全 文 ：植物生理学通讯 第 4 卷 第 1 期 , 20 08 年 2 月
星星草质膜型 N a们压+ 逆向转运蛋白基因的克隆和特性分析
程玉祥 *
东北林业大学园林学院 , 哈尔滨 15 0 0 4 0
提要 : 用 R T 一PC R 及 R A C E 方法从盐生植物星星草中分离了 N a+ fH 十 逆向转运蛋白基因的 c D N A (P ts o s] , G en B an k 登录
号 E F44 0 2 9 1) , 尸ts o s z 的 e D N A 长度为 3 77 5 b p , 5 , 非翻译区为 69 bp , 3 ’非翻译区为 2 92 b p , 开放J闷读框为 3 4 14 b p ,
编码 1 137 个氨基酸 。 氨基酸同源性分析表明 , R SO SI 与小麦 、 水稻和拟南芥质膜型 N a+ 舰+ 逆向转运蛋白的一致性分别
为 88% 、 79 % 和 6 % 。 预测分析表明 , Pts 0 SI 具有 1 个跨膜结构区域 , 基因组 D N A 的 Sou the m 分析表明 尸tS OSI 是单
拷贝基因 。 半定量 R T 一Pc R 结 果显示 , 尸tS OSI 的 m R N A 受盐胁迫上调表达 , 暗示 尸tS 口S1 可能在星星草较强的抗盐碱能
力中起作用 。
关键词 : 星星草 ; 质膜型 N a+ /H + 逆向转运蛋白基因(S 0 5 ] ); 基因克隆 ; 盐胁迫
C lo n in g a n d C h a r a c te r iz a tio n o f Pla sm a M e m b r a n e N a们匡+ A n tiPo r te r G e n e
fr o m P u e e in elli a te n u价o ra (Tu r c z . ) S c r ib n . et M e r r.
CH EN G Yu
一
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e g e of La n ds eaP e A理h ite c tu re , NO rth e a st Fo re st尽 Un iv e rs i抄
,
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A b str a c t : A Pla sm a m e m br an e N a
+爪 + an tiPo r te r g e n e (P tS O SI , G e n B a n k a c e e ssio n N o . EF4 4 0 2 9 1) w a s 15 0 -
la te d in ha lo Ph yte P u e e in e llia te n u 价o ra by R T- PC R an d R A C E . T he P tS O S I e D N A w a s a le n g th o f 3 7 7 5 bP
in e lu d in g s
’ u n tr an sla te d r eg io n o f 6 9 b P
,
3
’ u n tr an sla ted re g io n o f 2 9 2 bP w ith Po ly A
,
a n d an o Pe n re a d in g
fr a m e (O R F) o f 3 4 1 4 bP e n e o d in g a Pr o te in o f 1 13 7 am in o a eid s
.
It sho w e d b y m u ltiPle se q u en e e a lig n m e n t
a n alysis tha t th e PtS O S I w er e 88 %
,
7 9 %
,
a n d 6 6 % id e n titie s in a m in o ae id s to Pla sm a m e m b ra n e N a
+
/H
+
a n tiPo rt e r g e n es fr o m Tr itie u m a e stiv u m
,
O州z a sa tiva a n d A ra b idop sis tha lia n a , re sPe c tiv e ly . TMH MM Pr e -
d ie tio n sh o w e d 1 1 tr an sm e m br a n e d o m a in s o fPtS O S I
, a n d PtS OS I w a s o n e
一 c o Py g en e b y g e n o m ie So u the rn
a n a lysis
.
S elni
一
q u a n tita tiv e R T- PC R a ssa y r e v e ale d th at P tSO SI w a s sig n ifi e an tly u P
一r eg u la te d in P u c e in ellia
te n u l]7
o ra se e dlin g s u n d er sa lt str e ss
.
It su g g e ste d tha t PtS O S I m ig h t Pla y a r o le in hi g hl y alk a lin e a n d sa lin e
to le r a n e e s o fP u c e in e llia te n u lj7
o ra
.
