全 文 ：植物生理学通讯 第 45卷 第 10期，2009年 10月 1009
收稿 2009-08-17 修定 　2009-09-02
资助 四川省重点学科建设项目(SZD0 419 )。
* 通讯作者(E-mail: xuxia00xx@126.com; Tel: 0835-
8 5 2 8 4 4 2 )。
昆明杯冠藤的组织培养与植株再生
徐霞*, 石大兴, 王米力, 任雅君, 袁迎燕, 郝玉立, 汪静
四川农业大学林学院, 四川雅安 625014
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Cynanchum wallichii Wight
XU Xia*, SHI Da-Xing, WANG Mi-Li, REN Ya-Jun, YUAN Ying-Yan, HAO Yu-Li, WANG Jing
College of Forestry, Sichuan Agricultural University, Ya’an, Sichuan 625014, China
1 植物名称 昆明杯冠藤(Cynanchum wallichii
Wight), 又名断节参。
2 材料类别 带芽茎段、叶片、节间。
3 培养条件 诱导培养基：(1) MS+6-BA 2.0 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.3+IBA 0.05; (2) MS+6-BA 0.5+
NAA 0.01; (3) MS+6-BA 2.0+NAA 0.01+2,4-D 0.05。
增殖分化培养基：(4) MS+KT 1.0+NAA 0.1+IBA
0.1; (5) MS+6-BA 2.0+NAA 0.2+2,4-D 0.05; (6)
MS+6-BA 0.5+NAA 0.4。壮苗生根培养基：(7)
MS; (8) 1/4MS+IBA 0.5。所有培养基均附加 3%
蔗糖和 0.6% 琼脂粉, pH 5.8~6.0。培养温度为
(25±2) ℃; 光照时间 14 h·d-1, 光照强度为 30~40
μmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 以昆明杯冠藤的幼嫩枝条为
试验材料, 洗衣粉清洗后, 再用自来水流水冲洗 2
h。在超净工作台上将叶片和枝条在 70%的乙醇
中浸泡 20 s, 然后转入 0.1%的升汞溶液中分别灭
菌 6和 8 min, 用无菌水冲洗 5次, 剪取幼嫩带芽茎
段、叶片、节间接种。
4.2 愈伤组织及芽的诱导 将带芽茎段、叶片、节
间分别接种在培养基(1)~(3)上。带芽茎段接种 7 d
后, 腋芽开始萌动, 30 d后长成 1~2 cm高的小芽
苗, 芽诱导率达 70%。叶片接种 15 d后, 叶片膨
大且缺口处产生浅绿色愈伤组织, 30 d时诱导率可
达 95%以上。节间接种 15 d 后, 节间两端膨大且
缺口处产生黄绿色至绿色愈伤组织, 30 d时愈伤组
织诱导率达 90%。
4.3 继代增殖与不定芽的诱导 将带芽茎段诱导的
有效芽转移到培养基(4)上进行增殖培养, 30 d左
右的增殖系数约为 3 (图 1)。将叶片和节间诱导的
绿色愈伤组织先接种到培养基(5)上进行增殖, 30 d
后将愈伤组织转移到培养基(6)上诱导分化, 继代2
次后愈伤组织开始分化出绿色的小芽丛(图 2和 3)。
图 1 昆明杯冠藤带芽茎段增殖
图 2 昆明杯冠藤叶片愈伤组织分化
植物生理学通讯 第 45卷 第 10期，2009年 10月1010
4.4 壮苗生根 将继代获得的小芽苗转移到培养基
(7)上壮苗, 培养 30 d后可长成 3 cm左右高的有效
苗。然后将健壮的无根单苗(苗高≥ 3 cm)转移到
培养基(8)上进行生根培养。10 d后开始生根, 30
d时的生根率达 90%, 根最长可达 10 cm, 最多有
10多条根(图 4)。
图 3 昆明杯冠藤节间愈伤组织分化
图 4 昆明杯冠藤生根苗
4.5 炼苗移栽 将生根苗放在室温散射光下培养 3
d, 揭开培养瓶封口膜后于室内再培养 3 d, 取出生
根苗, 洗去根部培养基, 移栽到温室中, 育苗基质为
珍珠岩、蛭石和河沙(1:1:2), 保持湿度在 85%以
图 5 昆明杯冠藤移栽 10 d的苗
上, 10 d时开始有新叶长出(图 5), 30 d时的成活率
为 7 0 %。
5 意义与进展 昆明杯冠藤为萝摩科鹅绒藤属的多
年生草质藤本, 其花白色或黄白色, 托叶单生于叶
腋, 茎缠绕略带红色, 在园林垂直绿化中达到良好
的造景效果。野生的昆明杯冠藤主要靠种子繁殖,
但由于在野外种子不易采集, 而其药源又以采集野
生植株为主, 资源渐少, 靠单一的种子繁殖并不能
满足市场的需求。本文采用组织培养技术, 可在短
期内得到大量性状一致的苗木, 对昆明杯冠藤的种
质资源保护以及开发利用可能有一定的参考价值。
鹅绒藤属中的白首乌和青阳参组织培养已有报道
(何道一等 1989; 贝盏临等 2005; 刘秀贤等 2006),
但昆明杯冠藤只对其成分(陈刚等 2009)有过研究,
而组织培养和快速繁殖尚未见报道。
参考文献
贝盏临, 曹有龙, 李晓莺, 罗青(2005). 地梢瓜的组织培养及快速
繁殖. 植物生理学通讯, 41 (4): 496
陈刚, 李志锋, 张起辉, 裴月湖(2009). 昆明杯冠藤中 C-21甾类
成分的研究. 中国药物化学杂志, 19 (2): 140~143
何道一, 程炳嵩, 邹琦(1989). 白首乌的组织培养. 植物生理学通
讯, (6): 47~48
刘秀贤, 李正红, 邓疆(2006). 青阳参的组织培养和植株再生. 植
物生理学通讯, 42 (5): 902