全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊远冤院园愿怨源 耀 园愿怨怨
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员员鄄员员鄄园愿摇 接受日期院圆园员圆鄄园缘鄄园愿
基金项目院农业部公益性行业科研专项要核技术农业应用渊圆园员员园猿园园苑冤袁国家自然科学基金面上项目渊圆园怨苑苑园苑远冤
作者简介院岳摇 龙渊员怨愿苑鄄冤袁男袁湖南益阳人袁硕士研究生袁 研究方向为环境生物物理学和生物能源遥 栽藻造院园缘苑员鄄愿远怨苑员源圆猿曰耘鄄皂葬蚤造院圆员源责葬灶岳 员远猿援
糟燥皂
通讯作者院叶庆富渊员怨远猿鄄冤袁男袁浙江开化人袁博士生导师袁研究方向为核技术农业应用尧环境生物物理学尧农药作用机理与环境行为遥 栽藻造院园缘苑员鄄
愿远怨苑员源圆猿曰耘鄄皂葬蚤造院 择枣赠藻岳 扎躁怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园远鄄园愿怨源鄄园远
栅藻的优化培养及脂质提取方法研究
岳摇 龙摇 付秋果摇 张素芬摇 王摇 伟摇 汪海燕摇 叶庆富
渊浙江大学原子核农业科学研究所 辕农业部核农学重点实验室袁浙江 杭州摇 猿员园园圆怨冤
摘摇 要院能源危机引发人们对可再生生物能源的广泛关注遥 本文以潜在能源栅藻为对象袁采用不同 责匀尧
不同 酝试剂浓度的改良 月郧员员 培养基对其培养条件进行优化袁并利用超声波提取尧振荡提取和索氏提取
法结合不同试剂对其脂质提取效率进行比较研究遥 结果表明袁栅藻在偏碱性环境中生长较好袁在改良
月郧员员 培养基中培养 猿园凿袁其生物量尧脂质总量和脂质产率分别为对照组渊普通 月郧员员 培养基冤的 苑郾 愿 倍尧
猿郾 愿 倍和 猿郾 怨 倍曰栅藻经真空冷冻干燥后袁用石油醚超声提取袁细胞内脂质提取效率最高渊脂质含量为
圆苑豫 冤袁与常规的氯仿 辕甲醇法相比袁其得到的脂质含量提高 愿豫 遥 进一步研究证实袁脂质提取效率相对
较高的 源 种方法均采用超声波提取袁表明超声波提取是一种行之有效的脂质提取方法遥
关键词院栅藻曰生物柴油曰培养条件优化曰脂质提取
韵孕栽陨酝陨在粤栽陨韵晕 韵云 悦哉蕴栽哉砸耘 悦韵晕阅陨栽陨韵晕杂 粤晕阅 蕴陨孕陨阅
耘载栽砸粤悦栽陨韵晕 酝耘栽匀韵阅杂 韵云 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 杂孕援
再哉耘 蕴燥灶早摇 云哉 匝蚤怎鄄早怎燥摇 在匀粤晕郧 杂怎鄄枣藻灶摇 宰粤晕郧 宰藻蚤摇 宰粤晕郧 匀葬蚤鄄赠葬灶摇 再耘 匝蚤灶早鄄枣怎
渊 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 晕怎糟造藻葬则鄄粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻 辕 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 晕怎糟造藻葬则鄄粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻袁 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻袁
在澡藻躁蚤葬灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 匀葬灶早扎澡燥怎袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员园园圆怨冤
粤遭泽贼则葬糟贼院月蚤燥枣怎藻造泽 凿则葬憎 蚤灶糟则藻葬泽蚤灶早 责怎遭造蚤糟 葬贼贼藻灶贼蚤燥灶 遭藻糟葬怎泽藻 燥枣 贼澡藻 藻灶藻则早赠 糟则蚤泽蚤泽援 陨灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠袁 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 责匀 葬灶凿 酝
