免费文献传递   相关文献

鹿角苔的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 46卷 第 5期, 2010年 5月 481
收稿 2010-02-26 修定  2010-03-08
资助 昆明市科技计划项目(昆科计字 0 7N 05 02 01 号)。
* 通讯作者(E-mail: 377570972@qq.com; Tel: 0871-3109115)。
鹿角苔的组织培养
黄茂 1, 彭军 1, 安莉 1, 胡景荣 2,*
1昆明市水产科学研究所, 昆明 650021; 2昆明市科学技术情报研究所, 昆明 650021
Tissue Culture of Riccia Fluitans L.
HUANG Mao1, PENG Jun1, AN Li1, HU Jing-Rong2,*
1Kunming Aquatic Products Research Institute, Kunming 650021,China; 2Institute of Science and Technology Information of Kunming,
Kunming 650021,China
1 植物名称 鹿角苔(Riccia Fluitans L.)。
2 材料类别 叶状体。
3 培养条件 (1)启动培养基: 1/2MS+10 g·L-1蔗糖+
2 g·L-1活性炭 +3 g·L-1琼脂粉; (2)生长培养基:
1/2MS+BA 0.1 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1+40 g·L-1
土豆泥 +30 g·L-1蔗糖+1 g·L-1活性炭+3 g·L-1琼脂粉;
(3)壮苗培养基: MS+NAA 0.2+IBA 0.1+40 g·L-1土豆
泥+20 g·L-1蔗糖+2 g·L-1活性炭+3 g·L-1琼脂粉; (4)
旱培移栽炼苗营养液: 1/2MS+NAA 0.2+IBA 0.1+10
g·L-1蔗糖。以上培养基 pH值为 6.0。培养温度为
(25±2) ℃, 光照强度为 60~150 µmol·m-2·s-1, 光照时
间为 8 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 取 10 g鹿角苔, 自来水洗净
后, 用 75%的酒精表面消毒 30 s, 再以 0.05%升汞
溶液消毒 15 min, 用无菌水冲洗 5次, 用消毒后的
0.5%藻净清浸泡 1 h。最后用剪刀剪碎至 2~3 mm
长。用无菌滤纸吸干水分, 植入启动培养基中。
4.2 生长培养 无菌外植体接种到启动培养基(1)上,
暗培养 3~4 d后, 可见绿色转淡; 然后将其转入生
长培养基(2), 光照培养继续生长 15~20 d, 外植体
可长至 5~8 mm。
4.3 壮苗培养 将转绿后的植株, 转入培养基(3)中
进行壮苗培养。约 30 d后嫩芽逐渐增高, 植株生
长旺盛(图 1)。8周后, 待植株长至 3~6 cm, 翠绿、
有分叉时, 可进行继代快繁和炼苗移栽。
4.4 继代快繁 壮苗培养植株长至 3~6 cm时, 取出
在超净工作环境下切为10~12 段, 置入新鲜的培养
基(2), 经过 30~40 d培养, 转入培养基(3)继续培养,
完成继代快繁(图 2)。
4.5 植株移栽与养护 移栽前2周, 在超净工作台上
将瓶盖打开, 上封 l层灭过菌的聚乙烯袋子, 保持撑
图 1 鹿角苔的壮苗培养
图 2 鹿角苔的继代快繁
开状态, 光照培养。移栽时轻轻取植株, 注意不要
伤及植株。用水洗去根部附着的培养基, 将植株放
入 l:500稀释的 70%甲基托布津药液中消毒 2 h, 晾
干, 置于背阴处定植。定植材料为消毒后的珍珠岩、
河沙、肥土以体积比 l:1:1混合的基质(图 3)。定植
后用稀释 100倍的营养液(4)喷雾培养, 直至生长稳
植物生理学通讯 第 46卷 第 5期, 2010年 5月482
定。喷雾培养时间为 10 h·d-1, 温度为 18~25℃, 空气
湿度为 90%以上, 光照强度70~100 µmol·m-2·s-1, 光照
时间为 14 h·d-1。随后逐渐降低喷雾时间, 保持湿度
不低于70%。2个月后统计移栽成活率达95%以上。
5 意义与进展 鹿角苔是水生观赏植物中的上品, 在
昆明市场上, 每千克零售价高达 2 000元。它对环
境的适应能力较强, 可在较大的温度范围内健康生
长, 有水质净化作用, 在水族箱中美如云、势如松
(图 4), 在充足的光照条件下让它进行光合作用, 会
在草体上冒出一个个的气泡, 形成一片银白色气泡
海的奇观, 深受水族爱好者的青睐。随着我国人民
生活的不断提高, 观赏水生植物的需求越来越大, 大
量高档鹿角苔仍主要依赖进口。为使鹿角苔尽快
形成规模化栽培, 为国内观赏水草市场提供物优价
廉的鹿角苔, 我们开展了鹿角苔的组织培养技术研
究。鹿角苔是苔藓类浮苔科(Ricciaceae)植物, 在
组织培养中难以与其他苔藓植物和藻类分离, 组培
出的鹿角苔常附着很多蓝藻, 生长状况不好, 影响
美观。为此, 研究采用了杀除蓝藻的试剂——藻
净清来获得无菌外植体, 既保证了外植体的纯净性,
又保证了外植体不受伤害褐化。本实验中的鹿角
苔苗已经顺利通过旱培、转水等驯化阶段, 批量
投入市场, 为产业化生产奠定了基础, 具有良好的
市场前景。迄今未见该植物组培和快繁报道。
图 3 鹿角苔的移栽旱培 图 4 鹿角苔转水驯化后的布景效果