冤院 圆员猿 原
圆圆猿
咱源圆暂摇 悦澡怎灶 允 月袁 匀葬 月袁 允葬灶早 阅袁 杂燥灶早 酝袁 蕴藻藻 运 允袁 运蚤皂 允袁 运蚤皂 杂 匀袁
运葬灶早 杂袁 蕴藻藻 郧袁 杂藻燥 再 宰袁 运蚤皂 阅 杂援 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶
韵粤杂粤员 早藻灶藻 枣则燥皂 葬 早葬皂皂葬鄄蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 则蚤糟藻 皂怎贼葬灶贼 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 咱 允暂 援
孕造葬灶贼 月则藻藻凿蚤灶早袁 圆园员圆袁 员猿员渊圆冤院 圆苑远 原 圆愿员
咱源猿暂摇 月造燥皂泽贼藻凿贼 悦 运袁 郧造藻葬凿燥憎 砸 酝援 粤 糟燥皂遭蚤灶藻凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 泽糟则藻藻灶 葬灶凿
栽陨蕴蕴陨晕郧 葬责责则燥葬糟澡 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻泽 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶 杂燥则早澡怎皂 遭蚤糟燥造燥则 蕴援
酝燥藻灶糟澡 则藻泽怎造贼蚤灶早 蚤灶 葬糟赠葬灶燥早藻灶蚤糟 枣燥则葬早藻 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 咱 允 暂 援 孕造葬灶贼
月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园员圆袁 员园渊员冤院缘源 原 缘远
咱源源暂摇 栽蚤造造 月 允袁 砸藻赠灶燥造凿泽 杂 匀袁 宰藻蚤造 悦袁 杂责则蚤灶早藻则 晕袁 月怎则贼灶藻则 悦袁 再燥怎灶早 运袁
月燥憎藻则泽 耘袁 悦燥凿燥皂燥 悦 粤袁 耘灶灶泽 蕴 悦袁 韵凿凿藻灶 粤 砸袁 郧则藻藻灶藻 耘 粤袁
悦燥皂葬蚤 蕴袁 匀藻灶蚤噪燥枣枣 杂援 阅蚤泽糟燥增藻则赠 燥枣 蚤灶凿怎糟藻凿 责燥蚤灶贼 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶 皂葬蚤扎藻
早藻灶藻泽 遭赠 栽陨蕴蕴陨晕郧 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园源袁 源院 员圆
咱源缘暂摇 月燥增蚤灶葬 砸袁 栽葬造葬皂藻 灾袁 杂蚤造增蚤燥 杂袁 杂葬灶早怎蚤灶藻贼蚤 酝 悦袁 栽则燥泽贼 孕袁 杂责葬则造葬 云袁
栽怎遭藻则燥泽葬 砸援 杂贼葬则糟澡 皂藻贼葬遭燥造蚤泽皂 皂怎贼葬灶贼泽 蚤灶 遭葬则造藻赠院 粤 栽陨蕴蕴陨晕郧
葬责责则燥葬糟澡 咱 允 暂 援 孕造葬灶贼 郧藻灶藻贼蚤糟 砸藻泽燥怎则糟藻泽院 悦澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 葬灶凿
哉贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶袁 圆园员员袁 怨渊圆冤院 员苑园 原 员苑猿
咱源远暂摇 悦燥燥责藻则 允 蕴袁 栽蚤造造 月 允袁 蕴葬责燥则贼 砸 郧援 栽陨蕴蕴陨晕郧 贼燥 凿藻贼藻糟贼 蚤灶凿怎糟藻凿
皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶 泽燥赠遭藻葬灶 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园怨袁 愿院怨
咱源苑暂摇 匀燥泽澡蚤灶燥 栽袁 栽葬噪葬早蚤 再袁 粤灶葬蚤 栽援 晕燥增藻造 郧皂云粤阅圆 原 员遭 皂怎贼葬灶贼 葬造造藻造藻泽
糟则藻葬贼藻凿 遭赠 则藻增藻则泽藻 早藻灶藻贼蚤糟泽 蚤灶凿怎糟藻 皂葬则噪藻凿 藻造藻增葬贼蚤燥灶 燥枣 燥造藻蚤糟 葬糟蚤凿
糟燥灶贼藻灶贼 蚤灶 泽燥赠遭藻葬灶 泽藻藻凿泽 蚤灶 糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 郧皂云粤阅圆 原 员葬 皂怎贼葬灶贼
葬造造藻造藻泽 咱允暂 援 月则藻藻凿蚤灶早 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园员园袁 远园渊源冤院 源员怨 原 源圆缘
咱源愿暂摇 蕴蚤怎 杂袁 运葬灶凿燥贼澡 孕 运袁 宰葬则则藻灶 杂 阅袁 再藻糟噪藻造 郧袁 匀藻蚤灶扎 砸袁 粤造凿藻灶 允袁
再葬灶早 悦袁 允葬皂葬蚤 粤袁 耘造鄄酝藻造造燥怎噪蚤 栽袁 允怎增葬造藻 孕 杂袁 匀蚤造造 允袁 月葬怎皂 栽 允袁
悦蚤葬灶扎蚤燥 杂袁 宰澡蚤贼澡葬皂 杂 粤袁 运燥则噪蚤灶 阅袁 酝蚤贼糟澡怎皂 酝 郧袁 酝藻噪泽藻皂 运援 粤
泽燥赠遭藻葬灶 糟赠泽贼 灶藻皂葬贼燥凿藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 早藻灶藻 责燥蚤灶贼泽 贼燥 葬 灶藻憎 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣
责造葬灶贼 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 贼燥 责葬贼澡燥早藻灶泽 咱允暂 援 晕葬贼怎则藻袁 圆园员圆袁 源怨圆渊苑源圆愿冤院 圆缘远
原 圆远园
咱源怨暂摇 运灶燥造造 允 耘袁 砸葬皂燥泽 酝 蕴袁 在藻灶早 再袁 匀燥造遭则燥燥噪 悦袁 悦澡燥憎 酝袁 悦澡藻灶 杂袁
酝葬造藻噪蚤 杂袁 月澡葬贼贼葬糟澡葬则赠葬 粤袁 韵扎蚤葬泽鄄粤噪蚤灶泽 孕援 栽陨蕴蕴陨晕郧 枣燥则 葬造造藻则早藻灶
则藻凿怎糟贼蚤燥灶 葬灶凿 蚤皂责则燥增藻皂藻灶贼 燥枣 择怎葬造蚤贼赠 贼则葬蚤贼泽 蚤灶 责藻葬灶怎贼 渊 粤则葬糟澡蚤泽
澡赠责燥早葬藻葬 蕴援 冤 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园员员袁 员员院 愿员
咱缘园暂摇 匀葬则造燥枣枣 匀袁 蕴藻皂糟噪藻 杂袁 酝蚤贼贼葬泽糟澡 允袁 云则燥造燥增 粤袁 宰怎 允 郧袁 阅则藻赠藻则 云袁
蕴藻糟噪遭葬灶凿 郧袁 允怎灶早 悦援 粤 皂怎贼葬贼蚤燥灶 泽糟则藻藻灶蚤灶早 责造葬贼枣燥则皂 枣燥则 则葬责藻泽藻藻凿
渊月则葬泽泽蚤糟葬 灶葬责怎泽 蕴援 冤 葬灶凿 贼澡藻 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 泽蚤灶葬责蚤灶藻 遭蚤燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽
