全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第6期，2006年12月1124
收稿 2006-05-23 修定 　2006-10-12
资助 贵州省优秀科技教育人才省长专项资金( 黔省专合字
[2005]350 号)。
* 通讯作者(E-mail: mshzhang@163.com, Tel: 0851-
3865937)。
三分三的离体培养和植株再生
张丽霞 张明生* 李花 王宏飞
贵州大学农学院，贵阳 550025
In vitro Culture and Plantlet Regeneration of Anisodus acutangulus C. Y. Wu
et C. Chen
ZHANG Li-Xia, ZHANG Ming-Sheng*, LI Hua, WANG Hong-Fei
College of Agronomy, Guizhou University, Guiyang 550025, China
1 植物名称 三分三 (Anisodus acutangulus C. Y.
Wu et C. Chen)。
2 材料类别 无菌苗叶片。
3 培养条件 (1)种子无菌萌发培养基：MS+6-BA
0.5 mg·L-1 (单位下同); (2)愈伤组织和胚状体诱导
培养基：MS+6-BA 1.0+2,4-D 0.5；(3)生根培养
基：MS+NAA 1.0。以上培养基均附加 3% 蔗糖
和 0.8% 琼脂，pH 5.8。培养温度为(25±1)℃，
光照时间12 h·d-1，光照强度为40 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 在超净台上将种子用75%的
乙醇浸泡 30 s，0.1% 升汞表面消毒 15 min，再
用无菌水冲洗 4~5 次，以无菌滤纸吸干其表面水
分后，接种于培养基(1)上。培养20 d 后，获得
无菌苗，取其叶片作为离体培养的外植体材料。
4.2 愈伤组织和胚状体的诱导 在无菌条件下，将
无菌苗叶片切成 1 cm×1 cm 左右的小块，接种于
培养基(2)上。约7 d后，叶片切块边缘开始出现
愈伤组织；20 d 后，形成大量乳白色光亮的愈伤
组织，接着产生很多淡绿色的胚状体。
4.3 胚状体分化成苗 在培养基(2)上继续培养约
15 d后，胚状体出芽形成健壮的无根小苗(图1)。
4.4 生根培养 将高达3~5 cm的健壮小苗，转接
入生根培养基(3)中诱导生根。15 d 后，幼苗基
部分化出 5~8 条呈辐射状分布的白色小根，生根
率为 1 0 0 %。
4.5 炼苗与移栽 生根20 d，根长达3~5 cm时，
室内开瓶炼苗2 d，取出植株，洗净根部的琼脂，
移栽入盛有已消毒基质(腐殖土:珍珠岩:有机质=
2:1:1)的花盆中，浇水淋透后置于遮阳棚内培养，
成活率达 96% 以上(图 2)。
5 意义与进展 三分三为茄科山莨菪属(也有列入
安妮莎属)多年生草本植物，主要分布于我国云南
西北部海拔 2 750~3 000 m 的山区。根、茎、叶
和种子均富含生物碱，味苦、辛，性温，有剧毒，
具麻醉镇痛、祛风除湿之功效，为民间常用解痉
镇痛药。由于人们长期对其无节制采挖，野生资
源日渐枯竭。本文结果可能对这一野生植物种质
资源的保存和开发利用有一定的参考意义。三分
三的组织培养及植株再生尚未见报道。
图2 三分三移栽成活的试管苗
图1 三分三的胚状体出苗