全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第5期，2006年10月 905
异型兰的种子试管育苗
李桂双 陈之林 曾宋君 吴坤林 段俊*
中国科学院华南植物园，广州 510650
In vitro Seed Germintion of Chiloschista yunnanensis Schltr.
LI Gui-Shuang, CHEN Zhi-Lin, ZENG Song-Jun, WU Kun-Lin, DUAN Jun*
South China Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China
收稿 2006-03-16 修定 　2006-05-24
资助 中国科学院知识创新工程重要方向项目(kscx2-sw-319)和
中国科学院华南植物园前沿项目(20023301)。
*通讯作者(E-mail: Duanj@scib.ac.cn, Tel: 020-37252978)。
1 植物名称 异型兰(Chiloschista yunnanensis
Schltr.)。
2 材料类别 种 子 。
3 培养条件 种子萌发培养基：(1) MS；(2) 1/2MS
(大量、微量元素用量减半); (3) 3 g·L-1花宝1号
(美国Hyponex公司，N:P:K=7:6:19); (4) MS+100
mL·L-1 椰子乳；(5) 1/2MS+100 mL·L-1 椰子乳；(6)
3 g·L-1花宝1号+100 mL·L-1椰子乳；(7) 1/2MS+100
mL·L-1椰子乳+1 g·L-1蛋白胨；(8) 1/2MS+100 mL·L-1
椰子乳+1 g·L-1胰蛋白胨；(9) 1/2MS+100 mL·L-1椰子
乳+1 g·L-1酵母提取液。生根育苗培养基：(10) 3 g·L-1
花宝1号+2 g·L-1活性炭+100 g·L-1香蕉汁；(11) 3 g·L-1
花宝 1号 +2 g·L-1 活性炭 +2 g·L-1 蛋白胨。以上
培养基均附加MS培养基的维生素和肌醇成分、20
g·L-1 蔗糖、6 g·L-1 琼脂，pH 5.2~5.4。温度为
(25±2)℃，光强27~36 mmol·m-2·s-2，光照12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 开花时，选取异型兰不同个
体进行交叉授粉，取授粉后 6 个月的果实，自来
水洗净后，用70%酒精表面消毒30 s，再以0.1%
升汞溶液消毒 15 min，最后用无菌水冲洗 5 次。
将洗净的荚果放在灭菌滤纸上吸干水分后，用解
剖刀切开荚果，将种子散落到培养基上。
4.2 种子萌发和原球茎诱导 将种子接种到培养基
(1)~(9)上，2周后可见细小的原球茎形成，4周
后形成直径 1~2 mm 的原球茎。种子在各培养基
上均有萌发，但在(1)、(9)上萌发数量极少，(9)
上形成的原球茎褐化严重；(4)上约有 1/3种子萌
发，种子颜色深绿。这表明培养基的盐浓度过高
不利于异型兰种子的萌发，而酵母提取液不利于
原球茎的生长。培养基(2)、(3)、(5)~(8)上都有较
高的萌发率，其中(5)~(8)上的萌发率达到90%以
上，萌发率和萌发速度都较(2)、(3)高，这表明
添加椰子乳有利于种子萌发；(7)上形成的原球茎
颜色鲜绿，形态正常，较其他培养基上的大，这
表明添加蛋白胨有利于原球茎生长；(8)上形成的
原球茎颜色深绿，部分球茎分化形成类原球茎
团，少数有玻璃化现象。
4.3 成苗培养 将初代培养的原球茎接种到培养基
(10)、(11)上，在原球茎的顶端形成小的芽，基
部出根。在培养 4 周后可见，根生长旺盛而只有
少量芽产生，少数根进入培养基中，多数于培养
基表面生长，这种形态与野外植株相似。在(10)
上形成的根比较细，颜色黄绿色；而(11)上形成
较粗壮的根系，颜色鲜绿，更适合于育苗。
4.4 移栽 将培养瓶置于温棚中炼苗2周后，从培
养瓶中取出生根苗，洗净附着的培养基，将白水
苔用1 000倍多菌灵溶液浸泡1 h，挤干水分，包
裹出瓶苗根部，种植于直径 5 cm 小盆中。注意
保持适宜湿度，置于阴凉通风处栽培，期间不要
浇水，有利于新根生长和防止病害发生。2 周
后，移入温棚栽培，进行正常水、肥、药管理，
成活率可达 9 5 % 以上。
5 意义与进展 异型兰分布于我国云南的东南部和
南部，其形态独特；茎不明显，通常无叶，至
少在花期时无叶；根附生于树干上，根中具有叶
绿素，能进行光合作用；花色斑斓，有很高的
观赏价值，是一类珍奇的兰科植物。兰科植物的
种子在自然状态下极难萌发，其试管播种繁殖已
经成为兰花人工繁育的主要手段，并在野生兰花
的繁育和应用开发中起到重大的作用。异型兰的
无菌播种试管育苗尚未见报道。