全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 5期,2007年 10月886
蚂蝗七的离体快速繁殖
梁桂友,温放,李湛东 *
北京林业大学园林学院,北京 100083
In vitro Micropropagation of Chirita fimbrisepala Hand.-Mazz.
LIANG Gui-You, WEN Fang, LI Zhan-Dong*
College of Landscape Architecture, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China
收稿 2007-06-19 修定 2007-08-06
资助 北京林业大学研究生自选课题资助基金(05jj049)和农业
部农业基因资源保护与种质创新利用研究基金(2004BA
5 2 5 B1 1 )。
* 通讯作者(E-mail:lizhandong@126.com;Tel:010-
82 37 15 56 -6 03 )。
1 植物名称 蚂蝗七(Chirita fimbrisepala Hand.-
Mazz.)。
2 材料类别 花梗和带苞片的花蕾。
3 培养条件 (1)愈伤组织诱导和不定芽分化培养
基:MS+6-BA 0.1 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;
(2)继代增殖培养基:MS+6-BA 0.05+NAA 0.1;
(3)壮苗生根培养基:1/2MS+1.0%蔗糖 +0.3%活
性炭。培养基(1)和(2)均加入 3.0%蔗糖和 0.6%琼
脂,pH 6.2,培养温度(25±3) ℃;在愈伤组织
形成、芽分化和生根过程中的光照时间为 12 h·d-1;
光照强度 26~30 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料处理 取幼嫩花梗和带苞片的花蕾,清除
其表面污物,自来水冲洗后放入盛满水(加入 3~5
滴洗洁精)的 200 mL烧杯中,震荡 15 min,冲
洗 30 min。在超净工作台上,75%乙醇消毒 10
s,无菌水冲洗 3次;用加 3滴吐温的 0.1%升汞
浸泡 6 min,震荡 2~3 min,无菌水冲洗 5~6次。
将花梗切成 1~1.5 cm的小段,接入培养基(1)中;
而带苞片的花蕾则直接接种至培养基(1)中。
4.2 愈伤组织和不定芽的诱导 带苞片的花蕾在培
养基(1)中启动时间约 20 d,愈伤组织诱导频率达
80%;花梗的启动时间需要 26 d左右,诱导频率
为 73%。2种外植体约 35 d后在愈伤组织切口上
出现不定芽。切下不定芽,转到培养基(2)上,约
7 d后出现愈伤组织。愈伤组织出现 3周后,大
部分切口处长出浓密的丛生芽,并出现一部分有
植株形态的小苗。
4.3 生根培养 选择高约 1 cm、生长健壮的不定
芽苗接种到培养基(3 )上,一瓶一苗。10 d后,
可见叶片明显增大,根开始发生;一般 20 d内,
陆续长出 1~2对新叶、5~7条根;4周后,生根
率达 95%以上。另外,不定芽虽能在培养基(2)
上直接生根,但长出的新根较为粗短,毛细根
少;数量也比转到生根培养基上的少。
4.4 炼苗和移栽 将健壮的生根苗从培养瓶中小心
取出,用 25 ℃温水浸泡去除培养基。栽入由 50%
珍珠岩和 50%蛭石(经高压灭菌)组成的基质中。
盖上塑料薄膜以保持空气湿度,2 d浇水 1次,保
持基质湿润。21 d长势稳定后,每天掀开薄膜少
许,7 d内逐渐揭去薄膜,直至完全揭去。然后
更换培养土,培养土比例为园土:珍珠岩:蛭石 =5:
4:1,成活率 100%。
5 意义与进展 蚂蝗七属苦苣苔科唇柱(或长蒴)苣
苔属植物,无茎或直立草本植物,分布于我国西
南部至东南部各省。但因近年来全球气温上升,
其原适宜生长的溪流逐渐断流或干涸,导致蚂蝗
七野外数量日趋减少。此种植物叶基生,叶片两
侧不对称,两面密被长短不一的白色柔毛;花
大,淡紫至紫色,整体花期长达 1个月以上;植
株低矮、形态可爱;花叶皆美,观赏价值高。
既能适应南方微酸性的栽培条件,又在北方偏碱
性的栽培条件下开花结实,且室内环境适应性良
好,极具开发前景。用组织培养快速繁殖技术可
能有助于此种植物的种质资源保存及大规模商品化
生产。蚂蝗七的组培快繁尚未见报道。