全 文 ：具有杀蚜活性的海洋真菌筛选及其活性成分分析
陈福龙摇 王秀芳摇 陈摇 丹摇 王新伟摇 任广伟鄢
渊中国农业科学院烟草研究所袁 农业部烟草类作物质量控制重点实验室袁 青岛 圆远远员园员冤
摘要院 为筛选可产生杀虫活性代谢物的海洋真菌袁评价其在农林害虫防治中的潜在应用价值袁从
圆员 株海洋真菌中复筛得到对烟蚜有较高生物活性的菌株 皂枣扎员怨袁用点滴法测定该菌株对烟蚜的触
杀作用袁并对其发酵液用乙酸乙酯萃取蒸馏和大孔吸附树脂分离纯化后进行 郧悦鄄酝杂 检测遥 菌株
皂枣扎员怨发酵液的乙酸乙酯提取物浓度为缘园园滋蕴 辕 皂蕴时对烟蚜毒杀作用显著袁圆源澡校正死亡率为
怨圆援 怨员豫 袁蕴悦缘园为 怨员援 源园 滋蕴 辕 皂蕴遥 杀虫活性提取物为一种混合物袁其中 员袁猿 原二烯丙基脲的相对含量
达到 怨园援 源园豫 遥 研究表明该菌株具有较高的杀蚜活性和开发潜力遥
关键词院 海洋真菌曰 次生代谢物曰 烟蚜曰 生物测定
杂糟则藻藻灶蚤灶早 燥枣 皂葬则蚤灶藻 枣怎灶早蚤 憎蚤贼澡 遭蚤燥葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬早葬蚤灶泽贼 酝赠扎怎泽 责藻则泽蚤糟葬藻
葬灶凿 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 蚤贼泽 葬糟贼蚤增藻 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽
悦澡藻灶 云怎造燥灶早摇 宰葬灶早 载蚤怎枣葬灶早摇 悦澡藻灶 阅葬灶摇 宰葬灶早 载蚤灶憎藻蚤摇 砸藻灶 郧怎葬灶早憎藻蚤鄢
渊运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 栽燥遭葬糟糟燥 匝怎葬造蚤贼赠 悦燥灶贼则燥造袁 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻袁 栽燥遭葬糟糟燥 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 悦澡蚤灶藻泽藻
粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匝蚤灶早凿葬燥 圆远远员园员袁 杂澡葬灶凿燥灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 泽糟则藻藻灶 燥怎贼 皂葬则蚤灶藻 枣怎灶早蚤 憎蚤贼澡 蚤灶泽藻糟贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 皂藻贼葬遭燥造蚤贼藻泽 葬灶凿 藻增葬造怎葬贼藻 蚤贼泽 责燥贼藻灶鄄
贼蚤葬造 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶袁 贼澡藻 泽贼则葬蚤灶 皂枣扎员怨 憎蚤贼澡 遭蚤燥葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬早葬蚤灶泽贼 酝赠扎怎泽 责藻则泽蚤糟葬藻 渊杂怎造扎藻则冤 憎葬泽 燥遭贼葬蚤灶藻凿 葬枣贼藻则 泽藻糟鄄
燥灶凿葬则赠 泽糟则藻藻灶蚤灶早 蚤灶 圆员 皂葬则蚤灶藻 枣怎灶早葬造 泽贼则葬蚤灶泽援 陨贼泽 遭蚤燥葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬早葬蚤灶泽贼 酝援 责藻则泽蚤糟葬藻 憎葬泽 凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 怎泽蚤灶早 糟燥灶鄄
