全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 8期, 2010年 8月 855
收稿 2010-05-27 修定 2010-06-21
资助 国家科技支撑项目(200 9BADB3B04)。
* 通讯作者(E-mail: zhaohengtian@163.com; Tel: 0451-
8 6 6 0 3 7 5 3 )。
东北羊角芹的组织培养与快速繁殖
赵恒田 *, 邓中枢, 裴雪, 黄福山
中国科学院东北地理与农业生态研究所, 哈尔滨 150081
Tissue Culture and Rapid Propagation of Alpine Goutweed (Aegopodium alpestre
Ledeb.)
ZHAO Heng-Tian*, DENG Zhong-Shu, PEI Xue, HUANG Fu-Shan
Northeast Institute of Geography and Agricultural Ecology, Chinese Academy of Sciences, Harbin 150081, China
1 植物名称 东北羊角芹(Aegopodium alpestre
Ledeb.)。
2 材料类别 植株的茎段。
3 培养条件 以MS为基本培养基。芽诱导培养基:
(1) MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同)+IBA 0.2; (2)
MS+6-BA 1.0+IBA 0.2。增殖培养基: (3) MS+6-BA
0.1+IBA 0.05; (4) MS+6-BA 0.2+IBA 0.05。生根培
养基: (5) 1/2MS+IBA 0.05; (6) 1/2MS+IBA 0.1。以上
培养基均含 25 g·L-1蔗糖和 6.5 g·L-1琼脂粉, pH 5.8。
培养温度为 24~26 ℃; 光照强度为 15 μmol·m-2·s-1,
光照时间为 16 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 取材与消毒 取东北羊角芹长约 1 cm的嫩茎
段, 分成顶芽和茎段, 茎段带 2个节, 用洗涤剂漂洗
30 min, 流水冲洗 30 min, 然后在超净工作台上用
70%酒精浸泡10 s, 再用0.1%升汞溶液消毒6 min,
并不断搅拌, 无菌水冲洗 5次。用无菌滤纸吸干材
料上的水分, 备用。
4.2 诱导培养 用手术剪刀剪去外植体两端切口各
2 mm左右, 接入芽诱导培养基中。培养基(1)诱
导效果较好, 培养 20 d后, 腋芽长 2~4 cm, 芽诱导
率 85%以上(图 1)。
4.3 继代增殖 将诱导的芽剪成0.5~1.0 cm长, 接种
在增殖培养基中。接种时, 将切口插入培养基中 2
mm左右, 15 d后形成丛生芽(图 2)。其中, 培养
基(4)上不定芽增殖效果显著, 增殖倍数达到8.2; 培
养基(3)上增殖倍数较小, 为 3.5。因此, 培养基(4)
为最适增殖培养基。
4.4 生根培养 当芽长到 1 cm以上时, 切取健壮的
芽插入培养基(5)和(6)中进行生根培养。培养 7 d,
试管苗开始生根; 15 d时, 根系发育良好, 每株苗有
图 1 东北羊角芹芽诱导培养
图 2 东北羊角芹增殖培养
植物生理学通讯 第 46卷 第 8期, 2010年 8月856
5~9条主根。培养基(5)和(6)上生根情况均良好,
生根率超过90%, 培养基(5)激素用量要小于(6), 因
此选用培养基(5)为生根培养基(图 3)。生根培养
时附加 1 g·L-1活性炭有利于生根。
图 3 东北羊角芹生根培养
4.5 炼苗和移栽 待生根试管苗的根长至1 cm以上
时, 可进行炼苗。打开培养瓶, 放到栽培环境中,
适当注水保持湿度。3 d后, 取出试管苗, 用清水
洗净附着在根部的培养基, 然后移栽至山地土:珍珠
岩 =5:1的基质中。移栽后, 前 7 d覆盖薄膜和 30%
透光率的遮阳网, 避免强光照射, 保持空气湿度在
85%以上, 温度 20 ℃左右; 7 d后逐渐降低空气湿
度并撤除覆盖物。移栽 15 d后, 试管苗明显长高,
叶芽长出, 成活率达 90%以上(图 4)。
图 4 东北羊角芹移栽苗
5 意义与进展 东北羊角芹为伞形科羊角芹属的多
年生草本植物, 俗称小叶芹、河芹、水芹。生于
林缘、林间草地、溪流两岸, 主要分布在中国东
北地区及朝鲜、俄罗斯等地。东北羊角芹食用方
法多样, 风味独特, 营养丰富, 深受人们喜爱。此
外, 东北羊角芹全草可入药, 对治疗风湿症、高血
压等具有一定功效。由于东北羊角芹适于湿生环
境, 非常适合在沟塘及低洼地块进行人工生产, 对
增加土地产出、丰富地表植被、保护生态环境具
有重要意义。东北羊角芹采种困难, 种子发芽率
低, 以无性繁殖为主, 但繁殖成苗及生产周期长。
通过组织培养可以快速繁殖东北羊角芹种苗, 保护
与高效利用野生资源, 满足人工生产需求, 具有一
定的应用价值。目前, 东北羊角芹的组织培养及快
速繁殖尚未见报道。