全 文 ：植物生理学通讯 第41卷 第6期，2005年12月794
小报春的组织培养和植株再生
金晓霞 潘会堂 张启翔*
北京林业大学园林学院，北京 100083
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Primula forbesii Franch.
JIN Xiao-Xia, PAN Hui-Tang, ZHANG Qi-Xiang*
College of Landscape Architecture, Beijing Foresty University, Beijing 100083, China
收稿 2005-02-28 修定 2005-04-04
资助 国家林业局重点项目(2003-008-L08)和北京林业大学研
究生培养基金项目。
*通讯作者(E-mail: zqx@bjfu.edu.cn, Tel: 010-
62338305)。
1 植物名称 小报春(Primula forbesii Franch.)。
2 材料类别 幼嫩叶片。
3 培养条件 基本培养基为 MS。丛生芽诱导和增
殖培养基：(1) MS+6-BA 0.2 mg·L-1 (单位下同)+
NAA 0.05；(2) MS+6-BA 0.5+NAA 0.05；(3) MS+
6-BA 1+NAA 0.05；(4) MS+6-BA 2+NAA 0.05；
(5) MS+6-BA 0.2+NAA 0.1；(6) MS+6-BA 0.5+
NAA 0.1；(7) MS+6-BA 1+NAA 0.1；(8) MS+6-BA
2+NAA 0.1；(9) MS+6-BA 0.2+NAA 0.5；(10) MS+
6-BA 0.5+NAA 0.5；(11) MS+6-BA 1+NAA 0.5；
(12) MS+6-BA 2+NAA 0.5。生根培养基：(13) MS;
(14) MS+NAA 0.05；(15) MS+NAA 0.1；(16) MS+
NAA 0.2；(17) MS+NAA 0.5。上述培养基加 30
g·L-1蔗糖和4.5 g·L-1琼脂，pH 5.6~5.8。培养温
度控制在(24±2)℃，黑暗培养30 d后，置于光强
为30~40 mmol·m-2·s-1下培养，光照时间10 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 外植体的灭菌与接种 取小报春幼嫩叶片，自
来水冲洗 2~3 h，毛刷刷除叶背白粉，70% 酒精
消毒10~15 s，无菌水冲洗4~5 次，0.1% 的升汞
消毒4~5 min，再用无菌水冲洗 4~5 次。然后将
叶片切成1 cm×1 cm 的小块(带部分叶脉)，接种
在丛生芽的诱导和增殖培养基上。每瓶接种 5~6
块，每种接 1 0 瓶。
4.2 丛生芽的诱导和增殖 接种4~5 d后，叶片肿
胀皱缩；15 d 左右切口处变肥、变厚；30 d 后，
接种在培养基(2)、(7)、(8)、(10)、(11)、(12)上的
叶片表面产生乳白色或淡绿色愈伤组织，转入光
下培养半个月后，除了培养基(10)，其余愈伤组
织表面都能产生大量的绿色丛生芽。其中，小报
春叶片接种在培养基(8)上时，丛生芽的诱导率最
高，达68.2%，增殖系数平均为接种块的5.1~7.4
倍。培养基(3)、(4)和(6)未经过愈伤组织阶段直
接产生从生芽，其中培养基(4)上不定芽的诱导率
为53.7%。培养基(1)、(5)和(9)未见芽的分化。
4.3 生根和组培苗的移栽 当芽长出3~4片叶子后，
从愈伤组织上切除，转至生根培养基。在培养基
(13)~(17)上，无根苗都能生根。培养基(13)上，
无根苗平均8.5 d生根，长不小于1 cm的根占生
根总数的72%；NAA浓度从0.05 mg·L-1 增加到0.5
mg·L-1，生根天数从 10 d 增加到 15 d，且根粗
短，90%以上的根长度小于1 cm，有的成瘤状[培
养基(17)上瘤状根产生总数达到45%]。因此，小
报春不定芽生根的最佳培养基为 MS。当组培苗
长至 6~7 片叶子，且生根良好时，打开封口膜，
炼苗 3~4 d。取出组培苗，洗净培养基，清水中
浸泡4~6 h，栽入草炭和珍珠岩(比例为1∶1)的混
合基质中，移植成活率可达 9 5 % 以上。
5 意义与进展 原产于我国云南、四川的小报春，
是报春花科报春花属二年生草本植物，其花期
长，开花繁茂，是一种非常有开发价值的野生花
卉。由于自然植被的破坏和人类的过度开发，其
分布范围日益缩小。2002年，小报春从云南被引
种到北京，种植于温室中，现在小报春在温室中
能正常生长、开花。报春花属植物多数原产于高
山地区，引种驯化相对比较困难，小报春是目前
国内报春花引种最为成功的少数几个种之一，组
织培养的研究对其下一步的研究利用可能有一定的
参考价值。目前，报春花属已有不少种进行了组
织培养技术的研究，但小报春的组织培养和快速
繁殖还未见报道。