皂怎贼葬灶贼泽 咱 允暂 援 栽澡藻燥则藻贼蚤糟葬造 葬灶凿 粤责责造蚤藻凿 郧藻灶藻贼蚤糟袁 圆园员圆袁 员圆源 渊缘冤院
怨缘苑 原 怨远怨
咱缘员暂摇 酝蚤灶燥蚤葬 杂袁 孕藻贼则燥扎扎葬 粤袁 韵灶燥枣则蚤燥 韵 阅袁 孕蚤则燥灶 云袁 酝燥泽糟葬 郧袁 杂燥扎蚤燥 郧袁
悦藻造造蚤灶蚤 云袁 月藻灶凿葬澡皂葬灶藻 粤袁 悦葬则则蚤藻则燥 云援 粤 灶藻憎 皂怎贼葬灶贼 早藻灶藻贼蚤糟
则藻泽燥怎则糟藻 枣燥则 贼燥皂葬贼燥 糟则燥责 蚤皂责则燥增藻皂藻灶贼 遭赠 栽陨蕴蕴陨晕郧 贼藻糟澡灶燥造燥早赠 咱 允暂 援
月酝悦 砸藻泽藻葬则糟澡 晕燥贼藻泽 袁 圆园员园袁 猿院 远怨
咱缘圆暂摇 韵噪葬遭藻 再袁 粤泽葬皂蚤扎怎 耘袁 杂葬蚤贼燥 栽袁 酝葬贼泽怎噪怎则葬 悦袁 粤则蚤蚤扎怎皂蚤 栽袁 月则藻脏泽 悦袁
砸燥贼澡葬灶 悦袁 酝蚤扎燥早怎糟澡蚤 栽袁 耘扎怎则葬 匀援 栽燥皂葬贼燥 栽陨蕴蕴陨晕郧 贼藻糟澡灶燥造燥早赠院
凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 葬 则藻增藻则泽藻 早藻灶藻贼蚤糟泽 贼燥燥造 枣燥则 贼澡藻 藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣
皂怎贼葬灶贼泽 枣则燥皂 皂蚤糟则燥鄄贼燥皂 皂怎贼葬灶贼 造蚤遭则葬则蚤藻泽 咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁
圆园员员袁 缘圆渊员员冤院 员怨怨源 原 圆园园缘
咱缘猿暂摇 砸藻凿凿赠 栽 灾袁 阅憎蚤增藻凿蚤 杂袁 杂澡葬则皂葬 晕 运援 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 栽陨蕴蕴陨晕郧 遭赠
泽藻择怎藻灶糟蚤灶早 责造葬贼枣燥则皂 贼燥憎葬则凿泽 藻灶澡葬灶糟藻凿 造藻葬枣 赠蚤藻造凿 蚤灶 贼燥遭葬糟糟燥 咱 允暂 援
陨灶凿怎泽贼则蚤葬造 悦则燥责泽 葬灶凿 孕则燥凿怎糟贼泽袁 圆园员圆袁 源园院 猿圆源 原 猿猿缘
咱缘源暂摇 允葬灶噪燥憎蚤糟扎 原 悦蚤藻泽造葬噪 允袁 匀怎赠灶澡 韵 粤袁 月则燥扎赠灶泽噪葬 酝袁 晕葬噪蚤贼葬灶凿憎藻 允袁
栽蚤造造 月 允援 陨灶凿怎糟贼蚤燥灶袁 则葬责蚤凿 枣蚤曾葬贼蚤燥灶 葬灶凿 则藻贼藻灶贼蚤燥灶 燥枣 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶
增藻早藻贼葬贼蚤增藻造赠 责则燥责葬早葬贼藻凿 遭葬灶葬灶葬 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 允燥怎则灶葬造袁
圆园员圆袁 员园渊怨冤院 员园缘远 原 员园远远
咱缘缘暂摇 郧则藻藻灶藻 耘 粤袁 悦燥凿燥皂燥 悦 粤袁 栽葬赠造燥则 晕 耘袁 匀藻灶蚤噪燥枣枣 允 郧袁 栽蚤造造 月 允袁
砸藻赠灶燥造凿泽 杂 匀袁 耘灶灶泽 蕴 悦袁 月怎则贼灶藻则 悦袁 允燥澡灶泽燥灶 允 耘袁 韵凿凿藻灶 粤 砸援
杂责藻糟贼则怎皂 燥枣 糟澡藻皂蚤糟葬造造赠 蚤灶凿怎糟藻凿 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 枣则燥皂 葬 造葬则早藻鄄泽糟葬造藻