K e y w o rd s : P
u e c in e llia te n u狂7o ra ; Pla sm a m em b r an e N a +肚 + an ti Po rte r g en e (5 0 5 ] ): g e n e c lo n in g ; sa lt str e ss
土壤中 N a+ 盐过多会引起植物体内离子不平
衡 、 水分亏缺和离子毒害(T e s te r 和 D a V e n p o r t
2 0 0 3 ; Z h u 2 0 0 3 ; S e r r a n o 和 R o d rig u e z 一N a v a rr o
2 0 0 1 )
。 对此 , 植物体内会形成一些调节适应机
制以保持胞质内较低的 N a+ 浓度 。 植物降低细胞
内 N a + 浓度的方式有 : 离子的选择性吸收 、 减少
N a+ 的吸入 、 N a+ 的区隔化和 N a+ 的外排 (N iu 等
19 9 5 )
, 其中 N a + 的外排和区隔化是由 N a + /H + 逆向
转运蛋白调节的 。 植物体中 N a+ /H + 逆向转运蛋 白
分为液泡型和质膜型两类 , N a+ 区隔化是指液泡
膜上的N a+ 肚 +逆向转运蛋白用液泡膜上 H 十 一A TP as e
和 H 十 一 焦磷酸酶(H + 一PPas e )建立起跨膜质子电势差
作为驱动力 , 将 N a+ 区隔化后进入液泡 : 质膜型
N a+舰十 逆 向转运蛋白参与植物的 N a+ 外排 , 将 N a+
运入到胞外(B lu m w a ld 2 0 0 0 ; A p se 和 B lu m w a ld
2 0 0 7 )
。
S h i等(2 0 0 0 , 2 0 0 2 )报道 , 拟南芥质膜型
N a+ 旧‘ 逆向转运蛋白(A tS O S I)行使 N a+ 外排功能 ,
并控制 N a+ 长距离运输 。 过量表达的遗传转化体
或基因突变体的抗盐生理分析表明 , 液泡型或质
膜型 N a+ / H + 逆向转运蛋白可调节植物的耐盐能力
(A p se 等 1 9 9 9 ; z h a n g 等 2 0 0 1 ; o h ta 等 2 0 0 2 ;
Bri n i等 2 0 0 7 ; S hi 等 2 0 0 0 , 2 0 0 3 : M art in e z 一A tie n z a
等 2 0 0 7 )。 但盐生植物的质膜型 N a+ / H 十 逆向转运
收稿
资助
2 0 0 7
一
1 0
一
2 1
黑龙江省自然科学基金(C 2 O05 1 8) 和哈尔滨市青年科学
研究基金(2 0 0 5 A FQ x J0 2 4 ) 。
E
一
m a il
: e he n g yu x ia n g l ll @ s in a
.
c o m
.
c n ; T e l
:
0 2 1
-
5 4 9 2 4 1 4 2
植物生理学通讯 第 44 卷 第 l期 , 20 0 8 年 2 月
蛋白基因和特性的报道不多 。
星星草属禾本科碱茅属植物 , 广泛分布于我
国东北地区的盐碱地 , 是盐碱地植被恢复的先锋
物种 , 其所具有的极强耐盐碱特性己受到人们的
广泛关注(p e n g 等 20 04 ; W a n g 等 2 00 7 )。 本文克
隆了星星草的质膜型 N a+ / H + 逆向转运蛋白基因
e D N A (PtS OS I
,
G e n B a n k 登录号 EF4 40 29 1) , 并
分析了其特性 。 这对进一步了解 尸tS OSI 的功能及
其与星星草抗盐碱能力之间的关系可能具有一定的
参考意义 。
材料与方法
星星草尸u c c in e llia re n u ifo lia (T u re z . ) S e d b n .
et M er r
.
]的培养和逆境胁迫处理时 , 将其种子播
于带蛙石和珍珠岩(l : l) 混合成培养基质的营养钵
中 , 置于人工气候室培养 。 培养条件为 : 2 4 一2 8
oC
、 光照强度 120 林m o l·m 一2 · s 一’和光照 16 h ·d 一’、 相
对湿度 6 0 % 。 生长至 30 d 时 , 收取一部分星星
草幼苗用于 R NA 和基因组 D N A 提取 。 另一部分
幼苗进行 NaC I胁迫处理 , 分别将长有幼苗的营养
钵浸在20 ~ ol. L
一’N aCI 溶液和蒸馏水(用作对照)
中, 胁迫处理 2 4 h 后液氮速冻 , 保存于 一 8 0 ℃中
备 用 。
总 R N A 分离用 T riz o l试剂(In v itr o g e n 公司) ,
总e D N A合成用T a KaR a R NA LA PCR TM 儿t (AM v )
V e r 1
.
