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明日叶的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第6期,2006年12月1142
收稿 2006-10-23 修定  2006-11-21
资助 江苏省农林厅三项工程项目[SX(2006)127]和国家林业
局“948”项目(2006-4-13)。
* 通讯作者(E-mail: tianxj@nju.edu.cn, 025-83686787)。
明日叶的组织培养与快速繁殖
李佳1 张智俊1,2 周长芳1 田兴军1,*
1 南京大学生命科学学院,南京 210093;2 浙江林学院浙江省现代森林培育技术重点实验室,浙江临安 311300
Tissue Culture and Rapid Propagation of Angelica keiskei Koidz.
LI Jia1, ZHANG Zhi-Jun1,2, ZHOU Chang-Fang1, TIAN Xing-Jun1,*
1School of Life Sciences, Nanjing University, Nanjing 210093, China; 2Key Lab for Modern Silviculture Technology of Zhejiang
Province, Zhejiang Forestry College, Lin’an, Zhejiang 311300, China
1 植物名称 明日叶(Angelica keiskei Koidz.)。
2 材料类别 叶,叶柄,带芽茎段。
3 培养条件 以MS 为基本培养基。(1)芽诱导培养
基:MS+6-BA 2 mg·L-1(单位下同) +NAA 0.5;
(2)芽增殖培养基:MS+6-BA 1;(3)生根培养基:
MS+NAA 1。以上培养基均含3% 蔗糖、1% 琼脂,
pH 6.8。培养温度(22±2)℃,光强40 mmol·m-2·s-1
左右,光照时间 16 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 取材与消毒 取明日叶长约1 cm的带芽茎段、
叶片和叶柄,用洗衣粉漂洗5 min,流水冲洗10
min,然后在超净工作台上用70%酒精浸泡10 s,
再用 0.1% HgCl2 灭菌 10 min,并不断搅拌,最
后用无菌水冲洗 5~8 次,消毒也可省去酒精浸泡
的步骤。用无菌滤纸吸干材料上的水分,切割叶
片为0.5 cm×0.5 cm的小片,叶柄长0.5 cm,将
3种材料接种在培养基(1)上。
4.2 愈伤组织及不定芽的诱导 明日叶叶片和叶柄
在培养基(1)上,经过3个多月的培养,未长出愈
伤组织。最适合的外植体为带芽茎段,在培养基
(1)上,30 d 左右便形成白色愈伤组织,并长出
绿色芽点。继续培养后可诱导出丛生状芽。
4.3 增殖培养 将丛生芽分离,再接到培养基(2)
中,20 d 左右芽增殖,增殖倍数约为 3。通过
反复切割,在较短时间里可得到大量丛生芽(图1)。
4.4 生根与移栽 将丛生芽切割后接到生根培养基
(3)中,约 40 d 后,开始出现根。在生根培养过
程中发现,全天 24 h 暗培养有利于生根,暗培
养约20 d即可生根。长出根后继续培养20 d,根
可达 1~1.5 cm,生根率约 80%,苗高 4~5 cm。
此时,将培养瓶放到全天自然光,温度约25℃的
通风房间里炼苗20 d,然后打开瓶盖,用镊子将
试管苗从培养瓶中取出,洗掉根部培养基,移栽
入营养土中,早晚各喷水 1 次,10 d 后,移栽
苗成活率 8 0 % 以上。
5 意义与进展 明日叶,又名八丈芹、灵草、海峰
人参、长寿菜,属伞形科当归属 2 年生或多年生
草本植物,是一种药食兼用的蔬菜。本文中的明
日叶原产于日本火山灰地质的八丈岛,适应高冷
环境,在中、高海拔可全年栽种,低海拔或平
原地区适秋种。20多年前从日本引进,我国台湾
亦广泛栽培。据日本食品分析中心研究,此种植
物含有高浓度的天然有机锗和一般植物性食物很少
有的维生素 B 12,以及丰富的叶绿素,同时还含
有人体所需要的20多种矿质元素和特殊物质。具
有增强免疫力、补血、抗菌、促进成长、增进
食欲和防癌等功效。明日叶的果实是双悬果,其
种子发芽率较低,不易栽培。组织培养技术可以
大大提高其繁殖系数,有一定的潜在性应用前
景。明日叶的组织培养与快速繁殖尚未见报道。
图1 明日叶的继代增殖