则藻增藻则泽藻早藻灶藻贼蚤糟 泽糟则藻藻灶 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 咱 允暂 援 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 圆园园猿袁 员远源
渊圆冤院 苑猿员 原 苑源园
咱缘远暂摇 栽蚤造造 月 允袁 砸藻赠灶燥造凿泽 杂 匀袁 郧则藻藻灶藻 耘 粤袁 悦燥凿燥皂燥 悦 粤袁 耘灶灶泽 蕴 悦袁
允燥澡灶泽燥灶 允 耘袁 月怎则贼灶藻则 悦袁 韵凿凿藻灶 粤 砸袁 再燥怎灶早 运袁 栽葬赠造燥则 晕 耘袁
匀藻灶蚤噪燥枣枣 允 郧袁 悦燥皂葬蚤 蕴袁 匀藻灶蚤噪燥枣枣 杂援 蕴葬则早藻鄄泽糟葬造藻 凿蚤泽糟燥增藻则赠 燥枣
蚤灶凿怎糟藻凿 责燥蚤灶贼 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 憎蚤贼澡 澡蚤早澡鄄贼澡则燥怎早澡责怎贼 栽陨蕴蕴陨晕郧 咱 允 暂 援
郧藻灶燥皂藻 砸藻泽藻葬则糟澡袁 圆园园猿袁 员猿渊猿冤院 缘圆源 原 缘猿园
咱缘苑暂摇 载蚤灶 在袁 宰葬灶早 酝 蕴袁 月葬则噪造藻赠 晕 粤袁 月怎则燥憎 郧袁 云则葬灶噪泽 悦袁 孕藻凿藻则泽燥灶 郧袁
月怎则噪藻 允援 粤责责造赠蚤灶早 早藻灶燥贼赠责蚤灶早 渊栽陨蕴蕴陨晕郧冤 葬灶凿 责澡藻灶燥贼赠责蚤灶早 葬灶葬造赠泽藻泽
贼燥 藻造怎糟蚤凿葬贼藻 早藻灶藻 枣怎灶糟贼蚤燥灶 蚤灶 葬 糟澡藻皂蚤糟葬造造赠 蚤灶凿怎糟藻凿 泽燥则早澡怎皂 皂怎贼葬灶贼
责燥责怎造葬贼蚤燥灶 咱允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园愿袁 愿院 员园猿
咱缘愿暂摇 陨遭蚤扎葬 灾 孕袁 悦葬觡蚤扎葬则藻泽 允袁 晕怎藻扎 云援 耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧 蚤灶 悦葬责泽蚤糟怎皂 泽责藻糟蚤藻泽院
泽藻葬则糟澡蚤灶早 枣燥则 灶藻憎 增蚤则怎泽 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻泽 咱允暂 援 月酝悦 郧藻灶燥皂蚤糟泽袁 圆园员园袁 员员院
远猿员
咱缘怨暂摇 宰葬灶早 阅 运袁 杂怎灶 在 载袁 栽葬燥 再 在援 粤责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 栽陨蕴蕴陨晕郧 蚤灶 责造葬灶贼
蚤皂责则燥增藻皂藻灶贼 咱允暂 援 粤糟贼葬 郧藻灶藻贼蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁 圆园园远袁 猿猿 渊员员冤院怨缘苑 原 怨远源
圆猿圆
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员源袁圆愿渊圆冤院园圆圆源 耀 园圆猿猿
栽澡藻 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 栽陨蕴蕴陨晕郧 栽藻糟澡灶蚤择怎藻 葬灶凿 蚤贼泽 粤责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 蚤灶 孕造葬灶贼泽
再粤晕 在澡蚤鄄澡怎蚤员 摇 郧哉韵 匀怎蚤鄄躁怎灶员 摇 载哉 砸燥灶早鄄择蚤圆 摇 蕴陨哉 蕴怎鄄曾蚤葬灶早员
