全 文 ：一株对西红花种球腐烂病有生防效果的蜂房类芽胞杆菌
孕葬藻灶蚤遭葬糟蚤造造怎泽 葬造增藻蚤 在允哉圆园员员鄄员 葬泽 葬 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 葬早藻灶贼 葬早葬蚤灶泽贼 糟燥则皂
则燥贼 燥枣 泽葬枣枣则燥灶 糟葬怎泽藻凿 遭赠 云怎泽葬则蚤怎皂 燥曾赠泽责燥则怎皂
陶中云员 摇 谢国雄圆 摇 曾红星猿 摇 徐福寿圆 摇 谢关林员鄢
渊员援浙江大学生物技术研究所袁 水稻生物学国家重点实验室袁 杭州 猿员园园缘愿曰 圆援浙江省杭州市
植保土肥总站袁 杭州 猿员园园圆园曰 猿援浙江省建德市三都镇红兴西红花种植场袁 杭州 猿员员远园缘冤
栽葬燥 在澡燥灶早赠怎灶员 摇 载蚤藻 郧怎燥曾蚤燥灶早圆 摇 在藻灶早 匀燥灶早曾蚤灶早猿 摇 载怎 云怎泽澡燥怎圆 摇 载蚤藻 郧怎葬灶造蚤灶员鄢
渊员援 杂贼葬贼藻 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 砸蚤糟藻 月蚤燥造燥早赠袁 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 在澡藻躁蚤葬灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 匀葬灶早扎澡燥怎 猿员园园缘愿袁 在澡藻躁蚤葬灶早
孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬曰 圆援 匀葬灶早扎澡燥怎 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶 驭 云藻则贼蚤造蚤扎藻则 杂贼葬贼蚤燥灶袁 匀葬灶早扎澡燥怎 猿员园园圆园袁 在澡藻躁蚤葬灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁
悦澡蚤灶葬曰 猿援 允蚤葬灶凿藻 匀燥灶早曾蚤灶早 杂葬枣枣则燥灶 孕造葬灶贼葬贼蚤燥灶袁 匀葬灶早扎澡燥怎 猿员员远园缘袁 在澡藻躁蚤葬灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
摇 摇 西红花 悦则燥糟怎泽 泽葬贼蚤增怎泽 蕴援是一种名贵中药材袁西
红花种球腐烂病是制约西红花生产的土传病害遥 本
实验室前期研究表明袁浙江省建德地区的室内和大
田西红花种球腐烂病主要由尖孢镰刀菌 云怎泽葬则蚤怎皂
燥曾赠泽责燥则怎皂引起遥 目前袁国内防治该病害的主要措施
是使用化学杀菌剂袁但效果不理想袁而且造成病菌的
抗药性不断增强袁使生态环境污染和农药残留愈加
严重遥 生物防治因其对环境友好和可持续性等优势
越来越受到青睐袁但至今国内外尚未见有关西红花
种球腐烂病生物防治的报道袁本研究从腐烂的西红
花种球及土壤中分离到大批的拮抗菌株咱员暂 袁发现其
中的一株革兰氏阳性菌 在允哉月圆园员员鄄员 菌株具有生防
潜力袁并对该菌株作了进一步研究遥
员 材料与方法
员援 员 材料院尖孢镰刀菌 云援 燥曾赠泽责燥则怎皂 分离自浙江省
建德市三都镇的西红花发病种球遥 供试生防菌为前
期从西红花种球上筛选得到的革兰氏阳性菌
在允哉月圆园员员鄄员 菌株袁阳性对照菌为枯草芽胞杆菌 员
渊月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽 员冤遥 供试药剂 缘园豫多菌灵渊糟葬则遭藻灶鄄
凿葬扎蚤皂冤可湿性粉剂购自无锡市农药有限公司遥 栽葬择
孕则藻皂蚤曾鄄砸藻凿购自上海博彩生物曰琼脂糖购自宝生物
工程有限公司曰细菌 阅晕粤提取试剂盒购自天创生物
技术渊北京冤有限公司曰其它试剂均为进口或国产分
析纯遥 合成的引物来自生工生物工程渊上海冤有限
公司遥
员援 圆 生防菌离体尧活体防病效果及鉴定方法院生防
菌的离体测定参照苏婷等咱员暂的方法遥 以生防菌枯
草芽胞杆菌 员 为阳性对照菌袁未接拮抗菌为阴性对
照遥 活体防病效果测定以 缘园豫多菌灵渊 糟葬则遭藻灶凿葬鄄
扎蚤皂冤可湿性粉剂 猿园园 倍稀释液和 员 伊 员园愿 悦云哉 辕 皂蕴枯
草芽胞杆菌 员 为阳性对照袁以无菌水浸种后接种尖
孢镰刀菌为空白对照袁在允哉月圆园员员鄄员 菌株测定浓度为
员 伊 员园愿 悦云哉 辕 皂蕴遥 置 圆愿 益的培养箱内培养袁员园 凿 后
