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流苏石斛的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第4期,2006年8月690
流苏石斛的组织培养
付志惠 李洪林 杨波*
中国科学院武汉植物园,武汉 430074
Tissue Culture of Dendrobium fimbriatum Hook.
FU Zhi-Hui, LI Hong-Lin, YANG Bo*
Wuhan Botanic Garden, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430074, China
收稿 2006-02-24 修定  2006-04-24
资助 国家“863”计划项目(2002A241121)和中国科学院
武汉植物园主任基金(05035112)。
*通讯作者(E-mail: yangbo@rose.whiob.ac.cn, Tel: 027-
87510054)。
1 植物名称 流苏石斛(Dendrobium fimbriatum
Hook.)。
2 材料类别 茎 段 。
3 培养条件 (1)侧芽诱导培养基:1/2MS+6-BA
2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.2;(2)丛生芽诱导
及增殖培养基:1/2MS+6-BA 5.0+NAA 0. 5+ 椰汁
100 g·L-1+AC (活性炭) 0.5 g·L-1;(3)壮苗培养基:
1/2MS+6-BA 0.5+NAA 0.05+椰汁100 g·L-1+AC 0.5
g·L-1;(4)生根培养基:1/2MS+NAA 1.0+AC 0.5
g·L-1。以上培养基蔗糖浓度(1)~(3)为3.0%,(4)为
2.0%;琼脂7.0 g·L-1,pH 5.8,培养温度为(26±2)℃,
连续光照12 h·d-1,光强为40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 侧芽诱导培养 将长约7 cm且生长健壮的当年
生茎段从母株上采下,自来水冲洗 1 h,去掉外
部叶片,先用 75% 酒精消毒 30 s,再用 0.1% 升
汞溶液(加1滴吐温)消毒10 min,无菌水冲洗6~8
次,用消毒滤纸吸干表面水分,切成带节的 2 段
接种到培养基(1)中。30 d以后茎节处逐渐有绿色
芽长出,继续培养至侧芽开口长出两片叶。
4.2 丛生芽诱导与增殖培养 将获得的侧芽从茎段
上切下,转接入新鲜培养基(2)中进行丛生芽诱导
培养,30 d时在侧芽基部长出绿色丛生芽。将丛
生芽转入新鲜培养基(2)中继续培养,50 d为1个
继代增殖周期,增殖倍数可达 5 (图 1)。
4.3 壮苗培养与生根培养 将丛生芽接入到(3)号培
养基,丛生芽逐渐长大成苗,后将其切割成单个
苗接入(4)号培养基中进行生根培养,30 d时开始
生根,50 d 时幼苗生根率达 95%,根数可达 3~4
条,根长 2~3 cm,根系粗壮(图 2)。
4.4 炼苗与移栽 移栽时将组培苗不开瓶先移到自
然光照下,50% 遮阳网遮光使其逐渐适应外界的
环境。1 周后揭去遮阳网,将小苗取出,洗净根
部琼脂,栽入小颗粒碳化树皮中,保持空气湿度在
70% 以上,环境温度20~25℃,成活率可达90%。
5 意义与进展 流苏石斛又名马鞭石斛,属兰科石
斛属,附生于丛林树上或阴湿岩石上,多分布于
云南、广西及贵州,性喜湿润、通风良好的环
境。是收载于《中国药典》的石斛原植物,具
较高的药用价值。非法采挖现象严重,其野生资
源遭到破坏,该物种已列为珍稀濒危种。采用组
织培养快繁技术可获得大量优质种苗,可能是满
足市场需要和保护种质资源的一种值得考虑的技术
手段。流苏石斛的组织培养尚未见报道。
图2 流苏石斛的生根培养
图1 流苏石斛的增殖培养