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峨眉含笑精油抑菌作用研究



全 文 :峨眉含笑精油抑菌作用研究
刘芳1 ,曾郑祥2 ,李仲芳1 (1.乐山师范学院化学与生命科学系,四川乐山 614004;2.四川大学华西口腔医学院 ,四川成都 610041)
摘要 [目的]为城市森林生态保健型绿化模式树种的选择及配置提供科学依据。[方法]用水蒸气蒸馏法提取峨眉含笑精油 ,以金黄色葡
萄球菌和大肠杆菌为供试菌种 ,通过贴滤纸片法测试峨眉含笑精油对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌作用。[结果]峨眉含笑精油对大
肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用。浓度为 20%的峨眉含笑精油对大肠杆菌的抑制效果最为明显 ,其抑菌斑为 3.3 cm。浓度
为 30%的峨眉含笑精油对金黄色葡萄球菌的抑菌效果极显著差异于其他浓度(P<0.01),其抑菌斑为 3.57 cm。[结论]峨眉含笑植物精油
对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌最佳抑菌浓度分别为 20%和 30%。峨眉含笑是城市森林生态保健型绿化模式应选择的适宜树种。
关键词 峨眉含笑;精油;抑菌作用
中图分类号 S 794.9  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2008)10-04074-02
Research on the Bacteriostasis Effect of Refined Oil of Michelia wilsonii Finet et Gagnep
LIU Fang et al (Department of Chemistry and Life Science, Leshan Normal College , Leshan , Sichuan 614004)
Abstract [Objective] The purpose of the study was to supply scientific foundation for the choice and combination of tree species in the ecological and
healthy virescence mode of urban forest.[Method] The refined oil of Michelia wilsonii Finet et Gagnewas extracted by steam distillation.With Staphylo-
coccus aureus and Escherichia coli as tested strains , the bacteriostasis effects of the refined oil of M.wilsonii on them were tested with filter paper.[ Re-
sult] The refined oil of M.wilsonii had some inhibition effects on both E.coli and S.aureus.The inhibition effect of the refined oil with concn.of
20% of M.wilsonii on E.coli was most significant , with bacteriostasis spot of 3.3 cm.The bacteriostasis effect of the refined oil with concn.of 30%
of M.wilsonii on S.aureus was extremely significantly different from that of the other concn., with bacteriostasis spot of 3.57 cm.[ Conclusion] The
optimum bacteriostasis concn.of the refined oil of M.wilsonii on E.coli and S.aureus were 20% and 30% resp.M.wilsonii was a good tree species
and should be chosen in the ecological and healthy virescence mode of urban forest.
Key words  Michelia wilsonii Finet et Gagne;Refined oil;Bacteriostasis effect
基金项目 乐山师范学院校级科研项目(Z0680)。
作者简介 刘芳(1978-), 女 , 甘肃清水人 , 讲师 ,从事植物生理学
研究。
收稿日期 2007-12-08
  峨眉含笑(Michelia wilsonii Finet et Gagnep)为木兰科含笑
属植物 ,别称威氏黄心树 、峨眉白兰 、黄木兰 。其树冠圆满 ,
树形伞状 、高大优美 ,枝叶茂密 ,叶色青翠 ,花芳香清爽 ,为新
兴的芳香型绿化树种 。
近年来 ,随着国民经济的发展 、城市化与现代化的推进 ,
人们对环境保护的意识日益增强。构建城市森林 、发挥绿化
植被的生态保护功能 、提高生活质量已成为广大市民的迫切
需求。李晓储等对扬州古运河生态环境林建设进行研究 ,提
出了营建生态保健型绿化模式 ,即利用木本植物挥发植物杀
菌素和植物保健素的功能 ,改善古运河区域空气质量 ,以促
进人体健康[ 1-2] 。彭镇华等在对中国城市森林建设的研究
中着重指出 ,城市森林建设的宗旨是改善城市环境 、为居民
提供舒适健康的生活环境 ,在城市绿化材料的选择上要应用
现代眼光 、生态眼光看问题[ 3-4] 。因此 ,积极选用能分泌挥
发性植物杀菌素的芳香型绿化树种 、构建生态保健型绿化模
式 ,对杀死病菌 、减轻城市空气含菌量 、保障市民身心健康具
有非常重要的意义。为此 ,笔者选择了四川省峨眉山特有的
芳香型绿化树种———峨眉含笑 ,测定了其产生的精油对金黄
色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性 ,为城市森林生态保健型
绿化模式树种选择及配置提供科学的依据 。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 供试材料。峨眉含笑精油通过以下提取方法得到:
精确称取 50 g峨眉含笑叶 ,以磨口精油提取装置用水蒸气蒸
馏法提取 ,蒸馏时间 4 h ,得黄色挥发油 ,用无水Na2SO4 干燥。
1.1.2 菌种。金黄色葡萄球菌与大肠杆菌均由乐山师范学
院化学与生命科学系微生物实验室提供。
1.1.3 培养基。试验中采用以下 2种培养基:①牛肉膏蛋白
胨固体培养基 。琼脂 20g ,蛋白胨 10 g ,NaCl 10g ,酵母提取物
5 g ,牛肉膏 5 g ,双蒸水 1 000 ml ,用于倒平板;②LB液体培养
基。蛋白胨 5 g ,NaCl 5 g ,酵母提取物 2.5 g ,牛肉膏 2.5 g ,双
蒸水 500 ml ,用于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的扩大培养 。
1.2 方法
1.2.1 不同浓度精油配制。用移液管分别吸取 2.50 、2.25 、
2.00和 1.75 ml无水乙醚 ,注入试管后再分别加入 0、0.25 、
0.50和 0.75 ml峨眉含笑精油 ,制成 0 、10%、20%和 30%的精
油溶液 ,随用随配 ,并用无菌棉塞封口。
1.2.2 菌悬液的制备。预先把菌种用培养基活化 ,在超净
工作台(SW-CJ-1B型单人单面净化工作台 ,苏州净化设备有
限公司)上用接种环刮取菌种置于 20 ml左右的LB液体培养
基中 。然后在 37 ℃摇床(1 200 r/min)培养 8~ 12 h ,制成含菌
量约为 106 ~ 107 CFU/ml的菌悬液。
表 1 不同浓度峨眉含笑精油的抑菌效果
Table 1 The antibacterial effect of different concentration of refined oil
from M.wilsonii
菌种
Strain
对照组
Control
group
不同浓度峨眉含笑精油抑菌斑直径
Antibacterial diameter of different
refined oil concentration of M.wilsonii∥cm
10%精油
10% refined
oil
20%精油
20% refined
oil
30%精油
30% refined
oil
大肠杆菌 E.coli 0 2.12 B 3.30 A 3.11 A
金黄色葡萄球菌 0 2.39 B 2.82 B 3.57 A
S.aureus
 注:不同大写字母表示在 0.01水平差异显著。
 Note:Different capital letters denote significantly diff erent at 0.01 probabi lity
level.
