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石沙参的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 46卷 第 8期, 2010年 8月 845
收稿 2010-04-29 修定  2010-05-27
资助 国家自然科学基金项目(30 90 1 15 8)。
* 通讯作者(E-mail: xychen@scau.edu.cn; Tel: 020-85280001)。
石沙参的组织培养与快速繁殖
冷青云 1, 李伟 1, 陈晓阳 2,*, 贾香楠 1, 欧阳昆唏 1, 马圣俊 1
1北京林业大学林木育种国家工程实验室, 林木花卉遗传育种教育部重点实验室, 北京 100083; 2华南农业大学林学院, 广州
510642
Tissue Culture and Plant Regeneration of Adenophora polyantha Nakai
LENG Qing-Yun1, LI Wei1, CHEN Xiao-Yang2,*, JIA Xiang-Nan1, OUYANG Kun-Xi1, MA Shen-Jun1
1Key Laboratory of Genetics and Breeding in Forest Trees and Ornamental Plants of Ministry of Education, National Engineering
Laboratory for Tree Breeding, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China; 2College of Forestry, South China Agricultural
University, Guangzhou 510642, China
1 植物名称 石沙参(Adenophora polyantha Nakai)。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发与无菌苗生长培养基: (1)
MS, (2) 1/2MS; 丛生芽诱导与增殖培养基: (3)
MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同), (4) MS+6-BA 1.0,
(5) MS+6-BA 2.0; 壮苗生根培养基: (6) MS+NAA
0.5, (7) MS+NAA 1.0, (8) MS+NAA 0.5+IBA 0.1, (9)
1/2MS+IBA 0.4。以上培养基均附加 30 g·L-1蔗糖
和 5.5 g·L-1琼脂, pH为5.8~6.0。培养条件为(25±1)
℃, 光照强度为 25~35 μmol·m-2·s-1, 光照时间为 16
h· d - 1。
4 生长与分化情况
4.1 种子萌发与无菌苗培养 将石沙参的种子在75%
乙醇浸泡 30 s, 无菌水冲洗 3次, 再用 0.1%升汞灭
菌 6~8 min, 其间不时摇动, 无菌水冲洗 3次, 用解
剖刀挑取种子分别接种到(1)、(2)培养基上。15 d
后, 种子开始陆续萌动, 25 d后子叶陆续展开, 35 d
后真叶陆续长出(图 1)。
4.2 丛生芽的诱导与增殖培养 种子萌发45 d左右,
待无菌苗长出2~3片真叶后, 分别接种到培养基(3)~
(5)中, 10 d后苗基部开始膨大, 20 d左右 3种培养
基都有丛生芽产生和腋芽长出。30 d后培养基
(3)、(4)的增殖系数平均达4~5, 培养基(5)的增殖系
数平均达 6~7 (图 2), 且叶柄、叶片大而肥厚, 但
是接近培养基表面的芽会出现玻璃化现象。
图 1 石沙参的种子萌发
图 2 石沙参的继代增殖培养
4.3 壮苗和生根培养 将丛生芽中长有 4~5片叶片
的不定芽苗切下分别接种到(6)~(9)培养基中上, 10
d后可见新生叶叶柄明显伸长, 叶色浓绿, (6)~(8)培
养基中材料切口处有愈伤组织长出, 20 d左右愈伤
组织增大, 从愈伤组织处长出数量不等的不定根。
30 d后不定根数量增多(图 3), 培养基(7)的生根率
好于培养基(6)和(8)。培养基(9)中材料切口处未
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见愈伤组织出现, 20 d左右切口处长出数量不等的
不定根。
图 3 石沙参的生根培养
4.4 炼苗移栽 待苗根长达一定数量时, 揭开培养瓶
的瓶盖, 并注入少量清水淹没培养基表面, 于室内
自然光下炼苗 5~7 d。然后小心取出瓶苗, 洗净根
部附着的培养基, 移栽到经过800倍多菌灵溶液消
毒过的泥炭土、珍珠岩、蛭石(3:2:1)混合的基质
中。浇足定根水, 用薄膜覆盖以保温保湿, 湿度保
持在 85%左右。温度控制在 23~25 ℃。适当遮
荫和通风, 移栽一个月后, 成或率可达 90%。
5 意义和进展 石沙参是桔梗科(Campanulaceae)沙
参属植物, 多年生草本, 花冠钟状或狭钟状、花色
多为蓝紫色(图 4)、花期较长(8~10月), 具有较高
的观赏价值, 可以用于园林绿化、家居绿化等方
面。此外石沙参具有药用价值, 其根茎中含有苷类
物质和水溶性多糖, 具有养阴清肺、化痰益气等功
效。石沙参主要是以播种繁殖为主, 然其发芽率和
圃地出苗率都比较低, 不能满足生产需求。组织培
养技术可以加快石沙参繁殖, 这或许可以解决上述
问题, 石沙参的组织培养尚未见报道。
图 4 石沙参的植株
参考文献
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西中医学院学报, 10 (1): 25~27
洪德元, 廉永善, 沈联德(1983). 中国植物志(第 73卷第 2分册).
北京: 科学出版社, 109~110
吴繁花, 朱文丽, 莫饶, 符常明(2005). 海南龙血树的组织培养. 植
物生理学通讯, 41 (2): 186