贼葬糟贼 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 贼藻泽贼援 粤枣贼藻则 藻曾贼则葬糟贼藻凿 葬灶凿 凿蚤泽贼蚤造造藻凿 憎蚤贼澡 藻贼澡赠造 葬糟藻贼葬贼藻 葬灶凿 责怎则蚤枣蚤藻凿 遭赠 皂葬糟则燥责燥则燥怎泽 则藻泽蚤灶袁 贼澡藻
枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 遭则燥贼澡 憎葬泽 凿藻贼藻糟贼藻凿 遭赠 郧悦鄄酝杂援 砸藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 泽贼则葬蚤灶 皂枣扎员怨 澡葬凿 燥遭增蚤燥怎泽 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 葬早葬蚤灶泽贼
酝援 责藻则泽蚤糟葬藻 憎澡藻灶 贼澡藻 藻曾贼则葬糟贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 蚤贼泽 遭则燥贼澡 则藻葬糟澡藻凿 缘园园 滋蕴 辕 皂蕴援 栽澡藻 糟燥则则藻糟贼藻凿 皂燥则贼葬造蚤贼赠 则葬贼藻
葬枣贼藻则 圆源 澡 憎葬泽 怨圆援 怨员豫 袁 葬灶凿 贼澡藻 蕴悦缘园 憎葬泽 怨员援 源园 滋蕴 辕 皂蕴援 栽澡藻 藻曾贼则葬糟贼 憎蚤贼澡 蚤灶泽藻糟贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 憎葬泽 凿藻贼藻糟鄄贼藻凿 葬泽 葬 糟藻则贼葬蚤灶 皂蚤曾贼怎则藻袁 葬灶凿 贼澡藻 则藻造葬贼蚤增藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 员袁 猿鄄凿蚤葬造造赠造怎则藻葬 则藻葬糟澡藻凿 怨园援 源园豫 援 栽澡蚤泽 蚤皂责造蚤藻凿 贼澡葬贼
泽贼则葬蚤灶 皂枣扎员怨 皂蚤早澡贼 澡葬增藻 澡蚤早澡 蚤灶泽藻糟贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬早葬蚤灶泽贼 酝援 责藻则泽蚤糟葬藻 葬灶凿 责藻则枣藻糟贼 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 责燥贼藻灶贼蚤葬造援
运藻赠 憎燥则凿泽院 皂葬则蚤灶藻 枣怎灶早蚤曰 泽藻糟燥灶凿葬则赠 皂藻贼葬遭燥造蚤贼藻泽曰 酝赠扎怎泽 责藻则泽蚤糟葬藻曰 遭蚤燥葬泽泽葬赠
摇 摇 长期以来袁天然产物一直是新型杀虫活性物质
开发的主要来源袁毒扁豆碱尧阿维菌素尧月贼 毒素等多
种生物农药都是基于对天然产物的利用或模拟改
造咱员 原 圆暂 遥 海洋生物种类繁多尧数量巨大袁已成为近年
来研究的热点遥 其中袁海洋真菌的生活环境特殊尧代
谢机制独特袁可产生结构新颖尧生物活性多样的次生
代谢产物遥 关于海洋真菌的研究报道主要集中在寻
找新活性物质方面袁迄今为止袁已从海洋真菌发酵产
物中发现了 员员员苑 个次生代谢物袁主要包括生物碱尧
萜类尧脂肽类等物质袁这些代谢产物具有抗肿瘤尧抗
菌尧抗病毒等生物活性咱猿 原 缘暂 遥 海洋真菌的代谢物对
植物病原菌尧害虫也具有一定的活性袁许兰兰等咱远暂
分离到的微紫青霉 孕藻灶蚤糟蚤造造蚤怎皂 躁葬灶贼澡蚤灶藻造造怎皂等海洋真
菌对荔枝霜疫霉菌 孕藻则燥灶燥责澡赠贼澡燥则葬 造蚤贼糟澡蚤尧炭疽菌 悦燥造鄄
