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华西委陵菜的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第5期,2006年10月 909
收稿 2006-04-10 修定  2006-06-20
资助 兰州大学交叉学科青年创新研究基金项目(Lzu-200312)。
* 通讯作者(E-mail: housw@lzu.edu.cn, Tel: 0931-
3261915)。
华西委陵菜的组织培养与快速繁殖
何雯婷1 侯岁稳1,2,* 王崇英1
1 兰州大学生命科学学院,兰州 730000;2 中国科学院近代物理研究所,兰州 730000
Tissue Culture and Rapid Propagation of Potentilla potaninii Wolf
HE Wen-Ting1, HOU Sui-Wen1,2,*, WANG Chong-Ying1
1School of Life Science, Lanzhou University, Lanzhou 730000, China; 2Institute of Modern Physics, Chinese Academy of Sciences,
Lanzhou 730000, China
1 植物名称 华西委陵菜(Potentilla potaninii
Wolf)。
2 材料类别 子叶和下胚轴。
3 培养条件 以MS 为基本培养基。(1)愈伤组织诱
导培养基:MS+2,4-D 0.5 mg·L-1 (单位下同); (2)
芽分化培养基:MS+6-BA 5.0+NAA 1.0;(3)芽继
代培养基:MS+6-BA 5.0+NAA 1.0+GA3 5.0;(4)
生根培养基:1/2MS+IAA 0.5+NAA 1.0。上述培
养基均添加3% 蔗糖和 0.7% 琼脂,pH 为 5.8。培
养温度为16和 25℃,光强30 µmol·m-2·s-1 左右,
光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织的诱导 将种子用70%乙醇浸泡30 s,
用 0.1% 升汞溶液灭菌 10 min,无菌蒸馏水清洗
5次,接种于MS培养基上。取生长7 d的无菌苗,
将其子叶和下胚轴切成5~10 mm 的切段,接种在
培养基(1)中。在 25℃下10 d后,材料伤口处有
少量愈伤组织产生且生长速度极为缓慢。将其转
移到16℃下,30 d后愈伤组织体积增长了2~3倍。
4.2 芽分化及继代培养 将生长状态良好的愈伤组
织切成 0.5 mm×0.5 mm 的小块,转至培养基(2)
上,置于 16℃下培养。10 d 后,愈伤组织上形
成突起;20 d 左右开始形成芽,平均每块愈伤组
织分化的芽数为12.6±0.3。将这些芽从愈伤组织
上剥离后接种于同一培养基上,且分别置于 16、
2 5℃培养。2 个月后,2 5℃下的芽全部枯黄死
亡,而 1 6℃下芽生长状况良好。
4.3 生根培养及移栽 将培养基(3)中长3 cm以上
的无根苗转接在培养基(4)上,3周后可有大量根
系出现,呈辐射状,生根率 100%。取根系发达
的再生苗,洗净培养基后栽至由珍珠岩铺成的苗
床,湿度保持在85% 以上。过渡2 周后,新根长
出,根系发达,平均根长 6~8 cm。将苗转至混
合土(营养土:蛭石=1:1)中。在培养室里继续培养
3 周左右,移栽至植物园大田中,在自然条件下
生长 3 个月后,成活率为 81.4%。第 2 年春季,
新芽破土而出,5 月开花,1 0 月结籽,生长状
态完全正常。取大田中的华西委陵菜腋芽,消毒
后放在培养基(2)上,分别在16和 25℃再次进行
快繁,在25℃下的培养情况与16℃下的相似,未
出现死亡现象,说明其已驯化,可在常温下生长。
5 意义与进展 华西委陵菜属蔷薇科委陵菜属,多
年生草本植物,主要分布于我国青藏高原,具有
多种经济价值。它具丛生匍匐茎,高 10~30 cm,
抗旱性良好,生长迅速,种植后呈半野生状态,
与蓝羊茅、马蹄金等同为观赏兼休闲型草坪的最
理想草种(王淑芬等2006;田志宏和严寒2003),
其黄花更是很好的草坪点缀品。华西委陵菜根系
发达,固土能力强,地上部分枝繁叶茂,覆盖
度大,能减缓径流,防止水土流失,是一种很
好的水土保持植物。另外,华西委陵菜由于富含
单宁,民间长期以来作为中草药,是单宁药物的
重要药源。但由于其生长在高海拔地区,限制了
它的应用和发展。因此,用细胞工程建立华西委
陵菜的无性繁殖体系且在普通生境中用于引种,
可能是值得考虑的。华西委陵菜离体培养成苗尚
未见报道。
参考文献
田志宏, 严寒(2003). 马蹄金的组织培养和植株再生. 植物生理学
通讯, 39 (5): 481
王淑芬, 李雪, 简丽观(2006). 蓝羊茅的组织培养与植株再生. 植
物生理学通讯, 42 (1): 67