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海南降香黄檀的离体培养和植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第6期,2005年12月 793
海南降香黄檀的离体培养和植株再生
朱靖杰*
华南热带农业大学园艺学院,海南儋州 571737
In vitro Cultrue and Plantlet Regeneration of Dalbergia hainanensis Merr. et.
Chun
ZHU Jing-Jie*
College of Horticulture, South China University of Tropical Agriculture, Danzhou, Hainan 571737, China
收稿 2005-01-26 修定   2005-05-30
资助  中国热带农业科学院,华南热带农业大学科技基金
(RND0340)。
*E-mail:okzjj@163.com,Tel:0898-23987846
1 植物名称 海南降香黄檀(Dalbergia hainanensis
Merr. et Chun)。
2 材料类别 顶芽和茎段。
3 培养条件 诱导侧芽分化培养基:(1) MS+6-BA
2.0 mg·L-1 (单位下同)+KT 0.1; (2) MS+6-BA 0.1+KT
2.0; (3) MS+6-BA 1.0+KT 0.1+NAA 0.1; (4) MS+6-
BA 3.0+KT 0.5+NAA 0.1; (5) 1/2MS+6-BA 2.0+KT
0.1; (6) 1/2MS+活性炭10%。芽增殖培养基:(7)
MS+6-BA 1.0; (8) MS+6-BA 0.1+KT 2.0; (9) MS+6-
BA 1.0+KT 0.1; (10) MS+6-BA 3.0+KT 0.5; (11)
1/2MS+6-BA 2.0; (12) 1/2MS+KT 1.0。壮苗培养基:
(13) MS+5% (体积比)椰子乳。生根培养基:(14)
1/4MS+NAA 2.0+ 活性炭 10%; (15) 1/3MS+
NAA 2.0+活性炭10%; (16) 1/2MS+NAA 2.0+活性
炭 10%。以上培养基的 pH 均为 6.0,卡拉胶为
0.5%, 蔗糖浓度(1)~(12)为 3.0%,其余为2.0%。
培养的光强为24 mmol·m-2·s-1,12 h·d-1连续光照,
温度为 24~26℃。壮苗和生根培养的光强为 40
mmol·m-2·s-1,24 h·d-1 连续光照。
4 生长和分化情况
4.1 无菌材料的获得 在3月中旬,采集刚抽枝吐
芽的嫩枝,选择尚未完全木质化的嫩枝,将嫩枝
截成带侧芽的短枝,长约 5 cm, 侧芽居中。将
上述材料浸泡在加有洗衣粉的清水中约 20 min,
然后转至一细纱网上,用自来水充分冲洗 3 0
min,吸干水分,以 70% 酒精浸泡 10 s,立即
转至 2% 有效氯的次氯酸钠中处理 10 min,无菌
水漂洗4次。去除嫩枝两端约0.5 cm,将带节嫩
枝切成1 cm 茎段,纵插入芽增殖培养基中。7 d
后可见下切口处膨大,呈淡黄色瘤状物,有的出
现明显的愈伤组织;10 d,在侧芽处开始有小芽萌
动;15 d,小芽变得逐渐明显;20 d,小芽伸长
1 cm 左右;25 d 后,长至 2 cm 左右。
4.2 增殖培养 将培养基(1)~(6)中产生的芽或苗分
割后接于培养基(7)~(12),10 d后,芽基部切口
处膨大,并有少量愈伤组织发生;25 d,从基部
抽出 2~4 个不定芽,同时很快伸长成小枝条。培
养基(11)增殖较好。培养基(10)中,叶柄发生脱
落,断口处有少量愈伤组织产生。将枝条切割成
带有约 1 cm 长侧芽的切段,转接在培养基(11)
中,芽增殖系数可达3~5倍。每25~30 d继代1次。
4.3 生根与移栽 将3~5 cm高的无根苗接种到生根
培养基(13)~(16)中,10 d后有白色突起,15 d伸
长成明显的白色幼根,生根率达 9 5 % 以上。弱
苗则经过培养基(13)壮苗培养,20 d后再按上述
方法催根。这时,加强光照,1 个月后,小苗
长成7 cm 高,根也伸长至3~4 cm,并有分叉出
现。此时,必须提高光强。小苗浓绿健壮时,
继续培养。生根培养 1 个月后,将培养瓶移至窗
台边,松开盖子以接受较强的漫散射光照射3 d。
之后完全打开盖子再炼 3 d,取出小苗,洗净培
养基,移至消毒过的椰糠中,浇透水后以玻璃大
烧杯倒盖上,1 周后取去烧杯,用稀释 100 倍的
MS 大量元素浇灌。小苗完全长出新根并壮苗后,
移至大田土花盆中,移栽成活率达90% 以上。
5 意义与进展 海南降香黄檀别名花梨木,属蝶形
花科檀属,原产于海南,为海南特产。木材质
地坚硬沉重,永不开裂、变形,是高档家具上
等用材;以心材蒸馏得到的降香油,气味清香,
久不挥发,是香料的定香剂;也是高级镇痛药
材,有抗血凝、氧化,扩冠脉等作用。此树种
天然种子繁殖力很弱,生长迟缓,加上人为的乱
采滥伐,目前自然林木已残存不多,濒临灭绝。
国家已将海南降香黄檀列为二类保护植物。本文
用植物离体培养技术得到的结果可能有助于拯救、
保存、快繁这一濒危的植物。海南降香黄檀的离
体培养和快速繁殖尚未见报道。