造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 具有很好的抑制作用曰沈
硕等咱苑暂筛选出圆株海洋真菌对瓜果腐霉菌 孕赠贼澡蚤怎皂
基金项目院 农业部烟草类作物质量控制重点开放实验室开放课题渊圆园员园园猿冤袁贵州省烟草公司项目渊圆园员员员苑冤
作者简介院 陈福龙袁男袁员怨愿愿年生袁硕士研究生袁研究方向为害虫综合治理袁 耘鄄皂葬蚤造院 糟枣造燥灶早赃造燥增藻岳 员圆远援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 皂赠扎怎泽岳 员圆远援 糟燥皂曰 收稿日期院 圆园员圆 原 员圆 原 园源
第 源园 卷摇 第 圆 期
圆园员猿 年摇 源 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 圆
粤责则援 摇 圆园员猿
葬责澡葬灶蚤凿藻则皂葬贼怎皂和番茄早疫菌 粤造贼藻则灶葬则蚤葬 泽燥造葬灶蚤 具有
较高抑制活性曰程中山等咱愿暂从香港海域红树林中筛
选得到一株真菌 孕澡燥皂燥责泽蚤泽 泽责援 袁其发酵液粗提物对
白纹伊蚊幼虫 粤藻凿藻泽 葬造遭燥责蚤糟贼怎泽尧柑橘全爪螨 孕葬灶燥灶赠鄄
糟澡怎泽 糟蚤贼则蚤等害虫具有较高的毒杀活性遥
摇 摇 烟蚜 酝赠扎怎泽 责藻则泽蚤糟葬藻 渊杂怎造扎藻则冤属同翅目蚜科袁是
重要的农业害虫袁可为害烟草尧十字花科蔬菜尧桃树
等多种植物袁同时也是黄瓜花叶病毒渊悦怎糟怎皂遭藻则 皂燥鄄
泽葬蚤糟 增蚤则怎泽袁 悦酝灾冤尧马铃薯 再 病毒 渊 孕燥贼葬贼燥 增蚤则怎泽 再袁
孕灾再冤等多种植物病毒的传播媒介遥 目前袁烟蚜的防
治仍以化学防治为主袁但随着人们对环境尧生态尧健
康等关注程度的提高袁生物防治越来越突显出其重
要性和必要性咱怨暂 遥
目前袁基于海洋真菌次生代谢物的有效杀虫物
质的研究较少袁且不够深入遥 本研究从 圆员 株海洋真
菌中复筛得到对烟蚜有生物活性的菌株 皂枣扎员怨袁经
鉴定为瓜织球壳菌 孕造藻糟贼燥泽责澡葬藻则藻造造葬 糟怎糟怎皂藻则蚤灶葬袁对该
菌株进行杀蚜活性测定袁并对其代谢物进行了初步
分离与鉴定袁以期为开发生物杀虫剂提供依据遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试菌株院供试 圆员 株海洋真菌由中国海洋大学
海洋生命学院生态研究室提供袁分离自沿海泥沙尧海
水等遥
供试昆虫院烟蚜采自四川凉山烟田袁人工气候室
继代饲养后备用遥 饲养条件院温度 圆缘 依 员 益尧相对湿
度 愿园豫 袁光周期 员源 蕴 颐 员园 阅遥
盐卤虫 粤则贼藻皂蚤葬 泽葬造蚤灶葬院市场购买盐卤虫卵袁保存
于 源 益冰箱中遥 取适量盐卤虫卵置于陈海水渊放置
员 个月冤中袁在 圆愿 益下孵育 圆源 澡用于测试遥
主要试剂和仪器院大孔吸附树脂 阅员园员 型袁国药
集团化学试剂有限公司曰二甲基亚砜渊凿蚤皂藻贼澡赠造 泽怎造鄄
枣燥曾蚤凿藻袁阅酝杂韵冤尧乙酸乙酯尧乙醇尧丙酮等均为市售分
析纯遥 粤早蚤造藻灶贼 苑愿怨园粤鄄缘怨苑缘悦气相色谱 原质谱联用仪
渊早葬泽 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠鄄皂葬泽泽 泽责藻糟贼则燥皂藻贼则赠袁郧悦鄄酝杂冤袁美
国安捷伦公司曰砸耘鄄缘圆粤粤 型旋转蒸发器袁上海亚荣
生化仪器厂遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 活性菌株的筛选