则藻葬早藻灶贼 燥灶 早则燥憎贼澡 燥枣 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援 憎葬泽 泽贼怎凿蚤藻凿 葬灶凿 贼澡藻 造蚤责蚤凿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 燥枣 增葬则蚤燥怎泽 皂藻贼澡燥凿泽袁 蚤灶糟造怎凿蚤灶早
怎造贼则葬泽燥怎灶凿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶袁 泽澡葬噪蚤灶早 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 葬灶凿 杂燥曾澡造藻贼 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 憎葬泽 糟燥皂责葬则藻凿援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援
早则藻憎 遭藻贼贼藻则 怎灶凿藻则 葬造噪葬造蚤灶藻 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽 葬灶凿 蚤贼泽 早则燥憎贼澡 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶 葬灶凿 造蚤责蚤凿 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 糟燥怎造凿 遭藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 蚤皂责则燥增藻凿 蚤灶 贼澡藻
皂燥凿蚤枣蚤藻凿 月郧 员员 皂藻凿蚤怎皂援 粤枣贼藻则 猿园凿袁 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援 蚤灶 皂燥凿蚤枣蚤藻凿 月郧 员员 皂藻凿蚤怎皂 责藻则枣燥则皂藻凿 葬 澡蚤早澡藻则 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣
遭蚤燥皂葬泽泽袁 造蚤责蚤凿 葬灶凿 造蚤责蚤凿 责则燥凿怎糟贼蚤增蚤贼赠袁 憎澡蚤糟澡 憎葬泽 苑郾 愿 贼蚤皂藻泽袁 猿郾 愿 贼蚤皂藻泽 葬灶凿 猿郾 怨 贼蚤皂藻泽 燥枣 贼澡葬贼 燥枣 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 早则燥怎责援 陨贼 憎葬泽
葬造泽燥 泽澡燥憎灶 贼澡葬贼 贼澡藻 怎造贼则葬泽燥怎灶凿鄄葬泽泽蚤泽贼藻凿 责藻贼则燥造藻怎皂 藻贼澡藻则 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 糟燥怎责造藻凿 憎蚤贼澡 增葬糟怎怎皂 枣则藻藻扎藻鄄凿则赠蚤灶早 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽
贼澡藻 燥责贼蚤皂怎皂 造蚤责蚤凿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿 葬皂燥灶早 贼澡藻 皂藻贼澡燥凿泽 贼藻泽贼藻凿袁 蚤灶 憎澡蚤糟澡 贼澡藻 造蚤责蚤凿 糟燥灶贼藻灶贼 憎葬泽 圆苑豫 憎澡蚤糟澡 憎葬泽 葬遭燥怎贼 愿豫
澡蚤早澡藻则 贼澡葬灶 贼澡葬贼 憎澡藻灶 怎泽蚤灶早 贼澡藻 糟澡造燥则燥枣燥则皂鄄皂藻贼澡葬灶燥造 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿援 云怎则贼澡藻则 则藻泽藻葬则糟澡 糟燥灶枣蚤则皂藻凿 贼澡葬贼 怎造贼则葬泽燥怎灶凿
藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 憎葬泽 贼澡藻 皂燥泽贼 藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 燥灶藻 葬皂燥灶早 葬造造 贼澡藻 皂藻贼澡燥凿泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援 曰 遭蚤燥凿蚤藻泽藻造曰 皂藻凿蚤怎皂 皂燥凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶曰 燥责贼蚤皂蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 造蚤责蚤凿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶
摇 摇 化石燃料资源日益枯竭并造成严重的环境污染问
题袁引发人们对其他清洁能源的广泛关注咱员暂 遥 生物柴
油因化学性质及其各项燃烧性能指标与柴油相近而成
为目前国内外研究热点遥 生物柴油是以生物油脂为原
源怨愿
摇 远 期 栅藻的优化培养及脂质提取方法研究
料袁通过分解尧转酯化等过程形成长链脂肪酸甲酯袁用
于替代普通柴油咱圆暂 遥 目前世界各国大多利用动物脂
肪尧作物和微藻等生物质原料生产生物柴油咱猿暂 袁其中
利用微藻生产生物柴油具有周期短尧不与农作物争耕
地尧不受气候条件限制等诸多优势袁因而具有较好的应
用前景咱源暂 遥 利用微藻生产生物柴油主要包括高油脂
藻种的筛选及高效培养尧脂质的高效提取及脂质的转
酯化等过程咱缘暂 遥
栅藻是迄今已知的高油脂藻种之一遥 然而袁采用
现有的 月郧 员员 培养基培养袁该藻生长缓慢袁导致生产成
本高袁难以大规模推广应用遥 探索栅藻的高效培养方
法和提高脂质提取效率已成为当前研究重点遥 刘世名
和 杂贼则藻藻贼等咱远袁苑暂研究了外源添加葡萄糖和乙醇等对小
球藻生长的影响袁结果表明外源添加物能够促进小球
藻的生长遥 然而有关外源添加物对栅藻生长及其脂质
积累的影响方面的研究目前鲜见报道遥 目前有关脂质
提取方法的报道较多袁如氯仿 辕甲醇法咱愿袁 怨暂 尧索氏提取
法和超临界萃取法等咱员园袁 员员暂 袁但现有方法仍存在一定局
限性袁如氯仿 辕甲醇法尽管提取效率相对较高袁却存在
对人体和环境具较大危害的缺陷曰索氏抽提法则相对
耗时尧有机溶剂用量大袁不适合热不稳定性物质的提
取曰而目前常用的超临界二氧化碳流体萃取法对于亲
水性尧相对分子质量较大的物质的提取效率偏低咱员圆暂 遥
同时袁已报道的其他脂质提取方法提取效率也存在较
大差异遥 悦则葬增燥贼贼燥等咱员猿暂利用超声波和微波对大豆等植
物和微藻油脂的提取进行试验并取得较好的结果袁但
宰蚤凿躁葬躁葬等咱员源暂研究表明超声波对小球藻脂质的提取并
无显著影响遥 鉴于适合栅藻等微藻的脂质提取方法并
未统一袁探索并优化栅藻脂质提取方法具有重要意义遥
本文以栅藻 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援 为试材袁研究了该藻
的高效培养方法袁探讨了外源添加 酝试剂渊一种 悦圆 有
机化合物冤对该藻生长及其藻脂质提取的影响规律袁
比较了不同干燥法尧不同细胞破碎法尧不同溶剂和不同
提取过程及其复合处理的 猿园 种微藻脂质提取方法的
提取效率袁旨在建立栅藻的高效培养方法及其脂质的
高效提取方法遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
供试材料为栅藻渊杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援 冤袁如图 员 所示遥
该材料从太湖水体中筛选获得袁由蔡志强博士提供袁经
生工生物工程渊上海冤有限公司鉴定遥
图 员摇 栅藻
云蚤早援 员摇 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援
葬院锥形瓶培养图曰遭院显微镜下的细胞形态图
葬院 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援 糟怎造贼怎则藻凿 蚤灶 耘则造藻灶皂藻赠藻则 枣造葬泽噪曰遭院杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援 藻曾葬皂蚤灶藻凿 怎灶凿藻则 贼澡藻 皂蚤糟则燥泽糟燥责藻援
员郾 圆摇 栅藻优化培养试验
员郾 圆郾 员摇 栅藻培养 责匀条件优化摇 培养基 责匀分别调至
