全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第3期,2005年6月 337
紫雪花的组织培养与快速繁殖
黄君红* 郭志 钟炳辉
广东湛江师范学院生物系,广东湛江 524048
Tissue Culture and Rapid Propagation of Plumbago indica
HUANG Jun-Hong*, GUO Zhi, ZHONG Bing-Hui
Department of Biology, Zhanjiang Normal College, Zhanjiang, Guangdong 524048, China
收稿 2004-06-28 修定 2004-10-08
资助 湛江市科技攻关计划项目。
*E-mail:huangjunh@163.com, Tel: 0759-3183271
1 植物名称 紫雪花(Plumbago indica)。
2 材料类别 叶片。
3 培养条件 (1)愈伤组织诱导培养基:MS+6-BA
1 mg ·L-1(单位下同)+IBA 1;(2)增殖培养基:
MS+6-BA 3+IBA 0.1;(3)生根培养基:改良的White
(1/2硝酸钙)+IBA 0.1。以上培养基均加入30 g·L-1
蔗糖和6 g·L-1琼脂,pH 5.8~6.0。培养温度26~28℃,
环境湿度 70%~80%,光照度 1 200~1 500 lx,
光照时间8 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 启动培养 取紫雪花叶片,流水冲洗20 min后,
75%酒精表面消毒10 s,无菌水冲洗。然后用0.1%
升汞溶液浸 5 min,无菌水冲洗 5 次后,用消毒
滤纸吸干表面水分。将叶片切成 0.5 cm×0.5 cm
大小,接种于培养基(1)上。7 d 左右,叶片切
断面膨大,长出黄绿色小颗粒状愈伤组织,继而
逐渐变成绿色愈伤组织;25 d 时愈伤组织直径达
2~3 mm,40 d 直径达 0.8~1.0 cm。
4.2 增殖培养 将上述所获得的愈伤组织切成2~4
块,接种到培养基(2)上。15 d 左右愈伤组织明
显增殖,随着时间推移,愈伤组织分化出绿色的
芽点。诱导的愈伤组织及不定芽可重复接种于培
养基(2)上,25~30 d为 1个继代周期,增殖系数
可达6~8 倍(图 1)。
4.3 根的诱导 将培养基(2)中已长成的2~3 cm高
的健壮不定芽切割成单苗,接种到培养基(3)上。
7 d后,幼苗基部开始长出白绿色小根;20~25 d
后,培养基里的幼苗根数可达 20~35 条,根长为
3~6 cm 不等,根系粗壮,生根率达 100%,且
幼苗高挺健壮。
4.4 试管苗的移栽 将生根试管苗的玻璃瓶置于自
然光(避免太阳直接照射)下 7 d,然后取出小苗,
用无菌水洗干净培养基,种于阴棚内。紫雪花移
栽对基质要求不高,一般泥土即可。小苗移栽
后,注意保水、保湿、通风即能正常生长,移
栽成活率可达 95% 以上。
5 意义与进展 紫雪花又可称紫花丹、谢三娘,是
蓝雪科白花丹属多年生草本植物。为民间传统中
草药,含矶松素(plumbagin)等,有散瘀消肿、解
毒止痛之功效,对跌打瘀肿、肿瘤、阑尾炎、
肝炎等有较好的疗效。紫雪花开花鲜艳,花期长
(11 月 ~ 次年 3月),为红色穗状花序,有较高的
观赏价值。常以种子繁殖,但繁殖系数低,繁
殖速度慢,不能满足生产的需要。组培技术可能
是加快紫雪花快速繁殖的途径。紫雪花组培快繁
尚未见报道。
图1 紫雪花的不定芽