全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第5期，2006年10月 903
收稿 2006-03-08 修定 　2006-05-17
资助 韶关市科技计划项目(韶科 2005-10)和韶关学院科研项
目(2004)。
* 通讯作者(E-mail: byinghua@126.com, Tel: 0751-8121376)。
玫瑰石斛的组织培养及快速繁殖
白音1,2 包英华1,* 王文全2 阎玉凝2
1 韶关学院英东生物工程学院，广东韶关 512005；2 北京中医药大学中药学院，北京 100102
Tissue Culture and Rapid Propagation of Dendrobium crepidatum Lindl. ex Paxt.
BAI Yin1,2, BAO Ying-Hua1,*, WANG Wen-Quan2, YAN Yu-Ning2
1Yingdong College of Bioengineering, Shaoguan College, Shaoguan, Guangdong 512005, China; 2School of Chinese Materia
Medica, Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100102, China
1 植物名称 玫瑰石斛(Dendrobium crepidatum
Lindl. ex Paxt.)。
2 材料类别 无菌萌发的种胚苗茎节或茎段。
3 培养条件 种胚诱导培养基：(1) MS+NAA 0.5
mg·L-1 (单位下同); (2) 1/2MS+马铃薯提取物20%。
茎节或茎段分化培养基：(3) MS；(4) 1/2MS。生
根和壮苗培养基：(5) 1/2MS+IBA 0.2~0.4+活性
炭 0.1%；(6) MS+NAA 1+6-BA 0.5；(7) MS+NAA
2+6-BA 1。以上培养基均加入30 g·L-1蔗糖、8 g·L-1
琼脂粉，pH 5.8，高压灭菌锅中121℃下灭菌20
min。培养温度(25±1)℃，光强20~40 µmol·m-2·s-1，
光照时间14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌种胚苗的培育 先用软刷蘸肥皂液轻轻刷
洗玫瑰石斛果实，流水冲洗干净，然后 7 0 % 酒
精浸泡1 min，无菌水冲洗3次，再用0.1% 升汞
表面消毒10 min，无菌水冲洗6次后，把果实放
在无菌滤纸上，吸干表面水分，用无菌解剖刀将
蒴果剖成两半后，用镊子捏住果皮，轻轻抖动，
把种子散落到干的无菌滤纸上，用药勺将种子播
入种胚诱导培养基(1)和(2)上，播种后稍加摇动培
养瓶，使种子散布均匀。培养 28 d 后种子开始
萌发，逐渐形成绿色原球茎，再过 150 d，原球
茎长成一株或丛生苗。培养基(2)上种子萌发率多
于培养基(1)上的萌发率，表明低盐和马铃薯提取
物对玫瑰石斛种子萌发有促进作用。
4.2 芽的分化 取无根种胚苗的茎节或茎段(长度小
于0.5 cm，采用无菌种胚苗的茎节或茎段作为外
植体进行组织培养试验，可以减少培养材料的污
染率)，接种在培养基(3)和(4)上，诱导芽。培
养过程中发现，茎节或茎段颜色变浅黄色，并浮
肿和抽长，培养 60 d 后，茎节处或茎段顶部侧
面抽出小芽，长度可达 0.5 cm 左右。
4.3 生根和壮苗 将长成大约1 cm的小芽从茎节或
茎段上切下来，转接在培养基(5)上，进行生根培
养，玫瑰石斛在离体培养过程中都体现良好的生
根特点，在生根培养基上都能直接生根，生根率
可达 100%。根有 4~8 条时，再继代在培养基(6)
或(7)上，进行壮苗培养。
4.4 炼苗及移栽 组培苗长出5~8片小叶片时，将
具有试管苗的培养瓶移至室内散射光处，打开瓶
盖 5~6 d，进行初次炼苗。然后将小苗取出培养
瓶，用自来水轻轻洗净苗根部粘连的培养基，使
根系不受损伤，移栽到已铺好基质的炼苗盘上，
基质一般采用树皮块和少量苔藓，上面喷浇 M S
培养液和 0 . 2 % 多菌灵液。炼苗盘放在温度为
(25±1)℃、湿度为70%~85% 的炼苗大棚内，30 d
后即可移栽到花盆中，花盆底部铺小石块，上面
铺木屑和树皮块，并有少量苔藓，成活率达 90%
以上。
5 意义与进展 玫瑰石斛是兰科石斛属多年生草本
植物，含吲哚联啶类生物碱，是具有滋阴益胃和
生津除烦等功效的中药材。其花大而鲜艳，可供
观花和观叶。但由于长期过渡采收，目前野生玫
瑰石斛资源急剧减少，甚至在有些地区已到濒临
灭绝的境地。近年来，国内学者对铁皮石斛、美
花石斛和霍山石斛等多种石斛属植物进行了组培快
繁方面的研究，以期保护野生药用石斛资源，满
足日益增加的市场需求。但尚未见到玫瑰石斛组
织培养及快速繁殖的报道。