全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 2期，2007年 4月 327
日本椴的组织培养与快速繁殖
陈罡 *，马冬菁，叶景丰，潘文利，范俊岗
辽宁省林业科学研究院林业生物技术与分析测试中心，沈阳 110032
Tissue Culture and Rapid Propagation of Tilia japonica Simonk.
CHEN Gang*, MA Dong-Jing, YE Jing-Feng, PAN Wen-Li, FAN Jun-Gang
Forestry Biotechnology and Analysis Test Center, Liaoning Research Academy of Forestry Sciences, Shenyang 110032, China
收稿 2006-12-20 修定　 2007-02-28
* E-mail：djgang1625@163.com
1 植物名称 日本椴(Tilia japonica Simonk.)，别
名华东椴。
2 材料类别 茎尖和茎段。
3 培养条件 基本培养基为MS。诱导培养基：(1)
MS+6-BA 1.5 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.5。继代
培养基：(2) MS+6-BA 1.0+NAA 0.5；(3) MS+6-
BA 1.0+NAA 0.1。生根培养基：(4) 1/2MS+IBA
0.5+NAA 0.05。以上培养基中均加入 6 g·L-1琼脂和
30 g·L-1蔗糖，pH 5.9~6.0。培养室中温度为(25±
2) ℃，光照时间 12 h·d-1，光强约 60 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌外植体的获得 从田间剪取二年生供试植
物幼嫩枝条，剪掉叶片，用清水冲洗 2~3 h，将
其切成 5~7 cm的茎段，再用蒸馏水冲洗 2~3次后
转至无菌室。在超净工作台上，将切好的茎尖和
茎段用 70%乙醇浸泡 40 s，无菌水冲洗 3~4次，再
用0.1%升汞浸泡8 min，然后用无菌水冲洗6~7次，
将茎段切成 1.0~1.5 cm的单芽茎段，接种于培养基
(1)中，放置于灯光培养室内进行培养。
4.2 芽的诱导 外植体接种 7~10 d后，腋芽开始
萌动，茎尖开始变绿、伸长，15 d后茎段明显
增高并逐渐形成饱满的腋芽，30 d后茎段上可长
出 4~8 个腋芽。
4.3 芽的增殖 将茎段上诱导出的腋芽切分后转入
培养基(2)中进行扩繁培养，25 d后又形成新的腋
芽。以后平均 25~30 d继代一次，增殖系数可达
4~8 (图 1)。生根前，再将芽苗转入培养基(3)中
进行壮苗培养。
4.4 生根培养 将长至 4~5 cm高的芽苗切成 1.5~
2.0 cm的小苗，并接种于培养基(4)中。10 d左
右，茎段基部根原基突起；20 d左右，从根原
基上长出白色新根，每株生根 3~4条，根长 1.5~
2.5 cm，生根率达 90%。
4.5 炼苗及移栽 当植株长出3~5条根时进行炼苗。
开瓶后在自然光下放置 2~3 d，这样有利于提高瓶
苗的适应能力。然后用清水清洗干净，水温
20~25 ℃。将分好的苗用 0.1%代铵森浸根 3~5
mi n，之后将苗进行移栽。每天早晚喷水各一
次，培养基质为细河沙和珍珠岩按2:1比例配置的
混合土。栽移成活率可达到 80%。
5 意义与进展 日本椴属于椴树科椴树属，叶近
圆形，先端渐尖，边缘有深锯齿。花 7~4 0 朵，
呈下垂聚伞花序。原产于日本，我国产于江苏、
安徽、浙江等地。其生长速度快，抗性强，材
质好，是较优良的木材原料，同时也是园林绿化
的优良树种。日本椴是我院近年来从国外引进的
国外珍贵树种之一，由于其数量有限，因此开展
该树种的组织培养和快速繁殖研究，对推广和开
发这一珍稀树种的优良资源及保存优良品种可能有
一定的意义。日本椴的组织培养及快速繁殖尚未
见报道。
图 1 日本椴芽的增殖培养