1.2.3 抑菌试验。试验采用滤纸片法进行 ,用打孔器将干
安徽农业科学, Journal of Anhui Agri.Sci.2008, 36(10):4074-4075                    责任编辑 张彩丽 责任校对 马君叶
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.10.097
燥滤纸制成直径为 8 mm的圆纸片 ,干热灭菌 2 h(严格控制
温度在 165 ℃左右 ,勿使超过 170 ℃,否则会引起纸片自燃)
后备用。在无菌操作下 ,将滤纸片分放于含菌的平板培养基
上 ,每个培养皿中放 3个滤纸片 ,呈三角形放置 ,然后在滤纸
片上滴 40 μl不同浓度的测试溶液 , 5个重复 ,1个空白对照
(用“无水乙醚十 0 ml”精油代替试样),然后对各培养皿标记
后在 37 ℃下培养 36 h 。
1.2.4 数据统计与处理。用游标卡尺分别测量每个抑菌圈
2个垂直方向的直径大小 ,取其平均值进行统计分析 ,分析方
法采用DPS数据处理系统(7.55版),比较方法采用Tukey 法。
2 结果与分析
峨眉含笑精油对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的抑菌效
果见表 1与图 1 、图 2 。
由表 1可知 ,峨眉含笑精油对大肠杆菌和金黄色葡萄球
菌均有一定的抑制作用。浓度为 20%峨眉含笑精油对大肠
杆菌的抑制效果最为明显 ,其抑菌斑为 3.3 cm;浓度为 30%
的峨眉含笑精油对大肠杆菌形成的抑菌斑为 3.11 cm(见图
1)。随着峨眉含笑精油浓度的增加 ,对金黄色葡萄球菌的抑
制效果增强 ,浓度为 30%的抑菌效果极显著差异于其他浓度
的抑菌效果(P <0.01),其抑菌斑为 3.57 cm(见图 2 d)。
注:a为对照溶液 ,b 、c、d分别为 10%、20%、30%峨眉含笑精油溶液。下同。
Note:a , control solution;b , c ,d denote 10%,20% and 30% of M.wilsonii solution, respectively.The same as below.
图 1 不同浓度的峨眉含笑精油溶液对大肠杆菌的抑菌效果
Fig.1 The antibacterial effect of different concentration of refined oil from M.wilsonii against E.coli
图 2 不同浓度的峨眉含笑精油溶液对金黄色葡萄球菌的抑菌效果
Fig.2 The antibacterial effect of different concentration of refined oil from M.wilsonii against S.aureus
3 讨论
该试验证明峨眉含笑精油对大肠杆菌和金黄色葡萄球
菌均有较好的抑制效果 ,峨眉含笑精油的最佳抑菌作用浓度
为:大肠杆菌 20%,金黄色葡萄球菌 30%。樊金拴等在巴山
冷杉精油抑菌作用研究中得到巴山冷杉精油对大肠杆菌和
金黄色葡萄球菌也有较好的抑制效果 ,其最佳抑菌作用浓度
均为 30%[ 5] 。
因此 ,峨眉含笑是城市森林生态保健型绿化模式应选择
的适宜树种 。由于其抑菌活性强 ,可通过植物挥发油产生的
杀菌素杀死空气中可引起呼吸道感染的革兰氏阳性细菌(金
黄色葡萄球菌),改善空气质量 、保障人体健康。峨眉含笑用
于绿化配置既可产生良好的生态景观视觉效应 ,又能发挥出
明显的生态保健功能。峨眉含笑精油随浓度增加对金黄色
葡萄球菌抑菌效果是否还会增大 ,尚需进一步的研究 。
参考文献
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苏林业科技, 2003 ,29(2):1-4.
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[ J] .中国城市林业, 2003(1):30-33.
[ 3] 彭镇华 ,王成.论城市森林的评价指标[ J] .中国城市林业 , 2003(3):
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[ 4] 彭镇华.林网化与水网化———中国城市森林建设理念[ J] .中国城市林
业 , 2003(2):4-12.
[ 5] 樊金拴 ,李晓明.巴山冷杉精油抑菌作用研究[ J] .西北林学院学报 ,
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参考文献
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407536卷10期               刘 芳等 峨眉含笑精油抑菌作用研究