远郾 园尧苑郾 园尧愿郾 园尧怨郾 园尧员园郾 园 后袁将栅藻分别接种到装有
月郧员员 培养基的三角瓶中培养袁接种率均为 缘豫 渊灾 辕
灾冤遥 培养条件院温度 圆缘益 依 员益袁光强 圆郾 园 垣 园郾 圆 噪造曾袁
光周期 员远蕴 辕 愿凿袁设 猿 个重复遥 每隔 猿凿 取适量藻液
渊圆园园滋造冤放入 怨远 孔板中袁在酶标仪渊杂责葬糟贼则燥灶 酝葬曾 员怨园袁
德国冤上测定其 韵阅值咱员缘袁 员远暂 袁检测波长为 远愿园灶皂咱员苑暂 遥
员郾 圆郾 圆摇 栅藻培养基成分优化摇 将栅藻分别接种到装
有 圆园园皂造 月郧员员 培养基咱员愿暂及改良 月郧员员 培养基渊加入
酝试剂袁浓度为 园郾 远皂造 辕 蕴冤的 圆缘园皂造 三角瓶中培养袁接
种率均为 缘豫 渊灾 辕 灾冤袁以普通 月郧员员 培养基培养为对
照遥 各处理均设 猿 个重复遥 培养条件和 韵阅值测定条
件同 员郾 圆郾 员遥
另将供试栅藻分别接种到装有 怨缘园皂造 月郧员员 培养
基和改良 月郧员员 培养基渊责匀怨袁适宜 责匀愿 耀员园冤的三角瓶
渊员蕴冤中培养袁接种率同上遥 于培养 圆园 和 猿园凿 取藻液袁
原 愿园益下真空冷冻干燥 圆源澡袁称重袁然后用氯仿 辕甲醇
缘怨愿
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
法提取脂质并计算脂质产率遥
孕咱员怨袁 圆园暂 越 皂 辕 渊灾 伊 贼冤袁式中 孕 为脂质产率袁皂 为脂
质总重量渊早冤袁灾为藻液体积渊蕴冤袁贼为时间渊凿冤遥
将改良培养基中 酝 试剂浓度分别调至 园郾 远译尧
员郾 圆译尧员郾 愿译和 圆郾 源译袁将供试栅藻分别接种到装有
怨缘园皂造上述培养基的三角瓶渊员蕴冤中培养袁接种率同上遥
培养 员园凿尧圆园凿尧猿园凿 和 源园凿 后取藻液袁 原 愿园益下真空冷
冻干燥 圆源澡袁称重袁然后用氯仿 辕甲醇法提取脂质并测
定脂质含量袁其值为脂质总量与干燥重量的比值遥
员郾 猿摇 脂质的不同提取方法
用改良 月郧员员 培养基渊责匀怨郾 园袁适宜 责匀愿郾 园 耀 员园郾 园冤
培养栅藻袁待生长至稳定期渊圆苑凿冤袁将藻液转入离心管
后放入离心机中渊耘责责藻灶凿燥则枣 缘愿园源 砸袁德国冤袁以 圆园缘苑早
离心 缘皂蚤灶袁收集鲜藻袁用双蒸水洗涤 圆 次袁离心袁取部
分于 缘园益下烘至恒重曰另取等量鲜藻袁利用真空冷冻
干燥仪于 原 愿园益下冷冻干燥 圆源澡袁将干燥藻体分别用
超声波处理渊源园运匀扎袁猿园皂蚤灶冤尧高温高压处理渊员圆缘益尧
员郾 缘酝孕葬袁缘皂蚤灶冤和微波处理渊员员园益袁圆源缘园酝匀扎袁源皂蚤灶冤袁
并设置对照组渊未进行上述处理冤遥 在部分上述经过
处理的和对照组藻体中加入 员园皂造 不同有机试剂渊三
氯甲烷尧二氯甲烷或者石油醚袁藻体干重与试剂体积比
例为 员早 辕 缘园皂造冤袁并分别用振荡提取法 渊圆缘益袁猿园园则 辕
皂蚤灶袁 圆澡冤和超声波提取法渊圆缘益袁源园运匀扎袁圆澡冤提取脂
质袁提取液转入玻璃管中袁重复上述步骤 源 次袁直至藻
体重量变化小于 缘皂早袁剩余处理过的和对照组藻体用
索氏提取法渊员园园皂造 石油醚袁员圆澡冤提取脂质遥 所采用
猿园 种不同提取方法如表 员 所示遥
表 员摇 脂质提取方法编号
栽葬遭造藻 员摇 栽澡藻 泽藻则蚤葬造 灶怎皂遭藻则 燥枣 贼澡藻 造蚤责蚤凿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿
提取方法
藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿
破碎方法
糟则怎泽澡蚤灶早 皂藻贼澡燥凿
三氯甲烷颐甲醇渊灾 辕 灾 圆颐 员冤 二氯甲烷颐甲醇渊灾 辕 灾 圆颐 员冤 石油醚
振荡
提取
超声
提取
索氏
提取
振荡
提取
超声
提取
索氏
提取
振荡
提取
超声
提取
索氏
提取
低温烘干
凿则赠蚤灶早 怎灶凿藻则
造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻
真空冷冻干燥
增葬糟怎怎皂 枣则藻藻扎藻
凿则赠蚤灶早
超声破碎 酝员缘 要 要 酝员圆 要 要 酝猿 要 要