调查发病情况遥 每处理重复 猿 次遥 根据西红花种球
腐烂病的发病特点和症状特征设定该病的病情分级
标准院园 级院无症状曰员 级院种球腐烂面积占整个种球
的 园 耀 员 辕 缘曰圆 级院占 员 辕 缘 耀 圆 辕 缘曰猿 级院占 圆 辕 缘 耀 猿 辕 缘曰源
级院占 猿 辕 缘 耀 源 辕 缘曰缘 级院种球完全腐烂遥 在允哉月圆园员员鄄员
菌株的主要细菌学测定尧透射电子显微镜渊 贼则葬灶泽皂蚤泽鄄
泽蚤燥灶 藻造藻糟贼则燥灶 皂蚤糟则燥泽糟燥责藻袁 栽耘酝冤观察尧脂肪酸分析及
拮抗细菌 员远杂 则阅晕粤 测定参照苏婷等咱员暂方法遥 采用
阅孕杂软件对各组结果进行统计分析袁用 阅怎灶糟葬灶 氏多
重比较法进行差异显著性检验遥
圆 结果与分析
圆援 员 生防菌离体抑菌及活体防病效果
在允哉月圆园员员鄄员 对尖孢镰刀菌的生长具有很强的
抑制能力袁抑制率达 苑猿援 园园 豫 袁显著高于阳性对照枯
草芽胞杆菌 员 的抑制率 远远援 员愿豫 袁而未接种生防菌
的培养皿已被西红花种球腐烂病菌全部占满遥
在允哉圆园员员鄄员 菌悬液对西红花种球腐烂病有较好的防
治效果袁防效达 缘苑援 员源豫 袁与阳性对照枯草芽胞杆菌
员 和常规农药 缘园豫多菌灵的效果相仿渊表 员冤遥
基金项目院 杭州市科技发展计划项目渊圆园员员园圆猿圆月远缘冤袁 浙江省自然科学基金 渊蕴再员圆悦员源园园苑冤袁公益性行业渊农业冤科研专项渊圆园员园园猿园圆怨冤
作者简介院 陶中云袁女袁员怨愿怨年生袁硕士研究生袁研究方向为植物细菌及生物防治袁 耘鄄皂葬蚤造院 贼葬燥扎赠员愿岳 员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 早造曾蚤藻岳 扎躁怎援 藻凿怎援 糟灶曰 收稿日期院 圆园员猿 原 园员 原 园愿
第 源园 卷摇 第 猿 期
圆园员猿 年摇 远 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 猿
允怎灶藻 摇 圆园员猿
表 员 各处理液对西红花种球腐烂病的活体防治效果
栽葬遭造藻 员 悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 燥枣 贼澡藻 糟燥则皂 则燥贼 燥枣 泽葬枣枣则燥灶 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽
处理摇
栽则藻葬贼皂藻灶贼摇
病情指数
阅蚤泽藻葬泽藻 蚤灶凿藻曾
防治效果渊豫 冤
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠
处理摇
栽则藻葬贼皂藻灶贼摇
病情指数
阅蚤泽藻葬泽藻 蚤灶凿藻曾
防治效果渊豫 冤
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠
在允哉月圆园员员鄄员 源园援 园园 依 园援 怨苑 葬 缘苑援 员源 依 员援 园怨 葬 枯草芽胞杆菌 员 月援 泽怎遭贼蚤造蚤泽 员 源缘援 猿猿 依 园援 愿远 葬遭 缘员援 源猿 依 园援 苑怨 葬遭
缘园豫多菌灵 悦葬则遭藻灶凿葬扎蚤皂 源猿援 猿猿 依 员援 园缘 葬遭 缘猿援 缘苑 依 员援 员猿 葬遭 无菌水 杂贼藻则蚤造蚤扎藻凿 憎葬贼藻则 怨猿援 猿猿 依 园援 怨员 糟 园援 园园 依 园援 园园 糟
摇 摇 注院同列数据后不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏多重比较差异显著渊孕 约园援 园缘冤遥 晕燥贼藻院 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤鄄
糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
圆援 圆 生防菌株鉴定
在允哉圆园员员鄄员 菌落呈圆形尧白色尧扁平尧湿润尧表面
光滑尧边缘整齐渊图 员鄄葬冤曰在液体培养基中菌液浑
浊袁有沉淀物袁并常在菌液表面形成一层菌膜遥 该菌
株的生长温度为 员缘 耀 源缘益袁最适生长温度为 猿园 耀 猿缘
益曰最适生长 责匀为 苑援 园曰革兰氏染色呈阳性袁为兼性
厌氧菌遥 电镜显微观察发现袁该菌体为短杆状袁大小
为 园援 远 耀 园援 愿 滋皂 伊圆援 圆 耀 源援 缘 滋皂渊图 员鄄遭袁糟冤袁具 园 耀 圆
