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牛皮杜鹃的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 2期,2008年 4月300
收稿 2008-01-14 修定  2008-02-29
资助 通化师范学院自然科学基金(xs060073)和吉林省科技厅
项目(20 0 70 5c0 5)。
* E-mai l:gu dizhou@163 .com;Tel:04 35-32 081 31
牛皮杜鹃的组织培养与快速繁殖
顾地周 *,丛小力,姜海智,张秋菊,姜云天,朱俊义
通化师范学院生物系,吉林通化 134002
Tissue Culture and Rapid Propagation of Rhododendron chrysanthum Pall.
GU Di-Zhou*, CONG Xiao-Li, JIANG Hai-Zhi, ZHANG Qiu-Ju, JIANG Yun-Tian, ZHU Jun-Yi
Department of Biology, Tonghua Normal College, Tonghua, Jilin 134002, China
1 植物名称 牛皮杜鹃(Rhododendron chrysanthum
Pa ll. ),又称牛皮茶。
2 材料类别 新萌发嫩芽。
3 培养条件 基本培养基为MS。(1)嫩芽基部愈伤
组织诱导培养基:1/4MS+6-BA 2.5 mg·L-1 (单位
下同)+NAA 1.0+3%蔗糖;(2)愈伤组织分化培养
基:1/4MS+6-BA 4.0+NAA 0.5+3%蔗糖;(3)继
代增殖培养基:1/4MS+6-BA 3.5+NAA 0.2+3%蔗
糖;(4 )壮苗生根培养基:MS+IAA 0.1+1% 蔗
糖。上述各培养基均加 0.9%琼脂,pH 5.4。培
养温度为(26±2) ℃,光照强度为 20 µmol·m-2·s-1,
光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 嫩芽基部愈伤组织诱导 7月中旬,取牛皮杜
鹃的新萌发嫩芽,在超净工作台上用 70%酒精涮
洗 3 min,再用 5%青霉素溶液浸泡 10 min,用
无菌水冲洗10次,无菌滤纸吸干表面水分(熊友华
等 2007),切除被杀菌消毒剂损伤部分,然后将
其接种到培养基(1)中进行嫩芽基部愈伤组织诱导培
养。45 d后嫩芽基部完全脱分化形成愈伤组织。
4.2 嫩芽基部愈伤组织的分化 将嫩芽基部产生的
愈伤组织转接至培养基(2 )中继续培养至 70 d,
愈伤组织分化出芽苗;培养至 90 d,苗可长到
1.5~2.0 cm,且苗的形态及长势很好。
4.3 芽继代与增殖 将带有芽苗的愈伤组织切割成
小块,转接到培养基(3)中进行继代增殖培养。25
d为一个继代增殖周期,增殖倍数平均达 30以上。
4.4 壮苗及生根 将生长健壮的丛生苗切下,然
后将其移入培养基(3)中。培养 20 d开始生根,35
d 后幼苗的主干长出 5 ~ 7 条不定根,生根率达
100%,苗高可达 3~5 cm以上。
4.5 炼苗和移栽 壮苗生根后,从培养瓶中取出试
管苗,在含有3 mg·L-1多菌灵溶液中洗去苗上残留
的琼脂,然后植入经100倍杀毒矾消毒过的腐烂松
针、泥炭土和细河砂(2:1:1)混合的基质中,用透
性好的塑料薄膜覆盖以保湿、保温,湿度保持在
85%,温度控制在(18±2) ℃,自然光照 8 h·d-1,
每天中午通风换气 10 min,15 d后揭去薄膜,每
天早晨喷洒清水 1次(顾地周等 2007),成活率达
75 %以上。
5 意义与进展 牛皮杜鹃是杜鹃花科常绿小灌木,
国家三级重点保护植物。《中国珍稀濒危保护植物
名录(第一册)》中定为渐危种,《中国物种红色名
录》中定为易危种(汪松和解焱 2004)。是野生珍
稀濒危药用植物,主要功能为收敛、抗菌、发汗、
强心等。牛皮杜鹃叶大、光亮,花淡黄色,十
分美观,可驯化为观赏花卉。牛皮杜鹃在严寒季
节叶片仍为绿色,是上好的观赏园艺品种。因其
生于高山冻原和石质山坡,又是水土保持的好植
物,对维持生态平衡有一定的作用,还可作为高
山杜鹃育种的种质资源。分布区甚狭,由于人们
乱采乱挖,野生资源受到极大威胁。种子细小,
萌发率低。扦插繁殖生根率低且根数少,移栽成
活率极低。在长白山区其数量已非常稀少,仅在
长白山国家级自然保护区内有较大的种群面积。本
文结果对其开发和利用可能有一定的参考意义。与
其同属的其他种的组织培养已有报道(杨乃博
1985;董春枝等 1988;秦静远和黄玉敏 2003),但
牛皮杜鹃的组织培养和快速繁殖尚未见报道。
参考文献
董春枝, 郑开文, 潘季淑(1988). 三种杜鹃花的茎尖快速繁殖. 植
物生理学通讯, (2): 55~60
顾地周, 何晓燕, 朱俊义, 孙忠林, 张秋菊(2007). 细叶杜香的组
织培养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 43 (5): 898
秦静远, 黄玉敏(2003). 杜鹃的组织培养及快速繁殖. 植物生理
学通讯, 39 (1): 38
汪松, 解焱(2004). 中国物种红色名录(第一卷). 北京: 高等教育
出版社, 304~464
熊友华, 马国华, 刘念(2007). 金姜花的组织培养和快速繁殖. 植
物生理学通讯, 43 (1): 135
杨乃博(1985). 春夏鹃的试管繁殖. 植物生理学通讯, (5): 38