高温高压破碎 酝愿 要 要 酝员园 要 要 酝远 要 要
微波破碎 酝员怨 要 要 酝员愿 要 要 酝圆 要 要
未处理 酝圆员 酝圆猿 要 酝圆圆 酝圆源 要 要 酝圆苑 酝苑
超声破碎 酝员苑 要 要 酝员员 要 要 酝源 要 要
高温高压破碎 酝怨 要 要 酝员猿 要 要 酝缘 要 要
微波破碎 酝圆园 要 要 酝员远 要 要 酝员 要 要
未处理 酝圆远 酝圆怨 要 酝圆缘 酝圆愿 要 要 酝猿园 酝员源
摇 摇 除石油醚索氏提取法渊酝苑 和 酝员源冤外袁其他方法
的提取液过 园郾 源缘滋皂有机膜袁再转入浓缩管中袁用氮吹
仪吹干袁称重遥 石油醚索氏提取法咱圆员暂中袁提取液置于
旋转蒸发仪于 源园益下蒸干袁称重遥 计算各处理下的脂
质含量袁公式如下院 酝 越 皂员 辕 皂园 伊 员园园咱圆圆暂 袁式中 酝 为脂
质含量渊豫 冤袁皂员为脂质重量袁皂园为藻干重遥
员郾 源摇 数据处理
所有数据均以平均值和标准误差渊酝藻葬灶 依 杂耘酝冤
表示袁数据采用 酝蚤糟则燥泽燥枣贼 耘曾糟藻造 圆园园猿尧韵则蚤早蚤灶苑郾 缘 作图软
件和 杂粤杂软件进行统计分析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 不同 责匀对栅藻生长的影响
韵阅值越大说明栅藻生长越好袁从图 圆 可见袁栅藻
在偏碱性条件下生长较好袁其中 责匀愿郾 园 耀 员园郾 园 生长情
况相近遥 而进一步试验表明当 责匀 大于 员园郾 园 或小于
远郾 园 时袁栅藻均不能生长渊数据未列出冤袁表明栅藻最适
图 圆摇 责匀对栅藻生长的影响
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 早则燥憎贼澡 糟怎则增藻 燥枣 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援
蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责匀 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽援
责匀 为 愿 耀 员园遥 图 圆 还表明袁栅藻进入对数期时间较
短袁在培养 猿凿后就进入对数期袁培养 圆苑凿达到稳定期遥
圆郾 圆摇 不同培养基对栅藻生长的影响
图 猿 结果表明袁培养 远 耀 圆苑凿 期间袁韵阅 值增加较
快袁圆苑凿以后 韵阅值增加趋缓袁即供试栅藻生长到达了
远怨愿
摇 远 期 栅藻的优化培养及脂质提取方法研究
稳定生长期袁据此可将 圆苑凿 作为栅藻的培养周期遥 培
养 远凿后袁供试栅藻在改良培养基中的 韵阅 值远远超过
普通培养基中的对照袁圆苑凿 时前者是后者的 员园 倍袁差
异达到极显著水平渊孕 约 园郾 园员冤袁表明培养基中添加 酝
试剂能显著促进栅藻的生长遥 考虑到 酝 试剂价格较
为低廉袁对 月郧员员 培养基成本的贡献较小袁因此袁酝 试
剂可作为栅藻规模化生产的一种良好生长促进剂遥
图 猿摇 栅藻在不同培养基中的生长曲线
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 早则燥憎贼澡 糟怎则增藻 燥枣 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援
燥灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂藻凿蚤怎皂泽
由表 圆 可见袁用改良培养基培养 圆园 和 猿园凿袁栅藻
摇 摇
的生物量尧脂质总量和脂质产率均显著高于对照组袁其
中前者生物量分别为对照组的 缘郾 圆 和 苑郾 愿 倍袁脂质总
量分别为对照组的 猿 和 猿郾 愿 倍袁脂质产率分别为对照
组的 远郾 员 和 猿郾 怨 倍遥 表 圆 结果还表明袁在普通 月郧员员 培
养基的培养条件下袁与培养 圆园凿时相比袁培养 猿园凿的藻
生物量增加了 员园愿豫 袁脂质总量增加了 员园源豫 袁但脂质
含量差异不显著渊孕 跃 园郾 园缘冤曰而在改良的培养条件下袁
与 圆园凿时相比袁培养 猿园凿的藻生物量增加了 圆员圆豫 袁脂
