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金缕梅的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第5期,2005年10月 637
收稿 2004-09-20 修定   2005-04-28
资助  江苏省农业三项工程项目[SX(2002)073]。
*通讯作者(E-mail: jwu4@njfu.edu.cn, Tel: 025-85427185)。
1 植物名称 金缕梅(Hamamelis mollis Oliv.)。
2 材料类别 浙江龙王山自然保护区采收的当年健
康成熟的种子。
3 培养条件 种子萌发培养基:(1)MS0;诱导培养
基:(2)MS+6-BA 1.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1+
2,4-D 0.1;增殖培养基:(3)MS+6-BA 0.2+NAA
0.1,(4)MS+6-BA 1.0+NAA 0.1;壮苗培养基:(1)
MS0;生根培养:(5)1/2MS+KT 0.1+NAA 0.6,
(6)1/2MS+6-BA 0.1+NAA 1.0。培养基(1)~(4)附
加蔗糖30 g·L-1,(5)和(6)附加蔗糖20 g·L-1,琼脂
为6.5 g·L-1,pH 5.8。培养温度(25±1)℃,种子
萌发培养和生根培养的前期进行暗培养,其余阶
段均照光,光照时间 12 h·d-1,光照度为 2 500~
3 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 种子萌发培养 选取当年8月份采收的成熟金
缕梅种子,剥去种皮,按常规表面灭菌后,剥
取种胚,接种于培养基(1)上,黑暗培养。3 周
后,发芽率为 9 0 % 。
4.2 愈伤组织诱导培养 取幼苗的下胚轴或真叶作
为材料,接种于培养基(2)中。1 周后,材料的
切口处变得不规则;2 周后,有微小突起产生,
呈浓绿色至淡绿色;1 个月后,有米粒大小的嫩
绿色芽尖冒出。5~6 周后,需更换新的培养基,
否则芽尖逐渐枯萎,直至全部死亡。
4.3 分化增殖培养 切下诱导产生的芽尖接种于培
养基(3)、(4)中,使其产生丛生芽。接种于(3)中的
幼苗2周后增殖系数约为4~5,苗高约1.5~2.0 cm;
而接种于(4)中的增殖系数可高达 8~12,苗高约
0.2~1.7 cm,但苗的生长势却明显弱于在(3)中增殖
的幼苗,易玻璃化,成活率低。分化增殖培养后
将高3~4 cm、具 4~5片嫩叶的幼苗经过培养基(1)
壮苗培养 2 周,以备生根。
4.4 生根及移栽 将壮苗后的幼苗接到培养基(5)、
(6)中诱导生根。暗培养10 d 后,转到1/2MS0 中
光照培养。接种于培养基(5)中的苗2周左右根开
始萌发,1 个月后根系发育良好,根长 1~2 cm,
每株根数4~5 条,生根率约80%。而接种于(6)中
的幼苗茎基部切口处长出许多愈伤组织,且需20 d
根才开始萌发,1个月后平均根长0.8~1.2 cm,其
中部分根从愈伤组织边缘长出,移栽后不能成
活。如果不经暗培养,1 个月后生根率仅为 10%
左右。这可能是因为可见光对生长素有破坏作
用,导致根诱导期光照抑制生根,所以一定时长
的黑暗能促进金缕梅不定根的形成。移栽前,将
瓶盖打开,室温下炼苗3 d 后,取出试管苗,洗
净。移栽到准备好的苗床(2/3 土、1/3 珍珠岩或
蛭石)上,保持温度20~25℃,湿度85%~90%,适
当遮荫,成活率达 85% 以上。4~5 周后即可带土
移 栽 。
5 意义与进展 金缕梅是金缕梅科金缕梅属的小乔
木或灌木,我国仅一种。其花形奇特,黄色细
长花瓣宛如金缕。秋叶常变成黄色至红色,为著
名观赏树木之一。种子难发芽,多用分根繁殖。
采取组织培养法进行金缕梅的快速繁殖,建立从
离体胚萌发的幼苗到丛生芽生根的无性繁殖体系,
有利于提高金缕梅种子的利用率,扩大繁殖系
数。本文结果可对金缕梅走向工厂化生产有一定
的参考价值。金缕梅组织培养与无性繁殖尚未见
报 道 。
金缕梅的组织培养
张启香1 方炎明1,* 胡恒康2 黄绍辉1
1 南京林业大学森林资源与环境学院,南京 210037;2 金陵科技学院,南京 210038
Tissue Culture of Hamamelis mollis Oliv.
ZHANG Qi-Xiang1, FANG Yan-Ming1,*, HU Heng-Kang2, HUANG Shao-Hui1
1College of Forestry Resources and Environment, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China; 2Jinling College of
Scientific Technology, Nanjing 210038, China