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马缨杜鹃的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 2期,2008年 4月 297
马缨杜鹃的组织培养与快速繁殖
程雪梅 1,赵明旭 2,何承忠 2,*,周敏 1,许昌慧 2
西南林学院 1园林学院,2资源学院,昆明 650224
Tissue Culture and Rapid Propagation of Rhododendron delavayi Franch.
CHENG Xue-Mei1, ZHAO Ming-Xu2, HE Cheng-Zhong2,*, ZHOU Min1, XU Chang-Hui2
1Faculty of Landscape Architecture, 2Faculty of Resources, Southwest Forestry College, Kunming 650224, China
收稿 2008-01-09 修定 2008-03-13
资助 云南省自然科学基金项目(2006C0035Q)、云南省林业
科学院云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室
2 00 6 年度开放基金课题、云南省重点建设专业(林学)
项目。
* 通讯作者( E-m a i l:h cz 7 0 @ 1 6 3 .c om;T el:0 8 7 1 -
3 8 6 3 0 2 2 )。
1 植物名称 马缨杜鹃(Rhododendron delavayi
Franch.)。
2 材料类别 种子萌发的无菌苗茎段。
3 培养条件 种子萌发培养基:(1) 1/4MS+KT 1.0
mg·L-1 (单位下同)+水解酪蛋白 300。丛生芽诱导
和增殖培养基:(2) WPM+TDZ 0.8+IBA 0.2。丛
生芽伸长培养基:(3) WPM+KT 0.5+GA3 2.0。壮
苗培养基:(4) WPM。生根培养基:(5) 1/2WPM+
IBA 2.0+活性炭 0.05 g·L-1。以上培养基除生根培
养基(5)的蔗糖为 15 g·L-1外,其他培养基均加入
25 g·L-1蔗糖和 5 g·L-1卡拉胶,pH 5.2~5.8。培
养温度(25±1) ℃,光照时间 12 h·d-1,光照强度
40~60 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取马缨杜鹃尚未开裂的蒴果,
洗衣粉液浸泡后用纱布包裹置于流水下冲洗 1 h,
在超净工作台上用 70%乙醇消毒 30 s,再用 0.1%
升汞溶液消毒 20 min,无菌水冲洗 5~6次,用消
毒滤纸吸干表面水分,剥开蒴果,取出种子接种
到培养基(1)上,15 d后种子开始萌发。
4.2 丛生芽的诱导和增殖培养 无菌苗高长到 1.5
cm左右(图 1),将其切为长 0.5 cm左右的小段,
接种到培养基(2)上,20 d左右分化出丛生芽(图
2),并且基部膨大有大量黄绿色愈伤组织生成,
培养 30 d后将丛生芽转接到培养基(2)上进行继代
增殖。继代培养的间隔时间一般为 30~40 d,繁
殖系数可达 6.5,但是丛生芽生长短小(图 3),需
要进行丛生芽的伸长培养。继代间隔时间不能超
过 50 d,否则丛生芽会变黄甚至死亡。
4.3 丛生芽伸长和壮苗 将丛生芽切割后分成数丛,
图 1 马缨杜鹃无菌苗培养
图 2 马缨杜鹃丛生芽诱导
图 3 马缨杜鹃丛生芽增殖
植物生理学通讯 第 44卷 第 2期,2008年 4月298
转接到培养基(3)上,45 d后丛生芽可长到 2~3
cm,但是芽苗细弱(图 4)。进一步将丛生芽转接
到培养基(4)上,30 d后芽苗生长健壮(图 5)。
4.4 生根及移栽 将高3 cm左右的丛生芽苗切成单
株后,放到培养基(5)上,30 d后开始生根,生
根率为 83.5%,60 d后苗高可达到 4~5 cm,根
数 2 ~3 条。移栽前,先将封口膜揭开一半,在
人工气候箱中锻炼 3 d,然后将瓶口完全揭开,在
室内炼苗 4~5 d。移栽时,用镊子小心地把苗从
培养瓶中取出,用自来水洗掉根部的卡拉胶,移
栽到已消毒的珍珠岩和腐质土(1:2)的基质中,注
意保湿遮阴,成活率为 75% 左右(图 6)。
图 4 马缨杜鹃丛生芽伸长
图 5 马缨杜鹃丛生芽壮苗
化道出血、咯血、月经不调等症。马缨杜鹃的
观赏价值早在清乾隆年间禄劝知县檀萃著的《滇
海虞衡志》里就有记载“马缨花冬春遍山,山
氓折而盈抱,入市供插瓶,深红不下于山茶”。
正由于马缨杜鹃花大色艳,树姿苍劲优美,观赏
价值较高,被广泛应用于园林绿化。但是,目
前绿化所用的马缨杜鹃苗木主要是依靠采挖野生资
源获得,对资源的破坏性较强、浪费性较大。因
此,为了更好地保护、开发、利用现有的野生
资源,进行马缨杜鹃的组织培养和快速繁殖是当
前急需解决的问题。目前,杜鹃花属中一些种的
组织培养和快速繁殖研究已有报道(董春枝等
1988;秦静远和黄玉敏 2003;汤桂均等 2004;
顾宏辉等 2006;罗彭等 2007;苗永美等 2007),
但是马缨杜鹃的组织培养和快速繁殖在国内外尚未
见报道。本文研究结果可能有利于马缨杜鹃的资
源保护、扩大繁殖和进一步推广应用。
参考文献
董春枝, 郑开文, 潘季淑(1988). 三种杜鹃花的茎尖快速繁殖. 植
物生理学通讯, (2): 55
顾宏辉, 袁群英, 朱春艳, 朱丹华(2006). 羊踯躅的组织培养与快
速繁殖. 植物生理学通讯, 42 (4): 683
罗彭, 庄平, 白洁(2007). 大白杜鹃、美容杜鹃和喇叭杜鹃的组
织培养. 植物生理学通讯, 43 (2): 326
苗永美, 王永清, 庄平, 简兴(2007). 大萼杜鹃的快速繁殖研究.
中国林副特产, (4): 12~14
秦静远, 黄玉敏(2003). 杜鹃的组织培养及快速繁殖. 植物生理
学通讯, 39 (1): 38
汤桂钧, 张建安, 蒋建平, 胡海峰, 何正其(2004). 高山杜鹃的组
织培养快速繁殖技术研究. 上海农业学报, 20 (3): 15~18
5 意义与进展 马缨杜鹃又名马缨花,是杜鹃花
科杜鹃属的极少数乔木类杜鹃花种类之一,产于
云南大部分地区及贵州的部分地区,缅甸东北部
也有发现,均在海拔 1 200~3 000 m的高山上。云
南民间用马缨花供药用,味苦凉,小毒,具有
清热解毒、止血调经之功效,主治骨髓炎、消
图 6 马缨杜鹃炼苗移栽