质总量增加了 员缘愿豫 遥 上述结果进一步证实袁酝 试剂
能促进栅藻快速生长袁显著提高质栅藻脂质总量及产
率遥
圆郾 猿摇 不同酝试剂浓度对脂质积累的影响
酝试剂浓度对脂质积累的影响如表 猿 所示遥 从表
猿 可以看出袁粗脂含量在 酝 试剂浓度为 员郾 圆译尧员郾 愿译
和 圆郾 源译时差异不明显袁均比 园郾 远译和对照组高袁并且
随着培养时间的延长袁粗脂重量呈明显下降趋势袁说明
生长前期脂质积累较多袁生长后期可能由于营养缺乏袁
导致脂质消耗袁从而降低了藻体细胞内的脂质含量遥
特别是在培养 源园凿后袁除对照组外袁试验组粗脂含量相
比 员园凿培养期的藻体袁粗脂含量减少了 缘园豫以上遥
表 圆摇 不同培养基中栅藻的生物量尧脂质总量及产率
贼葬遭造藻 圆摇 月蚤燥皂葬泽泽袁 造蚤责蚤凿 糟燥灶贼藻灶贼泽袁葬灶凿 责则燥凿怎糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂藻凿蚤葬援
参摇 数
蚤贼藻皂
培养时间 蚤灶糟怎遭葬贼蚤燥灶 贼蚤皂藻
圆园凿 猿园凿
普通 月郧员员 培养基
月郧员员皂藻凿蚤怎皂
改良 月郧员员 培养基
皂燥凿蚤枣蚤藻凿 月郧员员 皂藻凿蚤怎皂
普通 月郧员员 培养基
月郧员员 皂藻凿蚤怎皂
改良 月郧员员 培养基
皂燥凿蚤枣蚤藻凿 月郧员员 皂藻凿蚤怎皂
生物量
遭蚤燥皂葬泽泽渊早 辕 蕴冤 园郾 园缘员愿 依 园郾 园员猿怨 园郾 圆苑园 依 园郾 园圆圆园 园郾 员园愿 依 园郾 园员圆圆 园郾 愿源猿 依 园郾 圆园愿
脂质总量
贼燥贼葬造 造蚤责蚤凿渊皂早 辕 蕴冤 员怨郾 园 依 缘郾 园缘 缘苑郾 愿 依 员郾 苑圆 猿愿郾 愿 依 园郾 愿缘园 员源怨 依 源园郾 源
脂质产率
造蚤责蚤凿 责则燥凿怎糟贼蚤增蚤贼赠 渊皂早 辕 蕴凿冤 园郾 远猿猿 依 园郾 员远愿 猿郾 愿缘 依 园郾 员员缘 员郾 圆怨 依 园郾 园圆愿园 源郾 怨苑 依 员郾 猿缘
表 猿摇 不同浓度 酝试剂培养后栅藻的脂质含量
栽葬遭造藻 猿摇 栽澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 葬凿凿蚤贼蚤燥灶 燥枣 酝 则藻葬早藻灶贼 燥灶 造蚤责蚤凿 糟燥灶贼藻灶贼泽 燥枣 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援
酝试剂浓度
糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 酝 则藻葬早藻灶贼
培养时间摇 蚤灶糟怎遭葬贼蚤燥灶 贼蚤皂藻
员园凿 圆园凿 猿园凿 源园凿
悦运渊园郾 园译冤 圆怨郾 员豫 依猿郾 园园豫 圆圆郾 圆豫 依员郾 园园豫 圆缘郾 圆豫 依员源郾 员豫 员苑郾 员豫 依员郾 园猿豫
园郾 远译 圆苑郾 园豫 依圆郾 园圆豫 员怨郾 园豫 依员郾 园员豫 员源郾 员豫 依员郾 员源豫 缘郾 园猿豫 依员郾 园缘豫
员郾 圆译 猿怨郾 园豫 依员郾 园圆豫 圆远郾 员豫 依员郾 园园豫 员愿郾 圆豫 依圆郾 园员豫 员圆郾 员豫 依圆郾 园猿豫
员郾 愿译 猿怨郾 园豫 依猿郾 园员豫 圆源郾 员豫 依员郾 园员豫 员苑郾 园豫 依员郾 园员豫 员圆郾 员豫 依员郾 园圆豫
圆郾 源译 猿怨郾 员豫 依员郾 园圆豫 圆愿郾 园豫 依圆郾 员员豫 员怨郾 园豫 依员郾 园猿豫 员缘郾 员豫 依员郾 员园豫
圆郾 源摇 不同脂质提取方法的提取效率比较
由于栅藻脂质的实际质量难以确定袁而采用添加
游离脂肪酸法也不能真实反映栅藻脂质的实际提取效
率遥 因此袁本文以不同脂质提取方法所获得的脂质含
量作参照指标袁以进行脂质提取效率比较遥 本试验采
用的 猿园 种不同方法所获得脂质含量结果如图 源 所示遥
从图 源 中不难看出袁脂质提取效率呈现出 酝猿园 跃 酝圆苑
耀 酝圆怨 跃 酝圆缘 耀 酝圆远 跃 酝圆猿 耀 酝圆源 跃 酝员圆 耀 酝圆圆 跃 酝员 耀
苑怨愿
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