菌株液体发酵培养院将供试菌株接种于马铃薯
葡萄糖培养基咱员园暂中袁在 圆愿 依 员 益尧员圆园 则 辕 皂蚤灶 摇床上
振荡培养 愿 凿备用遥
初筛院收集培养的各供试菌株的发酵液袁于 源
益尧员圆 园园园 则 辕 皂蚤灶条件下离心 圆园 皂蚤灶袁取上清液为待
测液遥 以盐卤虫为测试对象袁验证菌株发酵液的活
性遥 取 怨远 孔细胞培养板袁每孔加入 员缘园 滋蕴待测液袁
同时加入含 缘园 耀 苑园 头盐卤虫的 员缘园 滋蕴 海水袁以不
含待测液的海水为对照遥 于 圆愿 益培养 圆源 澡袁统计盐
卤虫的死亡率袁每菌株重复 缘 次遥
复筛院将初筛所得对盐卤虫 圆源 澡致死率达 愿园豫
以上的菌株大量培养 愿 凿袁收集发酵液袁源 益 员圆 园园园 则 辕
皂蚤灶离心 圆园 皂蚤灶后用等体积的乙酸乙酯萃取上清液
猿 次袁合并有机相进行蒸馏袁所得产物用 缘 皂蕴 甲醇
溶解袁转移至 缘 皂蕴离心管中室温蒸发遥 待甲醇完全
蒸发后袁按每 员园 毫克提取物加入 缘园 滋蕴 二甲基亚砜
溶解袁加水配成 员园 皂早 辕 皂蕴 的母液袁用海水稀释至终
浓度为 园援 缘 皂早 辕 皂蕴作为待测液袁分别设海水对照和
二甲基亚砜对照袁于 员圆 澡和 圆源 澡 调查统计盐卤虫的
死亡率咱员员暂 遥
员援 圆援 圆 菌株 皂枣扎员怨 发酵液对烟蚜的毒力测定
对复筛所得菌株进行大量发酵培养袁愿 凿 后收
集发酵液袁经 愿 层纱布滤去菌体袁等量乙酸乙酯萃取
猿 次袁合并有机相蒸馏袁得到的物质用 缘 皂蕴 丙酮洗
脱转移至 缘 皂蕴离心管中袁室温蒸发至液面不再下降
时作为生测液备用遥
选取带有 员园 耀 员缘 头蚜虫的烟叶置于培养皿中袁
选用 园援 园苑苑远 滋蕴 的毛细管微量点滴器袁点滴法进行
触杀毒力测定咱员圆暂 遥 用丙酮将待测液稀释袁共设 缘 个
浓度袁分别为 缘园园援 园园尧圆缘园援 园园尧员圆缘援 园园尧远圆援 缘园尧猿员援 圆缘
滋蕴 辕 皂蕴袁设置丙酮为对照袁重复 源 次袁圆源 澡 后检查蚜
虫死亡数遥 计算蚜虫死亡率尧校正死亡率渊粤遭遭燥贼贼爷 泽
公式冤及 蕴悦缘园遥
员援 圆援 猿 杀虫活性物质的分离鉴定
取适量的大孔吸附树脂 阅员园员袁先用去离子水洗
净袁再用无水乙醇洗至液体不浑浊遥 湿法上柱袁用氢
氧化钠洗至中性袁再用盐酸洗至流出液呈酸性袁去离
子水洗至中性袁待用遥
菌株发酵液经过乙酸乙酯萃取蒸馏之后袁用大
孔吸附树脂处理咱员猿 原 员源暂 袁将样品液上柱袁静态吸附 圆源
澡遥 用无水乙醇梯度洗脱袁蒸馏遥 得到的物质用少量
丙酮溶解配成待测液遥 将洗脱液蒸馏所得物质用丙
酮洗脱收集后进行 郧悦鄄酝杂检测咱员缘暂 遥
员援 猿 数据分析
试验数据用 阅孕杂 员猿援 园 统计软件进行处理袁并采
用 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法进行差异显著性分析遥
远缘员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
圆 结果与分析
圆援 员 活性菌株的筛选
圆援 员援 员 初筛
以盐卤虫为靶标袁对 圆员 株海洋真菌进行初筛遥
员圆 耀 圆源 澡各菌株对盐卤虫致死率均有所上升袁且差
异较大遥 圆源 澡 盐卤虫死亡率达到 员园园豫的菌株为
皂枣扎员怨尧皂枣灶员尧皂枣扎猿园曰菌株 皂枣扎苑圆 对盐卤虫的致死率最
低袁仅为 员愿援 员猿豫 遥 圆源 澡 盐卤虫死亡率达到 愿园豫以
上的菌株有 员圆 种袁将这 员圆 个菌株用于复筛渊表 员冤遥
表 员 圆员 株海洋真菌活性的初筛结果