渊员晕葬贼蚤燥灶葬造 悦藻灶贼藻则 燥枣 杂责葬糟藻 酝怎贼葬早藻灶藻泽蚤泽 枣燥则 悦则燥责 陨皂责则燥增藻皂藻灶贼 辕 晕葬贼蚤燥灶葬造 运藻赠 云葬糟蚤造蚤贼赠 枣燥则 悦则燥责 郧藻灶藻 砸藻泽燥怎则糟藻泽 葬灶凿 郧藻灶藻贼蚤糟 陨皂责则燥增藻皂藻灶贼 辕
陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 悦则燥责 杂糟蚤藻灶糟藻袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园园愿员曰圆 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣
粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园园愿员冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽陨蕴蕴陨晕郧 渊栽葬则早藻贼蚤灶早 陨灶凿怎糟藻凿 蕴燥糟葬造 蕴藻泽蚤燥灶泽 陨晕 郧藻灶燥皂藻泽冤 责造葬贼枣燥则皂 澡葬泽 遭藻藻灶 凿藻增藻造燥责藻凿 葬灶凿 葬责责造蚤藻凿 枣燥则 责燥蚤灶贼
皂怎贼葬贼蚤燥灶 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 早藻灶藻 枣怎灶糟贼蚤燥灶 葬灶葬造赠泽蚤泽 蚤灶 责造葬灶贼泽 枣燥则 皂燥则藻 贼澡葬灶 贼藻灶 赠藻葬则泽援 灾葬则蚤燥怎泽 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿泽 枣燥则 贼澡蚤泽
责造葬贼枣燥则皂袁 泽怎糟澡 葬泽 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早袁 糟葬责蚤造造葬则赠 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 葬灶凿 澡蚤早澡 则藻泽燥造怎贼蚤燥灶 皂藻造贼蚤灶早 葬灶葬造赠泽蚤泽袁 澡葬增藻 遭藻藻灶 怎泽藻凿 蚤灶 皂葬灶赠
则藻泽藻葬则糟澡藻泽援 陨灶 贼澡藻 泽葬皂藻 贼蚤皂藻袁 耘糟燥栽陨蕴蕴陨晕郧袁 阅藻栽陨蕴蕴陨晕郧 葬灶凿 蚤栽陨蕴蕴陨晕郧 澡葬增藻 遭藻藻灶 葬责责造蚤藻凿 蚤灶 灶葬贼怎则藻 责燥责怎造葬贼蚤燥灶泽 葬灶凿
责澡赠泽蚤糟葬造 皂怎贼葬早藻灶蚤扎藻凿 责燥责怎造葬贼蚤燥灶泽援 陨灶 贼澡蚤泽 责葬责藻则袁 贼澡藻 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿泽 葬灶凿 则藻造葬贼藻凿 遭蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽 泽燥枣贼憎葬则藻泽 枣燥则 栽陨蕴蕴陨晕郧
责造葬贼枣燥则皂 憎藻则藻 蚤灶贼则燥凿怎糟藻凿袁 葬灶凿 贼澡藻 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶泽 葬灶凿 则藻泽藻葬则糟澡 责则燥早则藻泽泽藻泽 蚤灶 皂燥凿藻造 责造葬灶贼泽袁 糟藻则藻葬造 糟则燥责泽袁 燥蚤造 糟则燥责泽袁
增藻早藻贼葬遭造藻泽 葬灶凿 泽燥皂藻 增藻早藻贼葬贼蚤增藻造赠 责则燥责葬早葬贼藻凿 责造葬灶贼泽 憎藻则藻 则藻增蚤藻憎藻凿援
运藻赠 憎燥则凿泽院孕造葬灶贼泽曰 栽陨蕴蕴陨晕郧曰 悦澡藻皂蚤糟葬造 酝怎贼葬早藻灶藻泽蚤泽曰 孕燥蚤灶贼 酝怎贼葬贼蚤燥灶泽
猿猿圆