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粉花石斛的组织培养和植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 1期,2004 年 2 月64
粉花石斛的组织培养和植株再生
乙 引* 张宇斌
贵州师范大学生物技术与工程学院, 贵阳 550001
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Dendrobium loddigesii
YI Yin*, ZHANG Yu-Bin
School of Biotechnology and Engineering, Guizhou Normal University, Guiyang 550001
收稿 2003-02-14 修定   2003-07-28
资助 贵州省优秀科技教育人才省长基金项目(200104)。
* E-mail:yiyin231@hotmail.com, Tel:0851-6702541
1 植物名称 粉花石斛(Dendrobium loddigesii),
又名美花石斛、小环草、小黄草。
2 材料类别 茎段侧芽。
3 培养条件 以MS和1/2MS为基本培养基。诱
导培养基附加:(1)6-BA 1.0 mg.L-1(单位下
同)+NAA 0.4;(2)6-BA 2.0+NAA 0.4;
(3)6-BA 1.0+NAA 0.1;(4)6-BA 0.8+NAA
0.1;(5)NAA 0.6。除(5)号培养基为1/2MS
外,其余的均为 M S 培养基。上述培养基均附加
3% 蔗糖、0.8 % 琼脂,pH 5 . 8。培养温度为
(22±2)℃,光照12 h.d-1,光照度1 500~2 000
l x。
4 生长与分化情况
4.1 芽的诱导 取生长健壮的植株上长约1~1.5
cm 的带芽茎段,自来水冲洗 1 h,先用 75% 酒精
消毒30 s,再用0.1% HgCl2溶液消毒15 min,无
菌水冲洗 6~7 次,切掉基部伤口褐化部分,接
种到培养基(1)中。10 d 左右腋芽开始萌发,
20 d后芽长至1.5 cm左右。此时,将芽切下转入
下一步培养。
4.2 芽的增殖与继代 将侧芽从茎上切下,接种
到培养基(2)中。30 d 左右,将无菌苗重新
转接于相同的培养基上,连续转接 2~3 次。此
时,丛生芽增殖系数为 2。将丛生芽接入培养基
(3)中继代培养 30 d 后,丛生芽增殖系数增至
8~10。
4.3 壮苗及生根 将丛生芽切成单个芽体,接种
到培养基(4)中。待芽长至高约 4~5 cm 时转
入培养基(5)中,2 周后芽体基部产生 3~5 个
白色根尖,并逐渐生长成不定根(图 1)。生根率
可达 9 8 % 。
4.4 试管苗的移栽 当不定根长至2 cm以上时,
打开瓶塞,炼苗 1 周,然后从培养瓶中取出,洗
掉根部培养基,移入蛭石和木屑各半的基质中。
保湿,遮荫,2 周后移植于营养丰富的培养土
中,常规管理,成活率达 9 5 % 左右。
5 意义与进展 石斛属兰科石斛属,始载于《神
农本草经》。有生津益胃、清热养阴、清咽利
嗓等功效,为许多中药的配伍。根据《证类本
草》及《植物名实图考》记载,古代所用的石
斛有多种植物来源,但以粉花石斛为主的小黄草
价格最为昂贵。目前,用于药材的粉花石斛基本
上为野生资源。随着人类活动的增加,粉花石斛
生境受到严重破坏,资源逐渐枯竭,濒于灭绝。
对于石斛属植物的繁殖,采用种子或分株方式速
度慢、效率低,而通过原球茎诱导方式进行离体
繁殖,成功率亦不高。本文直接用侧芽诱导丛生
芽,有取材方便、操作简单、繁殖系数高等优
点。粉花石斛组织培养尚未见报道。本文结果为
这一中药资源的保护和有效利用建立了新的值得考
虑的途径。
图1 粉花石斛组培苗