1 反转录试剂盒(大连 T aK aR a 公司)。
尸tS OSI 完整编码区的 cD N A 分离时 , 先比较
G e n B a n k 数据库 中水稻(A Y 7 8 5 1 4 7 ) 、 小麦
(A Y3 269 5 2 )及拟南芥(AF 256 22 4 )质膜型 N a + /H + 逆
向运输蛋白基因 c D N A 保守同源序列 , 根据保守
同源序列设计简并引物 : U , , T e C C (T )T A (G )-
A T G A AT G AC (T )G G G AC ; D ,
,
AC C(T )A A (G )A
-
(T )G CA CT竹CCT G CCA 。 PCR 扩增出 P tS OSI 的
保守核心片段 。 扩增的保守核心片段 c D N A 插入
到 pM D 18 一T 载体(大连 T a K a R a 公司), D N A 序列
测定由大连 T a K a R a 公司完成 。 Pt S OSI 完整编码
区 cD N A 的获得采用 cD N A 末端快速扩增法(r ap 记
a m Plifi eati o n o f e D N A e n d s
,
R A C E )
,
R A C E 用 5 , -
Fu ll R a ee K it和 3 ’一Fu ll R ae e K it (大连 T aK a R a 公
司)。 5 ’ R A C E 的引物 : G T G C T G T o A A G A (5 ’端
磷酸化修饰) ; 5 1 , TCAGT A CT A T G G c n 五五x 刀T ;
T C A T A G A G A T T T C A C T T A C T C T : A Z
,
G TC CC G T CA T T CA T CA G G G A
。
3
’
R A CE 的弓!
物 : p l , T G G T G C A T T G T T T C T T C A T T ; p Z ,
G T p 门℃CC月引〔ACG AC 。 尸巧6客2完整编码区cD NA
扩增引物 : F , , CA G CA C e TT T G e e T C G e e C C ;
R I
,
AT AG G G AT A TG CACAAACA G CG
。
基因组 D N A 分离采用 CT AB 法 。 S o uthe m 杂
交参照 Li u 等(2 0 07 )文中的方法 。 取 10 林g 基因组
总 D N A , 分别用 P s tl、 E c o R I 、 S a e l单酶过夜酶
切 , 酶切产物琼脂糖凝胶电泳 , 采用毛细管法转
移 D N A 到H ybo n d 一N + 尼龙膜(A m er sham 外an a cia
公司) ; 用紫外线照射法交联 D N A 于尼龙膜上 ,
膜用D IG 标记的尸tS 口S1 完整编码区的D N A 探针于
50 oC 杂交 16 h ; 杂交后膜先用 Z x SSC 、 0 . 1% S D S
于室温下轻摇清洗 5 m in , 重复 1 次 , 再用 o . lx
S SC
、
0
.
1% S D S 于 6 8 oC 下轻摇清洗 15 m in , 重
复 1 次; 洗涤后膜用 CD P一St ar TM 试剂(R oc h e 公司)
覆盖 , 杂交信号从 Im ag eMas te r V D S 一c L 化学发光
成像系统(A m e rsh a m Ph arm ae ia 公司)获得 。
半定量 R T 一Pc R 时 , 以相同量总 R NA (l 陀)
合成 。D NA , 合成的 c D N A 稀释 20 倍后作为模板 ,
进行半定量 R T 一PC R 。 引物为 : G G A A CT G G T A -
尸
K籽IC 人蚁工犯和 A G TCT CA TG G A TA A CCG CA G 。
p C R 扩增体系为 10 0 林L , 循环数为 2 5 。
生物信息学分析时的 B LA S T 检索用 N CB I在
线软件(http : l/ w w w . n e b i. n lm . n ih . g o v : /B L A ST /) ,
TM HMM Se r v e r v 2
.
