全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 9期, 2010年 9月 957
收稿 2010-05-31 修定 　2010-06-10
资助 国家科技支撑计划(2 006 BAD 03 A01 )。
* 通讯作者(E-mail: wcr1992@yahoo.com.cn; Tel: 0311-
8 7 6 8 4 9 6 2 )。
枫杨的组织培养与快速繁殖
王春荣 1,2,*, 毕君 1,2, 曹福亮 3
1河北省林木良种工程技术研究中心, 石家庄050061; 2河北省林业科学研究院, 石家庄 050061; 3南京林业大学, 南京210037
Tissue Culture and Rapid Propagation of Pterocarya stenoptera C. DC.
WANG Chun-Rong1,2,*, BI Jun1,2, CAO Fu-Liang3
1Hebei Engineering Research Center for Trees Varieties, Shijiazhuang 050061, China; 2Hebei Academy of Forestry Science,
Shijiazhuang 050061, China; 3Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China
1 植物名称 枫杨(Pterocarya stenoptera C. DC.)。
2 材料类别 带腋芽幼嫩枝段。
3 培养条件 腋芽诱导培养基: (1) 1/2MS+6-BA 1.0
mg·L-1 (单位下同)+IBA 0.1, 附加 3%蔗糖和 0.6%
琼脂。试管苗增殖培养基: (2) DKW+6-BA 1.0+KT
1.0+ IBA 0.3; (3) MS+6-BA 1.0+KT 1.0+IBA 0.3; (4)
DKW+6-BA (0.5~2.0)+IBA 0.3; (5) MS+6-BA (0.5~
2.0)+IBA 0.3; (6) DKW+6-BA 1.0+KT 1.0+IBA 0.1;
(7) MS+6-BA 1.0+KT 1.0+IBA 0.1; 附加3%蔗糖和
0.6%琼脂。根诱导培养基: (8) 1/2DKW+NAA 0.3;
(9) 1/2DKW+NAA 0.5; (10) 1/2DKW+NAA 0.7; (11)
1/2MS+NAA 0.5; 附加 2.5%蔗糖和 0.6%琼脂。以
上培养基pH值为5.8~6.2, 培养温度为(25±2) ℃, 光
照时间为 12 h·d-1, 光照强度为 20~25 μmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 于4月下旬采10年生枫杨树
冠中下部当年生无病虫害、生长健壮枝条, 剪去叶
片, 先在自来水下用毛刷洗去表面尘土, 再切成长
2~3 cm的茎段, 每个茎段带 1~2个腋芽, 然后用流
水冲洗2~3 h, 放在超净工作台上, 先用无菌水冲洗
3次, 再用 0.1% HgCl2消毒 3 min, 无菌水冲洗 6次
后, 用无菌纸吸干材料表面的水分, 剪去两端, 切成
1.0~1.5 cm带 1个腋芽的茎段, 接种在培养基(1)上。
4.2 芽的诱导 茎段在培养基(1)上经 7 d培养后基
部长出愈伤组织, 15 d后腋芽开始萌发伸长, 25 d
时腋芽最高可达 3 cm左右, 无丛生芽产生, 不定芽
诱导率为 35.8% (图 1)。
4.3 试管苗的增殖 30 d后, 将诱导培养获得的无菌
芽切成 1.0 cm左右、含一个腋芽的茎段和茎尖, 接
种在培养基(2)~(7)上进行增殖培养。接种 10 d后
开始分化出丛生芽(图 2), 20~25 d时可见不同培养
基上的试管苗生长与增殖情况不同, 其中枫杨试管
苗在培养基(2)和(3)中生长与分化最好, 苗高约 2
