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杓唇石斛的种子培养与扩繁



全 文 :植物生理学通讯 第 46卷 第 11期, 2010年 11月 1185
收稿 2010-09-19 修定  2010-10-11
资助 上海市绿化管理局资助项目 “ 兜兰和石斛等兰科植物种
质资源收集、栽培和繁殖技术研究 ”。
* 通讯作者(E-mail: ylq.saas@tom.com; Tel: 021-62208184)。
杓唇石斛的种子培养与扩繁
黄卫昌 1, 殷丽青 2,*, 胡永红 3, 王新其 2
1上海辰山植物园, 上海 201602; 2上海市农业科学院林木果树研究所, 上海 201106; 3上海植物园, 上海 200231
Asepsis Sowing and Rapid Propagation of Dendrobium moschatum (Buch.-
Ham.) Sw.
HUANG Wei-Chang1, YIN Li-Qing2,*, HU Yong-Hong1, WANG Xin-Qi2
1Shanghai CHENSHAN Botanical Garden, Shanghai 201602, China; 2Forestry and Pomology Research Institute, SAAS, Shanghai
201106, China; 3Shanghai Botanical Garden, Shanghai 200231, China
1 植物名称 杓唇石斛[Dendrobium moschatum
(Buch.-Ham.) Sw.]。
2 材料类别 人工自花授粉后的成熟种子。
3 培养条件 以MS、1/2MS为基本培养基。种子
萌发培养基: (1) MS0; (2) MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位
下同)+NAA 0.1; (3) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2。原球
茎增殖与分化培养基: (4) MS+6-BA 0.5+KT 0.5; (5)
MS+6-BA 1.0+KT 0.5+NAA 0.2。壮苗与生根培养
基: (6) 1/2MS+IBA 0.5。培养基(1)~(5)添加 3.0%
蔗糖; (6)添加 2.0%蔗糖; 所有培养基均添加 0.7%
琼脂、水解酪蛋白 0.5 g·L-1、香蕉泥 100 g·L-1,
pH 5.6~5.8。培养温度为 24~26 ℃, 光照时间为
12 h·d-1, 光照强度为 20 μmol·m-2·s-1左右。
4 生长与分化情况
4.1 材料的准备与消毒 将杓唇石斛人工授粉后进
行套袋, 约 140 d待其成熟后摘取其蒴果。在超净
工作台上将蒴果中的种子轻轻地抖落在无菌的硫酸
纸中包起来; 用 75%酒精消毒 30 s, 8%次氯酸钠
溶液浸泡 10 min, 无菌水冲洗 3~4次。
4.2 种子培养与无菌系的获得 用移液枪吸取无菌
水, 将杓唇石斛种子制成水悬浮液, 接种于培养基
(1)~(3)的表面。接种 25 d后, 培养基(1)、(2)上的
杓唇石斛种子开始萌动、变绿, 80 d后逐渐萌发
成圆锥状的原球茎(图1), 并有少量原球茎顶端逐渐
开始形成叶原基分化成苗。而培养基(3)上的原球
茎呈深绿、细小、紧密, 不见分化。
4.3 原球茎的增殖与分化 将上一阶段获得的原球
茎转接于培养基(4)、(5), 15 d后原球茎产生大量
的叶原基逐渐分化成苗, 同时在基部形成新的原球
茎。随着培养时间的延长, 原球茎不断增殖, 月增
殖率达 6 倍, 且先形成的原球茎不断分化成苗。培
养基(4)的效果更好, 培养的组培苗比较粗壮(图 2)。
图 1 杓唇石斛种子萌发
图 2 杓唇石斛原球茎分化小苗
植物生理学通讯 第 46卷 第 11期, 2010年 11月1186
4.4 壮苗及生根培养 将分化后高约 1 cm、有 1对
以上叶片的杓唇石斛苗转接于培养基(6)上, 15 d以
后小苗基部产生2~4条白色的根, 形成完整植株(图
3)。30 d后根长可达 1~2 cm, 且植株粗壮, 生长健
壮, 叶片浓绿, 生根率达 90% (图 4)。
图 3 杓唇石斛的生根培养
图 4 杓唇石斛试管苗
保持温度 25 ℃左右, 空气湿度 80%左右, 1个月后
试管苗成活率可达 80%左右。
5 意义与进展 杓唇石斛属兰科石斛属, 原产于我
国云南和泰国等地, 生于海拔 500~1 500 m疏林树
上, 花粉黄色栗斑唇(图 5), 观赏价值高。其种子
小、无胚乳, 自然条件下萌发率极低, 无性繁殖系
数也低, 自然资源处于濒危状态。石斛属植物的组
织培养已有较多报道(王伟等 2009; 李军萍和杨遂
民2008; 张莹等2007; 白音等2006), 但杓唇石斛的
种子培养与扩繁技术尚未见报道。本文采用成熟
的杓唇石斛种子接种于培养基进行无菌培养获得较
好的效果, 种子萌发率高(90%以上), 原球茎增殖
快, 且分化种苗粗壮、整齐。本文结果为杓唇石斛
的生理、遗传育种方面的研究奠定基础, 对其种质
资源保护、利用及提供种苗具有一定的应用价值。
4.5 炼苗与移栽 生根培养35 d以后, 将试管苗带盖
置于常温条件下炼苗 3 d, 然后打开瓶盖再炼苗 2
d, 将生根试管苗从培养瓶中轻轻取出, 洗去基部残
留的培养基, 移栽于以苔藓为基质的穴盘, 浇水后
参考文献
白音, 包英华, 王文全, 阎玉凝(2006). 玫瑰石斛的组织培养及快
速繁殖. 植物生理学通讯, 42 (5): 903
李军萍, 杨遂民(2008). 齿瓣石斛种子培养及扩繁技术研究. 河北
农业科学, 12 (7): 52~53
王伟, 黄卫昌, 金荷仙, 陈香波(2009). 大苞鞘石斛的离体培养与
快速繁殖. 植物生理学通讯, 44 (5): 959~960
张莹, 王雁, 李振坚(2007). 报春石斛的组织培养与快速繁殖. 植
物生理学通讯, 43 (4): 64
图 5 杓唇石斛开花