栽葬遭造藻 员 栽澡藻 责则藻造蚤皂蚤灶葬则赠 泽糟则藻藻灶蚤灶早 枣则燥皂 贼憎藻灶贼赠鄄燥灶藻 皂葬则蚤灶藻 枣怎灶早蚤 憎蚤贼澡 蚤灶泽藻糟贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠
菌种
杂贼则葬蚤灶
死亡率 酝燥则贼葬造蚤贼赠渊豫 冤
员圆 澡 圆源 澡
菌种
杂贼则葬蚤灶
死亡率 酝燥则贼葬造蚤贼赠渊豫 冤
员圆 澡 圆源 澡
皂枣扎员怨
皂枣灶员
皂枣扎猿园
皂枣扎苑源
皂枣灶圆愿
皂枣灶员圆
皂枣扎员园
皂枣扎圆
皂枣扎苑员
皂枣灶猿圆
皂枣灶圆怨
苑愿援 猿园 依 源援 源苑 葬
远愿援 怨猿 依 员援 员园 遭
远愿援 苑园 依 园援 源园 遭
猿怨援 苑园 依 员援 远远 糟
猿苑援 源缘 依 园援 远愿 凿
猿缘援 远猿 依 园援 苑园 藻
猿园援 缘猿 依 员援 员怨 枣
圆怨援 远猿 依 员援 员缘 枣
圆园援 园缘 依 员援 远圆 早
员猿援 远猿 依 园援 缘源 澡
员猿援 圆园 依 园援 怨源 澡
员园园援 园园 依 园援 园园 葬
员园园援 园园 依 园援 园园 葬
员园园援 园园 依 园援 园园 葬
缘园援 远缘 依 员援 缘圆 躁
怨圆援 员猿 依 员援 园猿 糟
怨园援 员猿 依 员援 圆缘 凿
怨猿援 远园 依 园援 苑缘 遭
愿圆援 愿缘 依 园援 苑源 澡
圆苑援 圆缘 依 员援 园圆 灶
愿员援 愿猿 依 员援 员圆 澡
愿缘援 员猿 依 园援 苑猿 藻枣
皂枣灶圆
皂枣灶猿猿
皂枣扎苑
皂枣扎远源
皂枣灶猿园
皂枣扎源远
皂枣灶圆员
皂枣扎员源
皂枣扎苑猿
皂枣扎苑圆
悦运
员圆援 缘缘 依 园援 缘圆 澡
员园援 苑园 依 园援 远园 蚤
怨援 苑愿 依 园援 苑愿 蚤躁
愿援 缘缘 依 园援 缘园 躁噪
愿援 猿猿 依 员援 员缘 躁噪
苑援 缘愿 依 园援 源员 噪造
苑援 猿园 依 园援 愿猿 噪造
苑援 园愿 依 园援 猿猿 噪造
远援 愿缘 依 园援 源苑 噪造
远援 猿猿 依 园援 怨员 造
圆援 园愿 依 园援 圆怨 皂
愿源援 缘猿 依 园援 苑苑 藻枣
愿猿援 怨猿 依 园援 怨员 枣早
猿远援 圆猿 依 园援 愿远 皂
源圆援 圆愿 依 园援 远员 噪
愿缘援 苑园 依 员援 园怨 藻
猿愿援 苑猿 依 园援 苑圆 造
圆猿援 员猿 依 园援 远愿 燥
缘源援 源愿 依 园援 怨缘 蚤
猿远援 远愿 依 园援 远愿 皂
员愿援 员猿 依 园援 缘愿 责
猿援 缘猿 依 园援 圆怨 择
摇 摇 注院表中数据为平均数 依标准差遥 同列数据后不同小写字母表示在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著渊阅怎灶糟葬灶氏新复极差法冤遥 晕燥贼藻院 阅葬贼葬
蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 则燥憎 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 皂怎造鄄
贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
圆援 员援 圆 复筛
对初筛所得的 员圆 株海洋真菌发酵液经进一步
萃取分离之后进行复筛遥 员圆 株海洋真菌杀虫活性
差异较大袁源 株海洋真菌 圆源 澡 杀虫率达 怨园援 园园豫以
上袁其中菌株 皂枣扎员怨 员圆尧圆源 澡 杀虫活性最高袁其余菌
株杀虫活性均较低渊表 圆冤遥
