全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 3期，2007年 6月 519
峨眉含笑试管培养再生植株
闵炜 *，陈志萍
上海农林职业技术学院，上海 201600
Plantlet Regeneration of Michelia wilsonii Finet et Gagnep. in vitro
MIN Wei*, CHEN Zhi-Ping
Shanghai Vocational Technical College of Agriculture & Forestry, Shanghai 201600, China
收稿 2007-03-16 修定 2007-04-28
* E-mai l：mweihj@sohu.com；Tel：02 1-57 81 13 99
1 植物名称 峨眉含笑(Michelia wilsonii Finet et
Gagnep.)。
2 材料类别 侧枝的顶芽。
3 培养条件 诱导培养基：(1) MS+6-BA 1 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.2；增殖培养基：(2) MS+6-
BA 0.3+NAA 0.3；生根培养基：(3) 1/2MS+NAA
0.5+IBA 0.5。诱导培养基和增殖培养基加入3%蔗
糖，生根培养基加 1.5%蔗糖，pH 5.8左右。培
养温度(24±1) ℃，光照时间 12 h·d-1，光照强度
约 18 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 2003年 7~9月，在江西省高
安县祥符镇优质种苗繁育中心苗圃内，分批剪取
二年生峨眉含笑植株上侧枝的顶芽，每次不少于
50枚，长度 1.5 cm。拿回室内后，剥去最外一
层包叶，用洗衣粉液振荡洗涤 10 min，流水冲洗
1 h，浸入 2% 亚硫酸钠溶液中备用。在超净台
中，取出备用的材料，用 10倍体积的 0.1%升汞
溶液浸泡 10 min，倒去升汞液后，用无菌水分数
次漂洗去残留的升汞，再把材料浸入灭过菌的
0.2%亚硫酸钠溶液中，防止幼芽从切口处开始氧
化变色。在接种纸上把幼芽剥去一层包叶，切成
1 cm长的茎尖，接入不含生长调节物质的MS基
本培养基中。
4.2 无菌繁殖系的建立 培养 7~10 d后，剔除染菌
和变褐的材料，把存活的顶芽转入 W P M 、
White、MS 3种基本培养基各附加 6-BA (0.5~
2 mg·L-1)、KT (0.5~2 mg·L-1)、NAA (0.05~0.5
mg·L-1)、IBA (0.05~0.5 mg·L-1)，按正交设计，
选择 8种不同生长调节剂组合的处理。顶芽在初
次培养时，萌芽启动缓慢，尤其在WPM和White
2种培养基中更明显。生长调节剂组合以 6-BA
1+NAA 0.2表现最好。所以，后继试验的观察都
以在MS+6-BA 1+NAA 0.2培养基上的材料为主。
接入诱导培养基的顶芽在 20 d左右最外层的
包叶变褐脱落，茎尖略微伸长；70 d左右，茎
尖展开 2~3片真叶，茎杆下部的腋芽开始突出，
茎杆基部肿大，生出白色疏松的愈伤组织。再继
续培养，愈伤组织会逐步变黑，并把培养基染
黑。所以在生出愈伤组织后须将其切去，把芽苗
转入到新鲜的诱导培养基中。培养至 150 d左右，
主茎伸长到 2.5~3 cm，基部生出 1~2个 1~1.5 cm
长的新芽，这时可以将芽苗转到降低了生长调节
剂浓度的增殖培养基中。
4.3 增殖培养 从无菌的芽苗上切下 1.5 cm长的新
生侧芽，转入增殖培养基，新生的小芽则连在主
茎上一起转入增殖培养基。增殖培养时，6-BA浓
度高容易诱导茎杆基部产生大量的愈伤组织，经
比较，以MS+6-BA 0.3+NAA 0.3的组合较适宜。
一般 20~30 d转一次瓶，以避免培养基被染褐而
抑制芽苗的生长。增殖培养 50~60 d，主茎可伸
长至 3~4 cm，在主茎的基部平均可生出 4个 1~
1.5 cm长的新芽，新芽的基部又有隐芽萌生(图
1)。峨眉含笑的增殖方式是以主茎基部的隐芽萌
动形成新芽，呈芽丛状，小芽伸长成芽苗。在
茎杆基部增生的白色愈伤组织没有分化再生不定芽
的能力，随培养时间的延长而变黑。增殖培养几
代后，可切下主茎用于诱导生根，芽丛则可分割
成 2 ~3 个芽为一簇，用于繁殖。
4.4 生根培养 在增殖过程中，有个别的芽苗茎杆
基部不萌生丛芽而在其端部生出不定根。将切下
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的主茎移植到 1/2MS+NAA 0.5的培养基上，也可
以诱导出不定根，但是以在 1/2MS+NAA 0.5+IBA
0.5培养基上诱导生根率最高。试验的 46株芽苗
中，培养 30 d的有 36株生根，生根率达 78%。
不定根从皮孔生出，培养 50 d，每株生根 3~5条，
根长 2~5 cm (图 2)。未生根的芽苗，将其茎杆
基部黑色的愈伤组织切除，重新接入培养基(3)中，
40 d后全部生出 1.5~3 cm长的根系。
特有的树种，分布范围狭窄，且呈零星散生。峨
眉含笑木质优良，用途广泛，已成为滥伐的对
象，在其自然分布区的植株越来越少，又因为成
年树结实甚少，自然更新更加困难，在天然混生
林中面临受其他阔叶树种更替而灭绝的危险，已
列为国家二级保护濒危树种。峨眉含笑树形优
美，花朵芳香，是城市园林绿化的名贵树种，也
是适生地区的主要造林树种，在世博会上曾获得
园林植物铜奖。目前，同属中的醉香含笑(柳蔓
琼和梁士观 1985；李雪等 2005)、深山含笑(曾
宋君等2000)和乐昌含笑(蒋泽平等2005)的组织培
养已有报道，而峨眉含笑的组织培养和快速繁殖
尚未见报道。
参考文献
蒋泽平, 王国良, 梁珍海, 吴纲(2005). 乐昌含笑的离体快速繁殖.
植物生理学通讯, 41 (1): 67
李雪, 王淑芬, 蒋雄辉(2005). 醉香含笑的组织培养与植株再生.
植物生理学通讯, 41 (6): 783
柳蔓琼, 梁士观(1985). 火力楠茎段的组织培养. 植物生理学通
讯, (9): 37
曾宋君, 彭晓明, 曾庆文(2000). 深山含笑的组织培养与快速繁
殖. 热带亚热带植物学报, 8 (3): 264~268
图 1 峨眉含笑的增殖培养
图 2 峨眉含笑的诱导生根
图 3 峨眉含笑的炼苗
图 4 峨眉含笑的移栽苗
4.5 炼苗及移栽 将生根的试管苗小心取出，洗净
粘着的培养基，移植到口径 8 cm的塑料小花钵
中，基质用干净的珍珠岩，上部罩塑料杯保湿(图
3 )。珍珠岩不渍水，通气好，不会引起烂根，
苗上部有塑料杯保湿，叶片不会萎蔫，用这种方
法炼苗，成活率几乎达 100%。待小苗的根钻出
塑料钵下部的漏水孔或小苗顶芽伸长抽出新叶，
即可移入大花钵中。基质用珍珠岩、泥炭和生物
有机肥各 1/3的混合营养土拌入多菌灵堆沤后使
用。移植的第 1周仍应罩上塑料杯，以后即可在
塑料大棚中生长(图 4)。
5 意义与进展 峨眉含笑属木兰科含笑属，是我国