0 软件(h ttp :l w w w . e bs . d tu . dk/
se r v ic e s/ TM HMM
一
2
.
0 / )预测 P tso s l跨膜结构区
域 , 氨基酸序列同源性分析和系统进化树分析用
e lu sta l
一
x 软件(1 . 8 3 )和 T a g ld e n t l 具(h ttp : zzu s .
ex p a sy
·
o rg/t o o ls/t吧id en t. h tn il )预测理论分子量和等
电点 , PtS O S I 在细胞内的定位预测用 PS O R T
(h ttP:/ /w o lfP so rt
.
o rg / )
。
实验结果
1 星星草几S口S1 完整编码区 c D NA 的分离
根据水稻 、 小麦及拟南芥质膜型 N a+ 肚 + 逆向
运输蛋白基因保守同源序列设计简并引物(u : 、
D 小 以体外反转录合成的星星草总 c D N A 为模
板 , PC R 扩增出星星草 Pt S口SI 保守核心 D N A 片
段 , 核心片段经 D N A 测序为 1 9 2 9 b p 。 用 p ts o SI
A ‘
,
C A A A G C T C C A A G T G A A A C T ; 5 2
, 保守核心片段的已知序列 , 设计引物分别进行 5 ‘
植物生理学通讯 第 4 4 卷 第 1 期 , 2 00 8 年 2 月 6 l
R A C E
、
3
’
R A C E
。
5
’
R A C E 扩增产物经 D NA 测
序为 6 0 2 b p , 3 ’ R A c E 扩增产物经 D N A 测序为
1 28 4 bP
。 把这三部分序列拼接在一起 , 得到带
有完整编码区的星星草尸tS 口SI 的 。D N A 序列 。 我
们又根据 尸ts o sz 拼接的序列设计引物(F , 、 R l) ,
PCR 扩增出约 3 . 6 kb 的特异条带(图 l) , 经 D N A
测序序列和拼接序列相同。 至此 , 获得了星星草
尸rso sz 的。D N A 序列 3 7 7 5 b p (图 2) , 其序列登
录在公开的 G e n B an k 数据库上 , 基 因序列登录号
3
.
0 kb—2 . 0 k b—1 . 5 kb—
0
,
5 kb
图 1 星星草尸tS 口SI 完整编码区的 c D N A 扩增产物
Fi g
.
1 PC R Pred u et of the
c D N A e汉lin g P巧0 5少加m P. te nu如ra
M
: 标准 D N A 分子量 : 1 : P tS O S I 的 c D N A 扩增产物 。
图 2 星星草 尸tS 口5 1 基因 。D N A 核普酸序列及其推测的氨基酸序列
Fig Z eD N A n u e le o tid e s e qu e n c e s a n d d e d u c e d a m in o a e id se q u e n c e s o fPtS O S I fr o m p
.
te n u 以肠ra
划线部分为生物学软件预测 Pt S O S I 蛋白质存在的跨膜区域 , 一共 1 个 , 分别标记 为 T M I 一T M l l 。
植物生理学通讯 第 4 卷 第 1 期 , 20 08 年 2 月
为 E F44 0 2 9 1 , 氨基酸序列登录号为 A B O 3 2 6 36 。
2 几5 05 1 完整编码区的 cD N A 序列分析
星星草尸tso s了的开放读码框(o p e n r e a d in g
fr a m e
,
o R F)长度为 3 4 14 bp , 编码 1 1 3 7 个氨
基酸组成的多肤 , 理论分子量为 1 2 5 . 5 k D a , 等
电点为 6. 4 8 。 跨膜区域预测分析表明 PtS OSI 蛋白
含有 1 个跨膜域(图 2) 。 推测氨基酸同源性表明 ,
星星草 R SO SI 与己报道小麦 、 水稻 、 拟南芥 N a+ /
H
+ 逆 向转运蛋白具有较高的同源性 , 分别为
88 %
、
7 9 % 和 66 % (图 3) 。 系统进化树分析表明
星星草R SOSI 与质膜型N a+ 肚十逆向转运蛋白如小
麦 T a SO S I 、 水稻 0 5 5 0 5 1 、 拟南芥 A tSO S I 、 酵
母 N hal p 等的亲缘关系较近 , 而与液泡膜型 N a+ /
H
十 逆向转运蛋白如 : 水稻 O S N H X I 、 拟南芥
图 3 星星草 、 小麦、 水稻及拟南芥的 5 0 5 1 氨基酸序列同源性比对
F ig
.
