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灯盏花茎段的离体培养和植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月 467
灯盏花茎段的离体培养和植株再生
谢庆华1,* 吴毅歆2,**
1 云南师范大学生物资源技术研究所,昆明 650031;2 云南省农业科学院生物技术研究所,昆明 650223
In vitro Culture and Plantlet Regeneration of Stem Segments of Erigeron
breviscapus
XIE Qing-Hua1,* , WU Yi-Xin2,**
1Technological Research Institute of Biological Resource, Yunnan Normal University, Kunming 650031; 2Institute of Biotechnology,
Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming 650223
收稿 2003-09-01 修定   2004-05-17
资助  云南省省级农业产业化扶技项目。
  * E-mail:xqinghua@vip.sina.com,Tel:0871-5167053
** 通讯作者(E-mail:wyx680705@sina.com.cn,Tel:0871-
6720322)。
1 植物名称 灯盏花(Erigeron breviscapus)。
2 材料类别 当年生茎段。
3 培养条件 以MS为基本培养基。(1)芽诱导培养
基:MS;(2)芽增殖培养基:MS+6-BA 1 mg·L-1
(单位下同); (3)生根培养基:2/3MS+NAA 0.3。上
述培养基均添加 3% 蔗糖、0.5% 琼脂,pH 5.8。
培养温度为23~25℃,光照度为2 000 lx,光照
时间为12~14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 芽的诱导 采集野生灯盏花茎段,用自来水清
洗吸干后,在无菌条件下用 0.1% 升汞水浸泡 25
min,然后用无菌水清洗 2 次,每次 10 min,接
种到培养基(1)上。经过10 d左右分化出愈伤组织
且膨大(胚状体),10~15 d,膨大的愈伤组织分化
出丛生苗。
4.2 芽的分化 将丛生苗切成单株小愈伤块转到培
养基(2)上继代增殖。培养5 d,苗开始增殖,平
均每个小愈伤块发出1.9 个芽;20 d 后,小愈伤
块被芽丛覆盖,增殖倍数为4.5,丛生苗壮而绿,
生长健壮。
4.3 生根诱导 在增殖培养的丛生苗中,挑取健壮
的单株,切去愈伤组织,接种于培养基(3)上。苗
在第5 天能长出1~5条根,根长达0.2 cm,生根
率达 5 0 % ;随着时间的增加,培养基上的苗健
壮、高而绿,且根粗壮,20 d 后生根率达100%。
4.4 试管苗移栽 将生根后的试管苗从罐头瓶中取
出,用自来水将苗基部的琼脂洗净,移入温室中
苗盘内,盘内基质用 0.1% 甲醛溶液消毒。栽培
基质为腐殖土、珍珠岩按 3∶1 比例混合。盖塑
料薄膜保湿、遮阴 10 ~ 1 5 d,保持湿度 80 % ~
9 0 %,温度 2 5℃左右。幼苗迅速生长,木质化
程度不断增加,20 d后移栽大田。在云南楚雄市
富民镇的示范种植中,植株成活率达到 95%。目
前,首批移栽的灯盏花已经开始收割(图 1)。
5 意义与进展 灯盏花为菊科飞蓬属,短葶飞蓬多
年生草本野生植物。又称灯盏细辛、土细辛、地
顶草、双葵花,地朝阳等,是全株都可以入药
的传统中药材。其味甘温,具散寒解表、祛风
除湿、活血舒筋、消食积、解热止痛等功效。
其系列产品在治疗心血管疾病上疗效显著,有广
泛的国内外市场。近年来,由于野生资源破坏严
重,已难见成片的灯盏花,野生资源日益稀少,
不能满足当前市场的需求。而过去对灯盏花的研
究仅限于它的化学成分和药理作用方面,对繁殖
技术的研究报道甚少。目前的繁殖方法主要以分
株栽培和种子育苗移栽为主,这些方法繁殖速度
慢,成活率低,产量低,病虫害严重,不能满
足大面积药材栽培对种苗的需求。采用组织培养
和植株再生技术,可加快灯盏花繁殖速度,解决
药材供求矛盾,实现野生资源的保护和可持续利
用。有关灯盏花的组织培养尚未见报道。
图1 灯盏花组培苗开花期