免费文献传递   相关文献

山橙胚的离体培养和植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 44卷 第 3期,2008年 6月 517
山橙胚的离体培养和植株再生
李志英,符运柳,徐立 *
中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,海南儋州 571737
In vitro Culture and Plant Regeneration from Embryos of Melodinus suaveolens
Champ. ex Benth.
LI Zhi-Ying, FU Yun-Liu, XU Li*
Institute of Tropical Crops Genetic Resources, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Danzhou, Hainan 571737,
China
收稿 2008-03-12 修定 2008-05-09
资助 科技部科研院所社会公益研究专项(200 5DIB4J0 45)。
* 通讯作者( E - m a i l:x l l z y @ 2 6 3 . n e t;T e l:0 8 9 8 -
2 3 3 0 0 2 8 4 )。
1 植物名称 山橙(Melodinus suaveolens Champ. ex
B ent h . ),又名马骝藤、马骝橙藤、猴子果。
2 材料类别 授粉后 4 个月果实中的胚。
3 培养条件 胚萌发培养基:(1) MS基本培养基。
不定芽诱导培养基:(2) MS+6-BA 6.0 mg·L-1 (单位
下同)+NAA 0.2+椰子乳(CM) 50 mL·L-1。芽增殖
培养基:(3) MS+6-BA 4.0+NAA 0.1。生根培养
基:(4) 1/2MS+IBA 2.0+NAA 0.2。上述培养基
中均添加 30 g·L-1蔗糖和 6.5 mg·L-1卡拉胶,pH 5.8。
培养温度为(25±2) ℃,光照强度为 40 µmol·m-2·s-1,
光照时间为 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌外植体的获得 取山橙授粉后 4个月的果
实,除掉果柄,洗涤剂浸泡 30 min,流水冲洗
10 min后,在超净工作台上吸干水分,75% 酒
精擦拭果实表面,吹干后,小心去掉果皮和果
肉,剥出种子,接种于培养基( 1 )上。
4.2 不定芽的诱导 种子于培养基(1)中培养70 d后
开始萌发,剥取带子叶胚接种于不定芽诱导培养
基(2)上,诱导培养 40 d后,形成白色胚性愈伤
组织,转入芽增殖培养基(3)中培养 30 d后,产
生绿色不定芽。
4.3 芽的增殖 不定芽在芽增殖培养基上培养 60 d
后,形成不定芽丛,芽长 1~3 cm。每 40 d将不
定芽切段转到新鲜的培养基(3)中,促使不定芽连
续增殖,增殖系数平均为 2。
4.4 根的诱导与移栽 取2~3 cm的不定芽苗转接到
培养基(4)上诱导 20 d左右,芽苗的基部可见根的
形成。50 d左右,根伸长至 3~5 cm,生根率为
100% (图 1)。将生根苗移栽到由河沙、揶糠、腐
熟有机肥(5:3:2)配成的基质中,保湿遮荫 15~20 d,
成活率达 90% 以上。
5 意义与进展 山橙为夹竹桃科山橙属植物,《本
草求原》、《岭南采药录》、《广东中药》和《植
物名实图考》中均有记载,其果实性苦、平,有
小毒,可行气、止痛、除湿、杀虫。滋阴,消
热积气痛,功同罗汉果;治膈症、疝气、瘰疬、
皮肤热湿、湿癣疥癞。山橙分布于广东、广西和
海南等地,生于丘陵地、山谷林中,攀援石壁上。
高大木质藤本;浆果圆球形,直径 5~6 cm,熟时
橙红色,用种子繁殖。由于山橙种子繁殖速度
慢,加之野生山橙的数量不断减少,因此需要
建立山橙的离体再生体系用于该种质的安全保存
和开发利用。山橙的组织培养尚未见报道。
图 1 山橙不定芽生根