全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月460
华南可爱花的组织培养和快速繁殖
萧洪东* 王惠珍 聂磊
佛山科学技术学院生命科学学院,佛山 528000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Eranthemum austrosinensis
XIAO Hong-Dong*, WANG Hui-Zhen, NIE Lei
College of Life Sciences, Foshan University, Foshan 528000
收稿 2003-10-15 修定 2004-03-22
资助 广东省佛山市科技发展专项资金项目(0102009A)。
* E-mail:xiaohongdongyou@163.net, Tel:0757-82816782或
85505790
1 植物名称 华南可爱花(Eranthemum austrosinensis)。
2 材料类别 带侧芽的茎段。
3 培养条件 以MS为基本培养基。愈伤组织诱导
培养基:(1)MS+6-BA 2.0 mg·L-1(单位下同)+ NAA
0.1+TDZ 0.01。愈伤组织分化培养基:(2)MS+
6-BA 2.0+NAA 0.1。不定芽诱导培养基:(3)MS+
6-BA 0.2+NAA 0.1;(4)MS+6-BA 0.4+NAA 0.1;(5)
MS+6-BA 0.6+NAA 0.1; (6)MS+6-BA 0.8+NAA 0.1;
(7)MS+6-BA 1.0+ NAA 0.1; (8)MS+6-BA 1.2+NAA
0.1;(9)MS+6-BA 1.5+NAA 0.1。生根培养基:(10)
MS+NAA 0.2;(11)MS+NAA 0.4。以上培养基均
添加 3% 蔗糖、0.65% 卡拉胶,pH 5.8~6.2。培
养温度为(25±1)℃,光照度1 500~2 000 lx,光
照时间为12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取长1.5 cm左右带侧芽的茎
段,用自来水流水冲洗20 min,75% 酒精溶液浸
泡20 s,在超净工作台上再用0.1%升汞溶液浸泡
12~15 min,并用无菌水冲洗 5~6 次,然后切取
1 cm左右带侧芽茎段接入培养基(1)中。培养20 d
左右,侧芽部位长出绿色的致密愈伤组织。
4.2 愈伤组织的分化及壮苗 把获得的愈伤组织切
成小块接入到培养基(2)中,愈伤组织迅速生长,
同时表面有绿色芽点冒出,将茎段诱导的愈伤组
织切成小块再接入到培养基(3)~(9)中。可以看出
随着不同浓度激素配比,愈伤组织不定芽启动生
长数有明显差别。在 NAA 浓度不变的情况下,随
着6-BA浓度的升高,培养基(3)上培养7 d左右不
定芽即开始萌动、生长,一般可长出 3~4 个芽,
15 d 后不定芽伸长,高约有0.5 cm,叶片展开,
长势良好,并在基部有少量愈伤组织分化;而培养
基(4)只长出1~2个芽;培养基(5)~(7)则产生大量
丛生芽,但很难长成良好的不定芽,偶有较粗的
不定芽长出,再转接到培养基(3)中,即可长出良
好的不定芽;培养基(8)、(9)则分化出大量愈伤组
织。可见,培养基(3)诱导不定芽生长较好,其
次是培养基(4)。
4.3 生根及移栽 增殖培养的不定芽长到1.5~2 cm
高时,把不定芽分开移入生根培养基,光照培
养。8~10 d后根系长出,25 d后生根率达95%以
上。培养基(10)上平均每株长出 6.9 条白根,根
系较细,须根多,平均根长3.1 cm,植株稍矮;
培养基(11)上长出较多的白根,平均每株长出5.4
条白根,根系较粗,须根较少,平均根长4.4 cm,
植株健壮。培养30 d 后,株高达30 mm 左右时,
移入室外阴棚炼苗 3~5 d,洗去根部培养基,移
入砂和已堆沤腐熟的椰子壳混合(2∶8 )的苗床
上,应特别注意做好保温、保湿(湿度保持在80%
以上)、遮光等管理工作,7 d 后长出新根,成
活率可达 98% 以上。35 d 后移植到土壤中,自
然条件下能正常生长,成活率为 100 %。
5 意义与进展 上个世纪90年代以来,南方山区
随处可见的野生植物被广泛利用。华南可爱花、
野牡丹、草果、桃金娘、细辛和蕨类也愈来愈
深受园林界人士的垂青。但是这类植物的苗木大
多是从乡村旷野中挖掘移植或分株繁殖而来,开
发力度较大,资源愈来愈少。本文采用组织培养
方法诱导再生植株,对保护野生华南可爱花资
源,可能有一定的开发和园林绿化应用价值。同
类工作尚未见报道。