3 M u lti Ple se q u e n e e al ignm
e n t o f 5 0 5 1 fro m P
.
te n u价o ra , w he at , ri e e a n d A ra bldo Psis Plan ts
* 表示该位置序列完全一致 ; : 和 . 分别表示该位置序列高度相似和相似 ; Pt S O S I 、 T a s o s l 、 0 5 5 0 5 1 和 A ts 0 S I 的 G e n B a n k
登录号分别为 : E F4 4 0 2 9 1 、 A Y 3 2 6 9 5 2 、 A Y 7 8 5 1 4 7 和 A F 2 5 6 2 2 4 。
植物生理学通讯 第 4 4 卷 第 1 期 , 2 00 8 年 2 月
A tN H X I等的亲缘关系较远(资料未列出)。
3 PtS O SI 基因特性
为了了解尸tS OSI 基因在星星草基因组中的拷
贝数 , 我们分离了星星草的基因组 D NA , 以 D IG
标记 尸tS O SI 完整编码区 。D N A 的探针进行基因组
D N A S o u th e rn 杂交 , P tS OS I基因 e D N A 序列中各
有 l 个 P stl、 S a e l酶切位点 , 而没有 E e o R I酶切
位点 , 若是单拷贝则应分别出现 2 条带 、 2 条带
和 1 条带 。 杂交的结果(图 4) 表明Pt S口5 1 基因在
星星草基因组中是单拷贝基因 。
半定量 R T 一PC R 分析显示 , 星星草的根和叶
组织中尸巧05 1 基因川只NA 表达水平基本上没有差
别(图 5) , 表明尸tS O SI 在星星草中没有呈现明显
的组织特异性表达 , 这与其所持有的向细胞外排
N a+ 功能是一致的。 但受 N aCI 盐胁迫的星星草叶
和根中尸tS OS I 基因 m R N A 表达水平均明显增加
(图 5) , 这表明尸tS 口SI 基因表达受 N aCI 盐胁迫上
调 。
讨 论
4
.
3 kb -
2
。
3 kb -
2
.
0 kb -
0
.
6 kb -
PS t l E
e
oR I Sa
e l
图 4 星星草基因 D N A 的 S o ut he m 杂交
Fig
.
4 S o u th ern h yb ri d iz a tio n o f g e n o m ie
D NA fro m P
.
te n u毋o ra
10 林g 基因组 D N A 分别 p s rl 、 E e o R I 、 S a 。 I单酶切 、 电
泳 、 转膜 , 膜用 D IG 标记的 Pr S O S I D N ^ 探针杂交 。
P tS侧刀
r RNA
叶 根
对照
叶 根
Na CI处理2 4 h
图 5 尸tS O S I 基因 m 只N A 表达的半定量 R T 一PC R 分析
Fl g
.
