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小黄李的离体快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第3期,2006年6月 477
小黄李的离体快速繁殖
乔玉山 许宽勇 章镇* 丁治国 李晓燕
南京农业大学园艺学院,南京 210095
In vitro Rapid Propagation of Prunus salicina Lindl. ‘Xiaohuangli’
QIAO Yu-Shan, XU Kuan-Yong, ZHANG-Zhen*, DING Zhi-Guo, LI Xiao-Yan
College of Horticulture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China
收稿 2005-12-02 修定  2006-04-12
资助  国家自然科学基金(30370987)。
*通讯作者(E-mail: zhangzh@njau.edu.cn, Tel: 025-
84395724)。
1 植物名称 小黄李(Prunus salicina Lindl. ‘Xiao-
huangli’)。
2 材料类别 成龄植株(嫁接无性系)萌发的腋芽。
3 培养条件 初始培养基:1/2MS (大量元素减半)+
6-BA 2.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;增殖培养
基:1/2MS+NAA 0.2+6-BA 0.8;生根培养基:
1/2MS+NAA 0.2。以上培养基中均附加25 g·L-1蔗
糖和 6.5 g·L-1 琼脂,pH 5.8~6.0,于 0.11 MPa、
121~122℃湿热灭菌20 min。培养容器为150 mL
P C 塑料三角瓶(上海稼丰园艺用品有限公司生
产)。光照时间为14 h·d-1,光强40~50 mmol·m-2·
s-1,培养温度(25±2)℃。增殖培养每30~40 d 转
接1 次。
4 生长与分化情况
4.1 初始培养 天气晴朗的午后,剪取带芽茎段
(萌发 1~2 周),先用手轻轻地掰下芽,再用洗洁
精冲洗 2 遍,将其装入带小孔的塑料杯中放流水
下冲洗 4 h 以上。接种前,用 70% 的酒精浸泡
30 s,然后用无菌水冲洗 1~2 遍,再用 0.1% 升
汞溶液浸泡8 min,接着用无菌水冲洗4~5次,将
其接种于已灭菌的初始培养基上。40~50 d 后长
出新芽。
4.2 增殖培养 将初始培养长成的芽再切下来,
接种于增殖培养基上,芽的伸长逐渐加快,至
20~30 d时长成 1.5~2.5 cm的嫩梢。此时,其基
部的腋芽又萌动,至 40 d 时形成 4~6 个丛生芽。
将丛生芽分割成单芽或切成芽茎段和茎尖,再接
种到增殖培养基上,同样能形成 4~6 个丛生芽。
在增殖培养基上40 d左右可增殖1次,平均增殖
4~6 倍(图 1)。
4.3 生根培养 将丛生芽分割成单芽后接种至生根
培养基上,设有4个梯度:(1) 1/2MS+NAA 0.2;
(2) 1/2MS+NAA 0.3;(3) 1/2MS+NAA 0.5;(4) 1/2
MS+NAA 0.7。10 d 后,茎段基部开始膨大隆起,
30 d 后长出 2~3 条根(图 2)。其中,培养基(1)生
根效果最佳,生根率达 10 0%。
4.4 移栽炼苗 将已生根的试管苗置于遮荫棚下锻
炼 4~5 d,再打开瓶盖锻炼 2~3 d,然后小心洗
净基部培养基,用 0.1% 的多菌灵消毒后清水洗
净,移栽至经灭菌的蛭石、珍珠岩、泥炭( 1 ∶
1∶1)混合的基质中,在遮阴棚中炼苗。1 周内,
每2 d 浇灌 1 次 1/2MS 营养液,随后,每周浇灌
1次;每2 d浇水1次。40 d后,成苗率可达80%
以上(图 3)。
5 意义与进展 小黄李是中国李等核果类果树的半
矮化、耐涝性极强的优良砧木( 张加延和周恩
1998;张静茹等 2003)。传统上主要依赖种子繁
殖,而种子来源有限且发芽率低、存贮困难等使
其应用受到限制,再者,种子繁殖培育出的砧木
苗易出现性状分离现象。因此,采用无性途径培
育生长势一致的小黄李砧木,是当前生产中亟待
解决的问题。小黄李扦插生根较难,用组织培养
快速繁殖小黄李无性系砧木可能有助于解决上述问
题。如果此技术途径获得的大量小黄李无性系砧
木应用于生产,可使中国李的栽培技术从传统的
乔化稀植过渡到矮化密植,并达到早期丰产的目
的,也可为中国李的设施栽培提供适宜砧木,在
提高中国李栽培的经济效益和促进我国李产业的发
展均有积极意义。核果类果树离体培养比较困
难,目前仅有少量树种有一些报道( 周素平等
植物生理学通讯 第42卷 第3期,2006年6月478
1998;马玉华和郭春会 2005;张秦英和陈俊愉
图2 小黄李的生根苗
图1 小黄李的离体快繁增殖
图3 小黄李移栽成活
2005),而小黄李离体快速繁殖目前国内外尚无报
道。
参考文献
马玉华, 郭春会(2005). 普通扁桃美国品种“Mission”的组织
培养与黄化苗的防止. 植物生理学通讯, 41 (1): 68
张加延, 周恩主编(1998). 中国果树志·李卷. 北京: 中国林业出
版社
张静茹, 陆致成, 巩文红(2003). 李品种资源的鉴定评价. 中国果
树, (6): 22~23
张秦英, 陈俊愉(2005). 梅花抗寒品种“花蝴蝶”的组织培养.
植物生理学通讯, 41 (1): 68
周素平, 张骞, 程斐, 王学军(1998). 毛樱桃苗木的快速繁殖. 植物
生理学通讯, 34 (6): 441~442