根鞭毛袁无荚膜遥 芽胞为椭圆形袁位于菌体中央或亚
顶端袁大小为 园援 苑 耀 园援 怨 滋皂 伊员援 愿 耀 圆援 圆 滋皂遥
图 员 在允哉圆园员员鄄员 菌落形态渊葬冤及在透射电镜下的菌体形态渊遭尧糟冤
云蚤早援 员 悦燥造燥灶赠 皂燥则责澡燥造燥早赠 渊葬冤 葬灶凿 糟藻造造泽 燥枣 孕葬藻灶蚤遭葬糟蚤造造怎泽 葬造增藻蚤 在允哉圆园员员鄄员 怎灶凿藻则 栽耘酝 渊遭袁 糟冤
摇 摇 脂肪酸分析结果显示袁在允哉圆园员员鄄员 菌株与最相
近的环状芽胞杆菌 月援 糟蚤则糟怎造葬灶泽 的相似性为 园援 员员远袁
表明脂肪酸分析的数据库中缺乏与该菌株完全匹配
的信息袁因为较可靠的脂肪酸分析结果一般应达
园援 远 以上的相似性遥 根据 砸葬葬泽噪葬 等咱圆暂报道袁脂肪酸
分析低相似性的环状芽胞杆菌实际应是蜂房类芽胞
杆菌 孕葬藻灶蚤遭葬糟蚤造造怎泽 葬造增藻蚤遥 将 在允哉圆园员员鄄员 的 员远杂 则阅晕粤
序列递交 郧藻灶月葬灶噪进行 月蕴粤杂栽同源序列检索袁结果
显示袁在亲缘关系相近的前 缘园 个序列中袁前 猿圆 个均
为蜂房类芽胞杆菌袁同源性为 怨愿豫 遥 结合 在允哉圆园员员鄄
员 的主要细菌学特征和脂肪酸分析结果袁将其鉴定
为蜂房类芽胞杆菌遥 该菌株目前已保藏于武汉大学
中国典型培养物保藏中心渊悦悦栽悦悦冤遥
猿 讨论
本试验以引起西红花种球腐烂的尖孢镰刀菌为
目标菌袁从西红花种球表面分离筛选到了一株对其
生长有明显抑制作用的拮抗菌株 在允哉圆园员员鄄员袁经鉴
定该菌株为蜂房类芽胞杆菌遥 该菌株对尖孢镰刀菌
的生长具有较强的抑制作用袁显著高于同类对照枯
草芽胞杆菌 员 的抑制率遥 在活体防病试验中袁该菌
株的菌悬液对西红花种球腐烂病有较好的防治效
果袁防效达 缘苑援 员源豫 袁与常用化学杀菌剂多菌灵的防
效相当遥 因此袁蜂房类芽胞杆菌 在允哉月圆园员员鄄员 对西红
花种球腐烂病等病害的防治具有较好的应用前景遥
杂糟澡燥蚤灶葬等咱猿暂报道蜂房类芽胞杆菌 运鄄员远缘 能有效防
治棉花的土传病害根腐病遥 然而袁蜂房类芽胞杆作
为生防菌防治名贵药材病害在国内外均未见报道袁
并且 在允哉圆园员员鄄员 又是西红花种植土壤中的习居菌袁
对于西红花种球腐烂病的防治显得更有价值遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 苏婷袁 路梅袁 周青袁 等援 抗不同生化型青枯菌的生防菌筛选
鉴定及其活性分析援 植物保护学报袁 圆园员园袁 猿苑渊缘冤院源猿员 原 源猿缘
咱圆暂 砸葬葬泽噪葬 蕴袁 杂蚤造造葬灶责葬葬 允袁 杂躁燥遭藻则早 粤 酝袁 藻贼 葬造援 孕燥贼藻灶贼蚤葬造 皂蚤糟则燥遭蚤燥鄄
造燥早蚤糟葬造 澡葬扎葬则凿泽 蚤灶 贼澡藻 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 则藻枣蚤灶藻凿 责葬责藻则 责则燥凿怎糟贼泽 枣燥则
枣燥燥凿 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶泽援 允燥怎则灶葬造 燥枣 陨灶凿怎泽贼则蚤葬造 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠 驭 月蚤燥贼藻糟澡鄄
灶燥造燥早赠袁 圆园园圆袁 圆愿渊源冤院 圆圆缘 原 圆猿员
咱猿暂 杂糟澡燥蚤灶葬 悦袁 杂贼则蚤灶早造蚤泽 陨 粤袁 孕葬灶贼藻造蚤凿藻泽 陨 杂袁 藻贼 葬造援 耘增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣
葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿泽 葬灶凿 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠 燥枣 孕葬藻灶蚤遭葬糟蚤造造怎泽 葬造增藻蚤
泽贼则葬蚤灶 运鄄员远缘袁 葬早葬蚤灶泽贼 贼澡藻 糟燥贼贼燥灶 遭造葬糟噪 则燥燥贼 则燥贼 责葬贼澡燥早藻灶 栽澡蚤藻造葬增鄄
蚤燥责泽蚤泽 遭葬泽蚤糟燥造葬援 月蚤燥造燥早蚤糟葬造 悦燥灶贼则燥造袁 圆园员员袁 缘愿渊员冤院 远愿 原 苑猿
渊责任编辑院吴竟一冤
远愿圆 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