5 S elni
一
q u a n ti ta tiv e R T
一
PC R
a n al ys is o fP. ten
u价o ra
P tS O SI g e n e e x Pre ss io n
本文以R T 一PC R 及R A C E 方法从盐生植物星星
草中分离了具有完整编码区的质膜型 N a 十/H 十 逆向
转运蛋白基因的 c D N A 。 生物信息学分析表明 ,
其氨基酸序列与高等植物中已知序列质膜型 N a+ /
H
+ 逆向转运蛋白基因(S 0 5 1) 的同源性较高 , 而与
液泡型 N a+ / H + 逆向转运蛋白亲缘关系较远 , 命名
为 尸tS O S I 。 预测分析表明 Pt S O SI 定位于细胞的
质膜 , 并且含有 1 个典型的跨膜区域 。 用半定
量 R T 一PC R 分析表明尸tS O SI 基因表达明显受 N aCI
盐胁迫上调 , 这表明所分离的 Pt SO SI 可能起细胞
内N a + 的外排功能 。 据报道 , 拟南芥质膜型 N a+ /
H
+ 逆向转运蛋白基因(A tS OSI )不仅控制拟南芥的
N a+ 长距离运输(S hi 等 2 0 0 2) , 在盐胁迫下还有保
护质膜上K+ 运输的作用(Qi 和 SPa ld ing 20 0 4 )。 Pe ng
等(2 0 0 4) 认为 , 星星草的抗盐胁迫是通过保持细
胞内高浓度的 K 十 进行的 。 我们推测 Pt SOS I基 因
也可能是通过保护质膜上 K ‘ 的运输 , 而增强星星
草抗盐碱能力的 。
拟南芥 A tN H X I 、 水稻 O sN H X I 等植物液泡
型 N a+ 爪 + 逆向转运蛋白基因已得到分离 , 北滨黎
(A tr ip lex g m
e lin i)A g N月X l (H a m ad a 等 2 00 1 ; o hta
等 20 2) 等盐生植物的液泡型 N a+ 肚+ 逆向转运蛋白
基因及其特性也有报道 。 转基因研究证明 , 转单
一液泡型N a+ /H + 逆向转运蛋白基因能够明显提高
植物的耐盐性(A pse 等 19 99 ; Z ha n g 等 2 0 0 1 ; Bri n i
等 2 0 0 7 )。 但植物 自身液泡的容量毕竟有限 , 质
膜上 N a 十 的外排作用可 能对植物耐盐性的作用更
大 。 迄今 , 在高等植物中尚未发现 N a+ 一A T Pas e
基 因 , 有人认为 , 植物 N a+ 胞外排出机制可能与
质膜 N a+ 爪十 逆向转运蛋白有关 。 盐敏感植物拟南
芥的 A ts o S I 功能报道 已表 明了这一 点(S hi 等
2 00 0
,
2 0 0 2
,
2 0 0 3 )
。 但盐生植物质膜上 N a + /H +
逆向转运蛋白功能是否与盐敏感植物的一样 , 还
不清楚 。 此外 , 了解盐生植物质膜型 Na+ /H 十 逆向
转运蛋白功能和采用转基因方法提高植物抗盐性 ,
可能是培育抗盐作物品种的一条途径 。 用过量表
达 尸tS 口S1 、 反义 R N A 抑制 尸tS O S I表达 、 尸才万口sj
与盐敏感植物(如拟南芥)的A tS 口S! 结构和功能之
间差异等方法研究 尸才5口S1 在星星草抗盐碱中的作
用正在进行中 。
植物生理学通讯 第 4 4 卷 第 1 期 , 2 00 8 年 2 月64
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m a lie e n z ym e
g e n e in rie e (O ry z a sa riv a L) 15 in d u ee d by e n v ir o n m e n ta l
stre sse s : o v e r 一e x Pre s sio n o f the g e n e in A ra b id 0 Psis eo n fe r s
s a lt an d o sm o tie s tre s s to ler a n e e
.
Plan t M o l B io l
,
6 4 : 4 9 ~
5 8
MaI’t in ez 一A tie n z a J, Jia n g X Y , G are ia d eb las B , M e n d o z a l, Zh u JK ,
Pard o JM
,
Q
u in re r FJ (2 0 0 7 )
.
C o n se rv a tio n o f the sa lt o v e rly
se n sitiv e Pathw ay in r ie e
.
Pla n t Ph ysio l
,
14 3 : 10 0 1 ~ 10 1 2
N iu X M
,
B r e ssa n R A
,
H a se g a w a PM
,
Pa rd o JM (19 9 5 )
.
Io n ho
-
m e o sta sis in N a C I str e s s e n v ir o n m e n ts
.
Plan t Phy sio l
,
10 9 :
7 3 5 ~ 7 4 2
o hta M
,
H a yas hiY
,
N ak a shima A
,
H am
a d a A
,
T an ak
a A
,
N ak
a m ur a
T
,
H a ya k a w a T (2 00 2 )
.