cm, 分化出的小芽丛多, 培养基(2)中增殖系数为6.89,
叶色绿, 培养基(3)中增殖系数为6.33, 叶色淡绿; 培
养基(4)和(5)中试管苗增殖系数分别为3.54和5.83;
培养基(6)和(7)中试管苗增殖系数分别为 5.78和
图 1 枫杨外植体萌发
图 2 枫杨分化苗
植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture
植物生理学通讯 第 46卷 第 9期, 2010年 9月958
6.11, 但长势较培养基(2)和(3)中略弱, 苗高在 1 cm
左右。在观测中发现, 6-BA和KT与 IBA的配比影
响着试管苗的增殖、高生长和长势。IBA利于枫
杨试管苗的高生长, 随着 IBA浓度的加大试管苗有
增高的趋势; 6-BA对枫杨试管苗增殖影响最大,
6-BA低于1.0时试管苗增殖率低, 高于2.0时试管苗
基部产生较多愈伤组织, 生长势变弱; 添加KT后试
管苗不定芽分化明显, 呈丛生状, 但单独使用KT的
试管苗长势较弱; 6-BA、KT和 IBA配合使用, 既
可促进枫杨不定芽生长, 又可提高其增殖率; MS培
养基中试管苗叶色普遍较淡, 长势较DKW略差。
4.4 根的诱导 取生长健壮、高 2~3 cm的试管苗
单株, 转入培养基(8)~(11)中进行试管苗诱导生根,
接种 14 d后试管苗基部生出浅黄色愈伤组织, 20 d
后有粉红色较粗壮根生出, 继而生出须根。35 d
时形成较发达根系, 根长达 3 cm左右(图 3)。枫
杨试管苗生根情况因培养基而异, 培养基(8)中试管
苗生根率为53.33%, 主根2.4条 ·株-1, 侧根2.6条 ·株-1;
培养基(9)中试管苗生根率为 92.59%, 主根 3.2条 ·
株 -1, 侧根 2.5条 ·株 -1; 培养基(10)中试管苗生根率
为 82.76%, 主根 3.5条 ·株 -1, 侧根 3.2条 ·株 -1; 培养
基(11)中试管苗生根率为 90.91%, 主根 2.7条 ·株 -1,
侧根 0.9条 ·株 -1。另外, 试管苗基部愈伤组织的
直径一般在 0.2~0.5 cm, 有随NAA浓度的增高而
增大的趋势, 一般来说, 愈伤组织在一定程度上会
影响试管苗的移栽成活。
1 000倍的多菌灵液浸泡0.5 h, 取出移植到用0.5%
KMnO4消毒过的蛭石中(图 4), 罩上塑料薄膜, 7 d
后掀去塑料薄膜, 适时叶面喷水, 温度保持在20~25
℃, 相对湿度为 80%~90%, 每 7~10 d喷一次杀菌
剂。20 d后成活率在 95%以上, 可移入营养钵中,
移栽成活率约为 70%。
图 3 枫杨根诱导
5 意义与进展 枫杨是胡桃科枫杨属的落叶乔木,
其喜光, 耐湿, 速生, 适应性强, 对土壤要求不严, 木
材质轻, 少翘裂, 可作家具、农具、造纸等用材;
种子可榨油, 树叶、根可入药; 苗木可用作嫁接核
桃砧木; 根系发达, 保持水土能力极强; 对烟尘和二
氧化硫等有毒气体有强抗性, 是造林、固堤护岸及
行道树优良速生用材树种。目前枫杨常采用有性
繁殖(欧斌等 2004; 关秋芝等 2008), 但有性繁殖后
代变异大, 不利于保存种源和变异; 为保存种源与
变异必须采取无性繁殖, 胡宜兴等(2003)对枫杨进
行了扦插试验的初步研究, 但其采用的是枫杨1年
生苗干和根, 不利于短期快速繁殖; 采取组织培养
方法可实现枫杨的种源和变异材料的保存与快速
繁殖。目前枫杨的组织培养和快速繁殖尚未见
报道。
参考文献
关秋芝, 宋宇栋, 张斌(2008). 枫杨繁育技术. 现代农业科技, (6):
5 0
胡兴宜, 郑兰英, 张凤芝(2003). 枫杨扦插试验初报. 湖北林业科
技, (4): 15~17
欧斌, 卜明生, 李远章(2004). 枫杨种子秋插育苗技术. 林业科技
开发, 18 (4): 58~59
4.5 炼苗移栽 试管苗形成发达的根系后, 室内开瓶
炼苗 7 d, 取出苗后用清水洗净根部的培养基, 用
图 4 枫杨炼苗移栽