全 文 ：植物生理学通讯 第46卷 第12期, 2010年12月 1257
收稿 2010-10-08 修定 　2010-10-20
资助 广西科学研究与技术开发计划课题(桂科攻 0815005-2-
16)和广西中医药管理局自筹经费课题(gzzc1026)。
* 通讯作者(E-mail: xueyan-h@163.com; Tel: 0771-5603824)。
罗河石斛的组织培养与快速繁殖
韦莹, 李力, 张占江, 谭小明, 余海霞, 黄宝优, 黄雪彦 *
广西壮族自治区药用植物园, 南宁530023
Tissue Culture and Rapid Propagation of Dendrobium lohohense Tang et Wang
WEI Ying, LI Li, ZHANG Zhan-Jiang, TAN Xiao-Ming, YU Hai-Xia, HUANG Bao-You, HUANG Xue-Yan*
Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plant, Nanning 530023, China
1 植物名称 罗河石斛(Dendrobium lohohense Tang
et Wang)。
2 材料类别 带芽茎段。
3 培养条件 (1)原球茎诱导培养基: MS+6-BA 1.0
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1+KT 0.5; (2)丛生芽增殖
和分化培养基: MS+6-BA 2.0+NAA 0.1+5%香蕉提
取物; (3)壮苗生根培养基: 1/2MS+6-BA 0.1+IBA
0.5+10% 椰子汁。上述培养基中分别附加5 g·L-1
琼脂, pH 5.8~6.0。培养温度(25±1) ℃; 光照时间
12 h·d-1, 光照强度20~30 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体的消毒和接种 春季取罗河石斛幼嫩茎
段, 摘去叶片及膜质叶鞘, 先用洗洁精清洗表面污
垢, 接着流水冲洗15 min, 然后在超净工作台上用
75%乙醇处理30 s, 无菌水冲洗1遍, 再用 0.1%
HgCl2消毒15 min, 无菌水冲洗5次。用无菌滤纸
吸干外植体表面水分后, 剪切成 0.8~1.2 cm、带
一个侧芽的茎段, 竖直插入到培养基(1)上。每瓶
接种3个外植体, 共接种45个外植体。
4.2 原球茎的诱导 罗河石斛茎段接种后培养约20
d, 侧芽开始萌发; 培养40 d后, 诱导出健壮的小圆
形颗粒状原球茎; 约60 d后, 原球茎长势良好, 为嫩
绿色且生长旺盛, 增殖倍数可达3倍以上, 并逐渐
产生分化芽(图 1)。
4.3 丛生芽的增殖和分化 将诱导形成的侧芽切成
1 cm左右的茎段, 转接到培养基(2)中, 20 d后开始
产生不定芽, 同时原球茎体积逐步增大, 其分化出
的丛生芽高度也有增加, 并逐渐生长出若干小叶
片。含有香蕉提取物的培养基上所分化出的增殖
芽数量明显增多, 形成较多的丛生芽苗。培养50 d
后增殖系数达3.2 (图2)。
4.4 壮苗生根培养 待丛生芽在培养基(2)上生长
3~4 cm时, 将丛生芽分割成小丛或单苗接种到培养
基(3)上, 15~20 d, 有细小的根系生成; 经60 d培养,
株高为5~6 cm, 生根率高达92%, 平均根长达4.6
cm, 叶片深绿, 株壮, 根较粗(图3)。
图1 罗河石斛原球茎的诱导
图2 罗河石斛丛生芽的增殖和分化
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4.5 炼苗与移栽 待单苗生长到5~7 cm时, 打开培
养瓶的盖子, 并注入少量水淹没培养基, 于室内自
然光下炼苗1周。用镊子小心取出试管苗, 洗净培
养基后移栽到经高压灭菌的苔藓基质中, 基质以疏
松透气、排水良好、不易发霉为宜。每周喷施
1~2次10倍稀释的MS大量元素营养液, 移至遮阳
荫棚培养, 根据需要适当喷施0.1%的叶面肥, 视基
质的干湿度喷雾补水, 移栽4个月后成活率为78.5%
(图 4)。
5 意义与进展 石斛属兰科(Orchidaceae)植物, 为传
统名贵中药材, 茎入药, 《神农本草经》中将其列为
上品。罗河石斛为石斛类药材, 具有滋阴养胃, 清
热生津之功能, 经济价值很高。石斛生境条件苛
刻, 自然繁殖力低, 且由于药用及出口需要, 使野生
石斛过度采挖, 故其资源已日渐枯竭(郭顺星和徐锦
图3 罗河石斛的生根苗
堂1991)。进一步开发利用石斛属药用资源, 通过
组织培养进行快速繁育是一种有效途径。近年来,
国内关于石斛种子无菌培养及细胞组织培养等方面
的研究已有不少报道(汤亚飞等2010; 魏凤娟2010),
铁皮石斛、齿瓣石斛、金钗石斛等的繁殖已形成
一定规模(明兴加和冯婷婷2010), 而关于罗河石斛
组织培养与快速繁殖的研究尚未见报道。
参考文献
郭顺星, 徐锦堂(1991). 真菌在罗河石斛和铁皮石斛种子萌发中
的作用. 中国医学科学院学报, 13 (1): 46~49
明兴加, 冯婷婷(2010). 中国石斛属植物种苗繁育技术的研究进
展. 安徽农业科学, 38 (6): 2899~2902, 2920
汤亚飞, 蔡时可, 郑锦荣, 李淑玲, 张振臣, 王芳(2010). 铁皮石斛组
织培养与快速繁殖. 亚热带植物科学, 39 (2): 74~75
魏凤娟(2010). 铁皮石斛组织培养与栽培技术研究进展. 广东农
业科学, 37 (4): 81~85
图4 罗河石斛的移栽