图 源摇 不同方法提取脂质总量比较
云蚤早援 源摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 贼澡蚤则贼赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂藻贼澡燥凿泽 枣燥则 藻枣枣藻糟贼蚤增藻 造蚤责蚤凿 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶 枣则燥皂 杂糟藻灶藻凿藻泽皂怎泽 泽责援
图中各组所标字母不同表示组间差异显著袁字母相同则表明各组之间差异不显著遥
杂澡葬则藻凿 造藻贼贼藻则泽 葬遭燥增藻 贼澡藻 遭葬则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 灶燥 泽贼葬贼蚤泽贼蚤糟葬造造赠 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻袁 憎澡藻则藻葬泽 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽
蚤灶凿蚤糟葬贼藻 贼澡葬贼 贼澡藻则藻 蚤泽 葬 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 遭藻贼憎藻藻灶 早则燥怎责泽援
酝员员 的趋势袁其中 酝猿园 脂质提取效率最高袁其提取的
脂质含量达到 圆远郾 缘豫 袁酝圆苑 耀 酝圆怨 提取的脂质含量为
员怨郾 苑豫 耀 圆员郾 源豫 袁而 酝员 耀 酝圆源 提取的脂质含量在
员缘豫以下遥
统计分析表明袁酝圆苑 耀 酝圆怨 之间袁酝圆缘 与 酝圆远袁
酝圆猿 与 酝圆源袁酝员圆 耀 酝圆圆 之间以及 酝员 耀 酝员员 之间袁其
提取脂质含量差异均不显著渊孕 跃园郾 园缘冤遥 而酝猿园 与相
对上述方法提取的脂质含量差异均达到显著水平渊孕
约园郾 园缘冤遥 综上分析袁栅藻经真空冷冻干燥后袁再利用
石油醚超声提取袁可以得到最佳的脂质提取效果袁其提
取的脂质含量比常规的氯仿 辕甲醇法约高 愿豫左右遥
图 源 结果还表明袁提取效率相对较高的 源 种方法
渊酝圆苑 耀 酝猿园冤均采用的是超声提取法袁这表明超声波
提取是一种行之有效的脂质提取方法遥 进一步分析结
果还表明袁栅藻经真空冷冻干燥后袁再采用二氯甲烷或
氯仿与甲醇的混合溶剂超声提取袁它们所得到的脂质
含量差异不显著遥 由此可见袁在脂质提取时袁用二氯甲
烷替代毒性较大的氯仿更为合理遥 研究还显示袁藻样
的不同干燥处理方法渊冷冻干燥法和烘干法冤对脂质
的提取效率也存在明显影响遥 本试验脂质提取效率相
对较高的 猿 种方法渊酝圆愿 耀 酝猿园冤均为冷冻干燥法袁说
明冷冻干燥法优于烘干法遥
研究还发现袁对藻细胞进行破碎处理后再提取脂
质袁理论上应获得更高的脂质含量袁但事实并非如此遥
如 酝员 耀 酝远 和 酝愿 耀 酝员猿袁其脂质提取效率均较低渊脂
质含量均为 员园豫以下冤遥 这与 蕴藻藻 等的研究结果咱缘暂不
一致袁主要是因为细胞破碎处理时往往在水溶液条件
下进行袁由于水分的存在影响了石油醚尧氯仿和二氯甲
烷等强疏性有机试剂与藻体的充分接触和渗透袁从而
降低了这类有机试剂对藻体脂质的提取能力遥
猿摇 结论
员冤栅藻适于在碱性环境渊责匀愿郾 园 耀 员园郾 园冤中生长袁
且该藻在培养 猿凿后就进入对数期袁培养 圆苑凿达到稳定
期遥
圆冤采用添加 酝 试剂的改良 月郧员员 培养基培养栅
藻袁能极大促进其生长并显著提高其脂质总量遥 当培
养基中 酝试剂浓度为 园郾 远皂造 辕 蕴时袁栅藻在稳定期生物
量为普通培养基中的 苑郾 愿 倍袁粗脂总量为普通培养基
的 猿郾 愿 倍遥
猿冤采用真空冷冻干燥和超声提取法相结合袁以石
油醚为提取溶剂袁可从栅藻细胞中获得最高的脂质提
取效率遥 该法提取的脂质含量比常规的氯仿 辕甲醇法
约高 愿豫左右遥
参考文献院
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渊责任编辑摇 邱爱枝冤
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