表 圆 员圆 株海洋真菌的复筛结果
栽葬遭造藻 圆 栽澡藻 泽藻糟燥灶凿葬则赠 泽糟则藻藻灶蚤灶早 枣则燥皂 贼憎藻造增藻 皂葬则蚤灶藻 枣怎灶早蚤 憎蚤贼澡 蚤灶泽藻糟贼蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠
菌种
杂贼则葬蚤灶
死亡率 酝燥则贼葬造蚤贼赠渊豫 冤
员圆 澡 圆源 澡
菌种摇
杂贼则葬蚤灶摇
死亡率 酝燥则贼葬造蚤贼赠渊豫 冤
员圆 澡 圆源 澡
皂枣扎员怨
皂枣灶员
皂枣扎猿园
皂枣灶员圆
皂枣灶圆愿
皂枣灶猿园
皂枣扎员园
怨园援 缘缘 依 园援 缘源 葬
愿愿援 苑猿 依 园援 远圆 遭
远愿援 愿缘 依 园援 源猿 糟
源苑援 愿缘 依 员援 园缘 凿
猿苑援 源缘 依 园援 苑源 藻
圆怨援 缘愿 依 园援 缘员 枣
圆员援 园猿 依 员援 园缘 早
员园园援 园园 依 园援 园园 葬
员园园援 园园 依 园援 园园 葬
怨猿援 员愿 依 园援 猿愿 遭
怨圆援 园缘 依 员援 圆源 糟
远缘援 猿园 依 园援 愿缘 凿
猿远援 源园 依 园援 远愿 澡
猿猿援 缘缘 依 园援 远苑 蚤
皂枣扎圆
皂枣灶猿猿
皂枣灶猿圆
皂枣灶圆怨
皂枣灶圆
阅酝杂韵
悦运
员愿援 猿猿 依 园援 猿远 澡
员缘援 远愿 依 园援 远怨 蚤
员猿援 远园 依 园援 源苑 躁
员猿援 员缘 依 园援 缘圆 躁噪
员圆援 缘缘 依 园援 缘圆 噪
源援 员园 依 园援 员怨 造
猿援 员园 依 园援 猿猿 皂
缘远援 圆愿 依 员援 圆员 藻
源员援 员愿 依 员援 园圆 早
缘员援 愿猿 依 园援 远缘 枣
远缘援 员猿 依 员援 园怨 凿
猿圆援 员猿 依 园援 苑怨 躁
缘援 园园 依 园援 员远 噪
源援 缘园 依 园援 圆猿 噪
摇 摇 注院表中数据为平均数 依标准差遥 同列数据后不同小写字母表示在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著渊阅怎灶糟葬灶氏新复极差法冤遥 晕燥贼藻院 阅葬贼葬
蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 则燥憎 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 皂怎造鄄
贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
圆援 圆 菌株 皂枣扎员怨 发酵液对烟蚜的触杀毒力
以菌株 皂枣扎员怨 为测试对象袁测定其发酵液对烟
蚜的触杀毒力遥 菌株 皂枣扎员怨 发酵液提取物对烟蚜有
较高毒性袁浓度越高校正死亡率也越高袁浓度为 缘园园
滋蕴 辕 皂蕴 时校正死亡率达 怨圆援 怨员豫 渊表 猿 冤遥 菌株
皂枣扎员怨 发酵液提取物对烟蚜的 蕴悦缘园为 怨员援 源园 滋蕴 辕 皂蕴袁
毒力回归方程为院再 越 圆 援 员源愿员载 垣 园 援 苑愿苑苑 袁砸 越
园援 怨愿缘怨袁怨缘豫置信限为 远苑援 圆圆 耀 员员远援 怨怨遥
苑缘员圆 期 陈福龙等院具有杀蚜活性的海洋真菌筛选及其活性成分分析
表 猿 菌株 皂枣扎员怨 对烟蚜的触杀毒力
栽葬遭造藻 猿 悦燥灶贼葬糟贼 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 皂枣扎员怨 葬早葬蚤灶泽贼 酝赠扎怎泽 责藻则泽蚤糟葬藻
浓度渊滋蕴 辕 皂蕴冤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
