全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第4期,2005年8月494
云南拟单性木兰的组织培养
陈芳* 陈强 陈娟
云南省林业科学院云南珍稀濒特森林保护和繁育重点试验室,昆明650204
Tissue Culture of Parakmeria yunnanensis Hu
CHEN Fang*, CHEN Qiang, CHEN Juan
Key Lab of Protection and Breeding for Rare, Endangered and Special Forest Plant Species, Yunnan Forestry Academy,
Kunming 650204, China
1 植物名称 云南拟单性木兰(Parakmeria yun-
nanensis Hu)。
2 材料材料 采用茎尖和带腋芽的茎段。
3 培养条件 (1)启动培养基:MS+6-BA 2.0 mg·L-1
(单位下同)+IAA 0.01+KT 1.0;(2)分化培养基和
继代培养基:MS+6-BA 0.5+NAA 0.01;(3)生根
培养基:1/2MS+NAA 0.5+IBA3.0。培养基(1)和
(2)添加3% 蔗糖、0.5% 琼脂,(3)添加 1.5% 蔗糖、
0.5% 琼脂,pH 5.8。培养温度为(27±2)℃,光
照度 2 000 lx,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 启动培养 取茎尖及带腋芽的茎段,剪去叶
片,留叶柄基部,用毛笔蘸 0.1% 的洗衣粉溶液
轻轻刷干净枝条,用自来水冲洗干净。在超净工
作台上,用 0.01% 的 HgCl 2 溶液进行表面灭菌
10~15 min,最后用无菌水冲洗 5~6 次,接种在
启动培养基(1)上。10~15 d 后,腋芽开始萌动,
40~45 d 后长成 3 cm 左右的嫩梢。
4.2 诱导分化培养 从启动培养基上剪切已萌动的
嫩梢,转入分化培养基(2)中,6~7 d后芽萌动,10
d 开始分化不定芽(图1),20 d时,每个接种的嫩
梢可分化出大于0.5 cm的有效不定芽达4个左右。
继代周期为 45 d。
4.3 根的诱导和定植 当分化培养的试管苗嫩梢长
高至 3~4 cm 时,剪下并转入生根培养基(3)上。
10~15 d后,长出不定根,生根正常,且侧根多,
生根率达80%以上。15~20 d后,将苗移至室外,
在自然光下封口炼苗10~15 d,然后将根部的琼脂
洗净,移栽到经过 0.2% 的高锰酸钾消毒的蛭石
中,浇透水,用塑料膜保湿,放于 2 3 ~ 3 0℃的
温室中生长,成活率达 80% 以上。经过 2~3 周
后将苗栽于营养钵中,在遮光 50% 的阴棚下放置
30 d,再放到光下生长。当苗生长到 20~30 cm
时,即可定植于野外。
5 意义与进展 云南拟单性木兰录属木兰科拟单性
木兰属,国家二级重点保护野生植物(1999年8月
国务院颁布),分布于云南东南部、广西北部和
贵州东南部的局部地区。具叶片浓绿光洁、花朵
洁白芳香、果实红艳夺目、树冠浓密而宽广等特
点,近两年来已成为园林绿化的新热门树种。由
于天然林遭到乱砍滥伐,残存的大树已不多见,
种苗奇缺,本文结果对挽救这一濒危树种和种苗
规模化生产可能有一定的参考价值。云南拟单性
木兰的组织培养尚未见报道。
收稿 2004-09-07 修定 2004-12-20
资助 云南省科技攻关项目(2001NG54)。
*E-mail: chenfang65@sina.com.cn, Tel: 0871-5214523
图1 云南拟单性木兰茎段分化丛芽