全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 4期，2007年 8月 749
收稿 2007-05-29 修定 2007-07-06
资助 国家林业局“9 4 8”项目(2 0 0 2 -C0 4 , 2 0 0 5 -4 -3 7 )。
* 通讯作者(E-ma il：wangyan@caf.a c.cn；Tel：0 10 -
6 2 88 8 9 63 )。
报春石斛的组织培养与快速繁殖
张莹，王雁 *，李振坚
中国林业科学研究院林业研究所，北京 100091
Tissue Culture and Rapid Propagation of Dendrobium primulinum Lindl
ZHANG Ying, WANG Yan* , LI Zhen-Jian
Research Institute of Forestry, Chinese Academy of Forestry, Beijing 100091, China
1 植物名称 报春石斛(Dendrobium primulinum
Lindl)。
2 材料类别 茎尖和茎段。
3 培养条件 芽诱导培养基：(1) MS+6-BA 2.0
mg·L-1 (单位下同) +NAA 0.1；(2) MS+6-BA 2.0+NAA
0.5。芽生长培养基：(3) MS+6-BA 0.2。芽增殖
培养基：(4) MS+6-BA 0.5；(5) MS+6-BA 1.0+NAA
0.5；(6) MS+6-BA 1.0+NAA 0.1；(7) MS+6-BA
1.0+NAA 0.1+10% 椰子水。生根培养基：(8 )
MS+NAA 0.2+活性炭 0.5 g·L-1。上述培养基中均
添加 20 g·L-1蔗糖和 7.0 g·L-1琼脂，pH 5.6~5.8。
培养温度(25±2) ℃，光照强度 40 µmol·m-2·s-1, 光
照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取报春石斛当年生具 5~6个
节的幼嫩茎段，在自来水下冲洗 1 h后，去除叶
片，剪成 2段，在超净工作台上用 70%酒精浸泡
30 s，0.1%升汞灭菌 6 min，无菌水冲洗 3~4次，
剥除紧紧包裹茎段的叶鞘，再用 0.1%升汞消毒 3
min，无菌水冲洗 6~8 次，用无菌吸水纸吸干，
切取 1 cm左右带节的茎段和茎尖。
4.2 芽的诱导 将茎尖和茎段接种到培养基(1)和(2)
上，18 d后培养基(1)上的茎尖和茎段侧芽开始萌
发(图 1)，其萌发速度和生长速度均优于培养基
(2)，培养基(1)的诱导率达 85%，培养基(2)的诱
导率为 78%。 当顶芽和侧芽长约 1 cm时，将幼
芽从外植体上切下转接入培养基(3 )中，约 3 周
后，芽生长至 2 cm左右，叶片 2~ 3 枚。
4.3 芽的增殖与继代 将生长健壮的幼芽转接入培
养基(4)~(7)上进行增殖，以 50 d为一个继代增殖
周期，计算出每种培养基的扩繁系数(图 2)，其
中培养基(7)的扩繁系数最高，达 3.8，其次是培
养基(6)，达 3.2。结果说明低浓度的NAA有利于
增强6-BA的作用，且附加物椰子水对丛生芽的增
殖也有一定的促进作用。
4.4 生根及移栽 将丛生芽转接入培养基(3)上，待
生长至约 3 cm时，即可转接到培养基(8)上进行
不定根的诱导，培养约 20 d后，可长出 2~3条
不定根，形成完整植株(图 3)，生根率达 85%。
待根长 2~3 cm、根系粗壮时，打开瓶盖，置于
温室中，炼苗 2~4 d后，从培养瓶中取出组培苗，
图 1 报春石斛茎段侧芽萌发
图 2 报春石斛的增殖培养
植物生理学通讯 第 43卷 第 4期，2007年 8月750
洗净根部的培养基，移栽入湿润的水苔中(图 4)，
保持环境温度 20~25℃，成活率可达 92%。
5 意义与进展 报春石斛为兰科石斛属多年生草本
植物，花多而鲜艳，具有极高的观赏价值，多附
生于海拔 700~1 800 m的山地疏林中树干上，我国
图 3 报春石斛生根苗
图 4 报春石斛移栽
云南的东南部至西南部是其主要分布中心。目前
有关金钗石斛和铁皮石斛等药用石斛的研究颇为广
泛(高培元和陈建妙 2 0 0 2；张启香和方炎明
2005)，但观赏性石斛如报春石斛和兜唇石斛的报
道相对较少。报春石斛在自然状态下很难获得种
子，通过人工授粉等方法获得的种子其后代的性状
易发生分离，不能保持母株的优良性状。组培快
繁技术在短期内可以繁殖得到大量的试管苗，且幼
苗整齐，性状优良，可能是保护报春石斛种质资
源的有效手段。近年来，与其同属的其他石斛如
粉花石斛、流苏石斛和玫瑰石斛等的组培快繁技术
已有报道(乙引和张宇斌 2004；付志惠等 2006；
白音等 2006)，但报春石斛的组织培养尚未见报
道。
参考文献
白音, 包英华, 王文全, 阎玉凝(2006). 玫瑰石斛的组织培养及快
速繁殖. 植物生理学通讯, 42 (5): 903
付志惠, 李洪林, 杨波(2006). 流苏石斛的组织培养. 植物生理学
通讯, 42 (4): 690
高培元, 陈建妙(2002). 金钗石斛的茎段组织培养与植株再生. 中
草药, 11: 1031~1033
乙引, 张宇斌(2004). 粉花石斛的组织培养和植株再生. 植物生
理学通讯, 40 (1): 64
张启香, 方炎明(2005). 铁皮石斛组织培养及试管苗营养器官和
原球茎的结构观察. 西北植物学报, 25 (9): 1761~1765