处理数
晕燥援 燥枣 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽
死亡数
晕燥援 燥枣 凿藻葬贼澡
死亡率渊豫 冤
酝燥则贼葬造蚤贼赠
校正死亡率渊豫冤
悦燥则则藻糟贼藻凿 皂燥则贼葬造蚤贼赠
缘园园援 园园
圆缘园援 园园
员圆缘援 园园
远圆援 缘园
猿员援 圆缘
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缘员
源圆
源怨
源猿
源圆
源员
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猿愿
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怨园援 源愿
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猿猿援 猿猿
员苑援 园苑
怨圆援 怨员 依 园援 员圆 葬
愿愿援 缘圆 依 园援 员圆 葬
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猿圆援 远怨 依 园援 员猿 遭糟
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要
摇 摇 注院表中数据为平均数 依标准差遥 同列数据后不同小写字母表示在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著渊阅怎灶糟葬灶氏新复极差法冤遥 晕燥贼藻院 阅葬贼葬
蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 则燥憎 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 皂怎造鄄
贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
圆援 猿 菌株 皂枣扎员怨 杀虫活性物质的分离鉴定
圆援 猿援 员 总离子流图谱分析
菌株 皂枣扎员怨 活性物质的 郧悦鄄酝杂检测结果如图 员
所示遥 色谱图中峰面积比较大的有 猿 个袁分别为 员袁
猿 原二烯丙基脲渊员袁猿鄄凿蚤葬造造赠造怎则藻葬冤尧圆 原羟基 原 猿 原甲
基亚苯基肼 渊 燥鄄糟则藻泽燥贼蚤糟 澡赠凿则葬扎蚤凿藻冤尧琥珀酸二苄酯
渊燥曾葬造蚤糟 葬糟蚤凿冤袁其中 员袁猿 原 二烯丙基脲相对面积最
大袁为 怨园援 源园豫 遥
图 员 菌株 皂枣扎员怨 杀虫活性提取物的总离子流图
云蚤早援 员 栽陨悦 燥枣 蚤灶泽藻糟贼蚤糟蚤凿葬造 泽怎遭泽贼葬灶糟藻 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽 燥枣 藻曾贼则葬糟贼泽
圆援 猿援 圆 成分的匹配度分析
菌株 皂枣扎员怨 杀虫活性提取物中匹配度超过 愿园豫
的有 缘 种袁即邻苯二甲酸二丁酯渊凿蚤遭怎贼赠造 责澡贼澡葬造葬贼藻冤尧
三烯丙基异氰脲酸酯渊员袁猿袁缘鄄贼则蚤鄄圆鄄责则燥责藻灶赠造鄄员袁猿袁缘鄄
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造葬糟藻贼蚤糟 葬糟蚤凿冤尧柠檬酸三乙酯渊 贼则蚤藻贼澡赠造 糟蚤贼则葬贼藻冤和琥珀
酸二苄酯分别为 怨员豫 尧怨愿豫 尧怨员豫 尧怨园豫和 愿园豫 遥 相
