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独角石斛的离体繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 3期,2004 年 6 月342
收稿 2003-06-27 修定   2003-10-20
资助  中国科学院知识创新工程重要方向项目(kscx2-sw-319)和
中国科学院华南植物所所长基金前沿项目(20023301)。
* 通讯作者(E-mail:duanj@scib.ac.cn, Tel:020-37252978)。
独角石斛的离体繁殖
陈之林 曾宋君 段俊*
中国科学院华南植物研究所华南植物园,广州 510520
In vitro Propogation of Dendrobium unicum
CHEN Zhi-Lin, ZENG Song-Jun, DUAN Jun*
Botanical Garden, South China Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510520
1 植物名称 独角石斛(Dendrobium unicum)。
2 材料类别 种子。
3 培养条件 种子萌发与生根培养基:(1)VW;
(2)VW+100 mL.L-1椰子乳;(3) 3 g.L-1花宝1号(N∶
P∶K=7∶6∶19,美国 Hyponex 化学公司产品);
(4) 3 g.L-1花宝1号+100 mL.L-1椰子乳。生根培
养基:(5) 3 g.L-1花宝1号+2 g.L-1蛋白胨+2 g.L-1
活性炭+0.5 mg.L-1 NAA +0.2 mg.L-1 6-BA;(6) 1 g.
L-1 花宝 1号 +1 g.L-1 花宝 2号(N∶P∶K=20∶20∶
20)+2 g.L-1蛋白胨+2 g.L-1活性炭+0.5 mg.L-1
NAA+0.2 mg.L-1 6-BA。以上培养基均附加 1.5%
蔗糖、0.6% 琼脂,pH 5.2~5.4。培养温度为
(25±2)℃,光照度1 500~2 000 lx,光照12 h.d- 1。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理 人工授粉180 d的荚果经自来
水洗净后,用 70% 的酒精表面消毒 30 s,再以
2%的次氯酸钠溶液消毒15 min,最后用无菌水冲
洗 3 次。将洗净的荚果置灭菌滤纸上吸干水分,
用解剖刀切开荚果,将种子散落到培养基上。
4.2 原球茎诱导和生长分化 种子接种到培养基(1)~
(4)上,暗培养 2 周后,可见白色原球茎突破种
皮;转入光下培养,1 周后原球茎转绿,4 周后
原球茎上端出芽。各培养基上均有较高的萌发
率,都在 90% 以上,但萌发速度和生长速度有较
大的差异。培养基(1)、(3)萌发速度较(2)、(4)上
的慢,(1)、(2)上生长速度比(3)、(4)上的慢,以
培养基(4)效果最好,表明椰子乳对种子萌发有促
进作用。花宝 1 号成分比 VW 培养基更适于石斛
种子生长。
4.3 继代增殖和生根培养 将初代培养的原球茎和
芽在培养基(1)~(4)上继代增殖培养, (4)的效果最
好,30 d左右能继代1次。种子接种密度较大时,
及时继代对生长有利。将较大的无根苗转入生根
培养基(5)、(6)上培养,生根率达 100%。植株生
长旺盛,7周后形成4~6 cm高的小苗,在培养基
(5)上比(6)上根系发达,但植株较小。生产中采
用(6)做生根培养基为宜。
4.4 移栽 将培养瓶置于温棚中炼苗2周后,从培
养瓶中取出生根苗,洗净附着的培养基,分别移
植到细蕨根和水苔(3∶1 )及细蕨根和细塘基石
(1∶3)的基质中。注意保持适宜湿度,置于阴凉
通风处栽培,2周后可用花宝2号2 000倍水溶液
喷雾施肥,促进生长,4 周后可移入温棚管理。
在细蕨根和细塘基石混合基质上成活率约 70%,
在细蕨根和水苔混合基质上成活率可达 95%。
5 意义与进展 独角石斛是原产越南的一种小型种
石斛。其株型紧凑、花色橙红艳丽,形态独特,
具有极高的观赏价值。在原产地几乎被采挖殆
尽,亟待保护。独角石斛种子在自然状况下极难
萌发,主要靠分株繁殖,速度慢,采用无菌播
种能加快繁殖速度。本文中优化的培养基成分简
单,种苗生长迅速,已以此获得了大量种苗,对
保护这一物种是有意义的,而且还有较高的商业
应用价值。独角石斛种子离体培养在国内外未见
报 道 。