In tr o d u e tio n o f a N a
+
IH
+ a n tiPo rte r
g e n e fr o m AP
r
iP l
e x g m e lin i e o n fe r s sa lt to le ra n e e to rie e
.
FE B S L ett
,
5 3 2 : 2 7 9 ~ 2 8 2
Pe n g Y H
,
Z hu YF
,
Mao YQ
,
W an g SM
,
Su W A
,
T a n g Z C (2 004 )
.
A lk aligr ass re sis ts sa lt stre s s thr o u g h hig h [K
+
] a n d a
n e n d o
-
d erm is b ari e r to N a
+
.
J E x P B o t
,
5 5 : 9 3 9 ~9 4 9
Qi z
,
s pa ld in g E p (2 0 0 4 )
.
p r o te e tio n o f pla s m a m e m bra n e K
+
tra n s Po rt b y the sa lt o v e r ly se n s iriv e l N a
+
IH
+ a n tiPo r te r
d u r in g sa lin ity str e ss
.
Pla n t Ph ys io l
,
13 6 : 2 5 4 8 ~ 25 5 5
Se rra n o A
,
R o d ri g u e z
一
N a v ar
o A (2 0 0 1 )
.
Io n h o m e o s ta sis d u ri n g
sa lt stres s in Pla n ts
.
C u r O Pin C e ll B io l
,
1 3 : 3 9 9~4 04
S hi H Z
,
Is hita n i M
,
K im C
,
Z h u JK (2 0 0 0 )
.
T h e A ra b id op
sis
tha lia 月a sa lt to le ra n e e g e n e 5 0 5 1 e n e o d e s a Pu ta tiv e N a + /H
+
a n tiPo rte r
.
Pr o e N a tl A e a d S e i U S A
,
9 7 : 6 8 9 6 ~6 9 0 1
S hi H Z
,
L e e BH
,
W
u S J
,
Z h u JK (2 0 0 3 )
.
o v er e x Pre ss io n o f a
Plas m a m e m b r a n e N a
+
/H
+ a n tiPo rt e r g en e im Pr o v e s sa lt to l
-
er an e e in A ra bid o Psis th a lia n a
.
N a t B io tee hn o l
,
2 1 : 8 1 ~ 8 5
Sh i H Z
,
Q
u in te r o FJ
,
Pa rd o JM
,
Z hu JK (2 0 0 2 )
.
T he Pu tativ e
Pla sm a m e m b ra n e N a
+
/H
+ a n tiPo rte r 5 0 5 1 e o n tr o ls lo n g
-
d istan e e N a
+ tra n sPo rt in Pla n ts
.
Plan t C e ll
,
14 : 4 6 5科7 7
T e ste r M
,
D a v e n Po rt R (2 0 0 3 )
.
N a
+ to ler an e e an d N a
+ tra n sPo r t
in h ig he r Pla n ts
.
A n n B o t
,
9 1 : 5 0 3~5 2 7
W a n g Y C
,
Chu YG
,
Liu G F
,
W
a n g M
一
H
,
Jian g J
,
H o u YJ
,
Qu G Z
,
Y an g C P (2 0 0 7 )
.
Id e n tifi e atio n o f e x Pre s se d s eq u e n e e ta g s
in a n a lk a li g ra ss (P
u c e in e llia re n u 价o ra ) e D N A libra ry . J
Pla n t Phy sio l
,
1 6 4 : 7 8一8 9
Z ha n g H X
,
H o d so n JN
,
W illi
am s JP
,
B lu m w ald E (2 0 0 1 )
.
E n g i
-
n ee ri n g s alt
一 to le ran t B ra s sica Plan t
: e har
ete ri z atio n o f yie ld
an d se e d 0 11 q u a lity in tra n s g en ie Pla n ts w ith in e re a sed v a e u
-
o lar so d iu m a e e u m u la tio n
.
Pr o e N a tl A e a d S e i U S A
,
9 8 :
1 2 8 3 2 ~ 1 2 8 3 6
Z h u JK (2 0 0 3)
.
R e g u la tio n o f io n ho m e o sta s is u n d e r sa lt stre ss
.
C u r r O Pin Pla n t B io l
,
6 : 4 4 1礴4 5