对含量依次为琥珀酸二苄酯渊 园 援 怨远豫 冤 尧苯乙酸
渊园援 苑员豫 冤尧 三烯丙基异氰脲酸酯 渊 园援 缘猿豫 冤尧
柠檬酸三乙酯 渊 园 援 源 怨 豫 冤 尧邻苯二甲酸二丁酯
渊园援 员苑豫 冤遥
猿 讨论
本研究用盐卤虫生物测定法对 圆员 株海洋真菌
进行了杀虫活性筛选袁得到 员 株对烟蚜有毒杀活性
的菌株 皂枣扎员怨袁经过大量发酵和一系列分离纯化处
理之后对烟蚜表现出毒杀活性袁说明其发酵液中含
有对烟蚜有致死作用的生物活性物质遥 本研究仅仅
得到了经大孔吸附树脂处理之后的提取物袁它是由
多种物质构成的混合物遥 通过 郧悦鄄酝杂 检测袁得出此
混合物的定性结果与其各自的相对含量遥 菌株
皂枣扎员怨 杀虫活性物质提取物各组分含量相差很大袁
相对含量较高的是员袁猿 原二烯丙基脲尧圆 原羟基 原
猿 原甲基亚苯基肼尧琥珀酸二苄酯尧苯乙酸袁其中 员袁
猿 原二烯丙基脲的相对含量远高出其它物质含量袁是
菌株杀虫物质中的主要成分遥 据 栽葬则灶燥憎泽噪蚤 等咱员苑暂报
道袁员袁猿 原 二烯丙基脲是一种重要的医用化合物袁
具有一定的抗肿瘤作用曰圆 原羟基 原 猿 原甲基亚苯基
愿缘员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
肼是一种应用较少的化学物质袁具有刺激性曰琥珀酸
二苄酯是一种具有毒性的物质袁此物质研究甚少袁性
质尚不明确曰苯乙酸为常见化学物质袁是医药尧农药尧
香料等有机合成的中间体袁也是一种植物生长刺激
素袁而且还具有较强的杀菌作用遥
目前袁对海洋真菌活性代谢物的分离鉴定多采
用薄层层析尧高效液相色谱和生物筛选相集成的方
法咱员远暂 遥 本试验应用大孔吸附树脂对海洋真菌活性
代谢物进行了分离纯化袁操作简便尧分离效果较好遥
此法在药物提取中应用比较广泛咱员猿暂 袁但在海洋真菌
杀虫活性代谢物筛选中应用较少袁试验证明大孔吸
附树脂可以用于海洋真菌活性代谢物的分离遥 海洋
真菌杀虫活性代谢物筛选过程中采用了活性跟踪
法袁此法简便尧高效尧易操作袁但是筛选过程中有可能
减少活性成分含量袁这也是很多菌株在初筛时表现
出较高杀虫活性而复筛时杀虫活性下降的原因遥
菌株 皂枣扎员怨 分离自海藻袁经鉴定为瓜织球壳菌
孕造藻糟贼燥泽责澡葬藻则藻造造葬 糟怎糟怎皂藻则蚤灶葬遥 研究表明袁瓜织球壳菌
可在多种环境中存活袁且具有多种作用袁既可侵染甜
瓜 悦怎糟怎皂蚤泽 皂藻造燥造成果实或根茎部腐烂咱员愿暂 袁同时也
是一种具有较大生防潜力的食线虫真菌咱员怨暂 遥 悦葬则则
等咱圆园暂从海底沉积物中分离的瓜织球壳菌经室内培
养可产生多种生物碱袁这些生物碱可抑制吲哚胺 圆袁
猿 原双加氧酶渊 蚤灶凿燥造藻葬皂蚤灶藻 圆袁猿鄄凿蚤燥曾赠早藻灶葬泽藻袁陨阅韵冤的
活性袁而 陨阅韵 被认为是治疗癌症的一个重要靶标袁
这表明瓜织球壳菌在医学领域也具有重要的应用
价值遥
本研究证实了菌株 皂枣扎员怨 是一种具有杀蚜活性
的海洋真菌袁具有较大的利用价值遥 今后应优化其
培养条件袁进一步纯化尧鉴定杀蚜活性物质并研究其
杀虫机制袁为开发新型生物杀虫剂奠定基础遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 刘济宁袁余向阳袁张存政袁等援 海洋生物源杀虫活性物质研究
进展援 昆虫知识袁圆园园源袁源员渊缘冤院源园怨 原 源员猿
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渊责任编辑院吴竟一冤
怨缘员圆 期 陈福龙等院具有杀蚜活性的海洋真菌筛选及其活性成分分析