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假马齿苋的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 6期,2008年 12月1162
假马齿苋的组织培养
李旭群 1, 李曦 1, 张奋鹏 2,*
1汕头市中医药技工学校, 广东汕头 515061; 2广东泽润制药有限公司, 广东潮州 515634
Tissue Culture of Bacopa monnieri (L.) Wettst.
LI Xu-Qun1, LI Xi1, ZHANG Fen-Peng2,*
1Shantou Chinese Traditional Medical Technical College, Shantou, Guangdong 515061, China; 2Guangdong Chinese Zerun Phar-
maceuticals Co., Ltd., Chaozhou, Guangdong 515634, China
收稿 2008-08-11 修定 2008-11-13
* 通讯作者(E-mail: zerunzy@126.com; Tel: 0768-6585288)。
1 植物名称 假马齿苋[Bacoba monnie ri (L. )
Wettst .], 又名白花猪母菜、白线草、蛇鳞菜。
2 材料类别 茎尖。
3 培养条件 启动脱分化培养基: (1) 1/2MS+6-BA 1.0
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1+3.0%蔗糖。增殖培
养基: (2) MS+6-BA 1.0+NAA 0.1+3.0%蔗糖; (3)
MS+6-BA 0.5+NAA 0.1+3.0%蔗糖; (4) MS+6-BA 0.25+
NAA 0.1+3.0%蔗糖。生根培养基: (5) 1/2MS+NAA
0.1+2%蔗糖。以上培养基均配制成液体, pH 5.8,
倒入三角瓶中成为浅层, 常规高压灭菌, 作静置培
养用。光照强度为 50~60 µmol·m-2·s-1, 光照时间
10 h·d-1; 培养温度为(25±1) ℃。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取冬春季节田间栽培的假马
齿苋植株, 移栽到小花盆中, 在室内种植, 浇水时注
意不要弄湿茎尖部分, 以减少带菌程度。3~4周后,
取其约 1 cm长茎尖, 在超净工作台内用 75%酒精
消毒 15 s, 再置于 0.1%的HgCl2中消毒 10 min, 用
无菌水冲洗 5~6遍。然后接入培养基(1)上。培养
基(1)液体量要少, 以外植体有部分露出液面为宜。
4.2 芽的诱导 外植体在培养基(1)上 2周后, 开始
愈伤化, 然后进一步分化而形成有密集芽点的芽团,
出愈率及分化率均为 100%; 其中有些芽点可继续
生长, 4周后最高可达 1 cm 左右。
4.3 试管苗的增殖 30 d后, 将诱导所得芽团, 接种
在培养基(2)~(4)上, 2周后均形成新的丛生芽, 其
在培养基(2)中芽密集, 形态畸形, 无法计数, 将其
移至培养基(4)中能恢复正常形态; 在培养基(3)中芽
点能进一步分化, 其中长度 1 cm以上的芽平均达
7~8个, 其余为幼小的芽体; 在培养基(4)中芽生长
迅速, 可形成 2~4 cm长的芽, 数量可达 10个以上,
部分芽的基部同时可长出 1~2 cm长的白色根系
3 ~ 5 条, 在液体中及露出液面生长。以后每隔
25~30 d继代 1次, 交替使用培养基(3)或(4), 以控
制其增殖及生长速度。当幼苗长至 2~4 cm、带
有 6~8个叶片时, 将其沿茎基部剪断, 接入培养基
(5)中, 进行生根培养。
4.4 生根与移栽 试管苗在培养基(5)上培养15 d左
右, 从小苗基部切口处产生3~5条根, 根长达2~3
cm, 生根率 100%。这些苗以及增殖过程中生根的
苗可进行移栽。幼苗成活容易。由于采用液体培
养, 省去了洗根过程。移栽时, 先打开瓶塞, 倒出
试管苗, 置于塑料筛上, 采用全自动间歇喷雾装置
保湿 1周, 然后移入素沙土中, 移栽后7 d内注意遮
荫。控制温度在 25 ℃左右, 湿度在 85%左右。3
周后, 成活率 100%。
5 意义与进展 假马齿苋为玄参科假马齿苋属水生
或湿地植物, 主要分布于热带和亚热带地区, 具有
提高记忆、镇静、抗癫痫和抗炎、镇痛、退烧、
强心等生物活性, 功效清热凉血; 解毒消肿, 其主要
化学成分为三萜皂苷类化合物(黄云秀和阳明福
2006)。现代药理研究表明假马齿苋对神经系统、
消化系统和血液循环系统等均有作用, 是一种有开
发潜力的药用植物(张嫡群等 2007)。繁殖假马齿
苋主要靠扦插, 但扦插材料也是药用部分, 造成资
源利用率不高, 总产量受到限制。用组织培养方法
繁殖, 可在短时间内生产大量的种苗。我们正准备
推向产业化生产, 以解决问题。假马齿苋的组织培
养尚未见报道。
参考资料
黄云秀, 阳明福(2006). 假马齿苋的化学成分和药理作用研究进
展. 中国新药杂志, 15 (9): 683~687
张嫡群, 梅和珊, 石晓伟(2007). 假马齿苋的生物活性及其临床研
究. 天然产物研究与开发, 19 (3): 524~528