免费文献传递   相关文献

钟萼木的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第43卷 第1期,2007年2月 127
收稿 2006-10-31 修定  2006-12-28
资助 黔南州科技局计划项目(2004ny04)。
*E-mail:guozhiyou8888@126.com;Tel:0854-
8992012
钟萼木的组织培养和快速繁殖
郭治友*,龙应霞,肖国学
黔南民族师范学院生命科学系,贵州都匀558000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Bretschneidera sinensis Hemsl.
GUO Zhi-You*, LONG Ying-Xia, XIAO Guo-Xue
Department of Life Science, Qiannan Normal College for Nationalities, Duyun, Guizhou 558000, China
1 植物名称 钟萼木(Bretschneidera sinensis
Hemsl.),又名伯乐树。
2 材料类别 外殖体自三都水族自治县尧人山国家
森林公园引种的二年生实生苗春芽。
3 培养条件 (1)丛生芽诱导培养基:MS+6-BA
2.5 mg·L-1 (单位下同) ;(2)丛生芽增殖培养基:
MS+IBA 1.0+6-BA 2.0+ZT 0.2;(3)壮苗培养基:
MS;(4)生根培养基:1/2MS+IBA 1.5。以上培
养基均添加30 g·L-1白砂糖、7 g·L-1琼脂条、3 g·L-1
活性炭,pH为5.6~5.8。培养温度为28 ℃,光强
约40 mmol·m-2·s-1,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 外殖体灭菌 以钟萼木春芽的顶芽为外殖体,
长约 3 cm。在无菌超净工作台上,先用 75% 酒
精浸泡8 s,后用 0.1% HgCl2 消毒 6~8 min,再
用无菌蒸馏水漂洗 5~6 次。将灭菌好的外殖体取
出,放在消毒好的不锈钢小盘中备用。
4.2 丛生芽的诱导 用解剖刀将备用外殖体切口处
重新斜切切口,接种在培养基(1)上进行培养。3 d
后,可见叶形状变化,芽尖张开;7 d 后,在
叶面,特别是切口处出现较多的愈伤组织,诱导
率为 86%;15~30 d,愈伤组织逐渐增多;40 d
后开始出现丛生芽,芽分化率约达 7 4 %。
4.3 丛生芽的增殖与促壮 将愈伤组织和丛生芽分
成几小块,接在培养基(2)上。40 d 后,分化出
的丛生芽十分密集,芽多、短小,增殖系数达
3.2 倍。将愈伤组织和芽分离,愈伤组织转接于
培养基(2)上增殖,达到快速繁殖的目的;芽接
入培养基(3)进行丛生芽的促壮培养,10 d后,逐
渐伸长,茎逐渐变粗。
4.4 根的诱导与定植 将壮苗接种于培养基(4)上,
32 d后小苗出现淡绿色辐射状根,45 d后最长达
2 cm,生根频率约为 65%。待至少有 3 条根长达
2.5 cm以上时,转入炼苗阶段。炼苗采用逐步打
开瓶口让苗适应的方法,在人工控制室内进行,
保持室温在 28 ℃左右,湿度在 90% 以上。炼苗
7 d 之后,取出,洗净培养基,栽植在以蛭石和
细河砂(3:2)混合的基质中,保温、保湿,与炼
苗时温度和湿度保持一致,成活率达 7 3 %。
5 意义与进展 钟萼木隶属于钟萼木科钟萼木属(或
伯乐树科伯乐树属),为单型科植物,只有伯乐
树 2 个种,是古老的第三纪孑遗树种,为我国所
特有。在1999年 8月国务院颁布的国家重点保护
名录(第一批)中,被列为一级保护物种。分布于
云南、四川、贵州、广东、江西、湖南、浙
江等省和广西壮族自治区。生长在海拔500~1500 m
山林中,现种群数已经很少,每个分布点仅有几
百株。是高大落叶乔木。奇数羽状复叶互生;总
状花序顶生,长 20~42 cm,花序轴密被锈色柔
毛。花两性,辐射对称,直径约 4 cm;花萼钟
形,五齿裂;花瓣 5 枚,倒卵形,粉红色,着
生于萼筒上部;蒴果近球形,橙红色。叶、花
和果十分美观,是一种珍贵的园林绿化树种。钟
萼木还是重要的资源植物,其树皮入药,有祛风
活血作用。在贵州省三都水族自治县,它是水族
珍贵的食用植物,采食部位为嫩芽,味极鲜,可
作为野菜资源开发。自然情况下,其种子的萌发
率约为8%,本文采用植物组织离体培养技术得到
的结果,对挽救濒危树种和规模化种苗生产可能
有一定的参考价值。钟萼木的组织培养和快速繁
殖尚未见报道。