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Identification and herbicidal active ingredients of DN02, a fungus residing in a Ceriagrion sp.gut

豆娘肠道真菌DN02的鉴定及其除草活性成分



全 文 :第 源员 卷摇 第 员 期
圆园员源 年 圆 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源员摇 晕燥援 员
云藻遭援 摇 圆园员源

基金项目院 国家自然科学基金渊圆员圆苑圆圆员缘袁圆员园园圆园怨圆冤
作者简介院 邵明伟袁男袁员怨愿愿年生袁硕士研究生袁研究方向为天然药物化学袁 耘鄄皂葬蚤造院 躁蚤葬灶贼蚤灶早愿愿园苑圆园岳 员圆远援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 赠造扎澡葬灶早岳 扎躁灶怎援 糟灶
收稿日期院 圆园员猿 原 园苑 原 园圆
豆娘肠道真菌 阅晕园圆的鉴定及其除草活性成分
邵明伟摇 王宁璐摇 林芳芳摇 张应烙鄢
渊浙江师范大学化学与生命科学学院袁 金华 猿圆员园园源冤
摘要院 运用涂布平板法从健康豆娘肠道中分离得到 员 株真菌 阅晕园圆袁采用形态学和 陨栽杂 序列分析方
法对其进行了鉴定袁用生长速率法及盆栽试验测定其除草活性袁利用色谱方法从该菌乙酸乙酯粗
提物中分离出活性物质袁并采用质谱和核磁共振谱对活性物质结构进行鉴定遥 结果表明 阅晕园圆 为
新月旋孢腔菌 悦燥糟澡造蚤燥遭燥造怎泽 造怎灶葬贼怎泽曰其乙酸乙酯粗提物对稗草和反枝苋具有较强的抑制活性袁对幼
根抑制活性的 陨悦缘园分别为 圆圆援 怨 滋早 辕 皂蕴和 员猿远援 苑 滋早 辕 皂蕴曰当喷施发酵液原液时袁稗草受害率尧平均株
高尧平均鲜重分别为 远远援 苑豫 尧缘援 圆 糟皂尧员猿援 愿 皂早袁其效果与阳性对照 圆袁源鄄二氯苯氧乙酸相当曰并于乙酸
乙酯粗提物中分离得到一个单体活性物质根匍柄菌素渊则葬凿蚤糟蚤灶蚤灶冤遥
关键词院 新月旋孢腔菌曰根匍柄菌素曰发酵液曰除草活性
陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 澡藻则遭蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增藻 蚤灶早则藻凿蚤藻灶贼泽 燥枣 阅晕园圆袁
葬 枣怎灶早怎泽 则藻泽蚤凿蚤灶早 蚤灶 葬 悦藻则蚤葬早则蚤燥灶 泽责援 早怎贼
杂澡葬燥 酝蚤灶早憎藻蚤摇 宰葬灶早 晕蚤灶早造怎摇 蕴蚤灶 云葬灶早枣葬灶早摇 在澡葬灶早 再蚤灶早造葬燥鄢
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 悦澡藻皂蚤泽贼则赠 葬灶凿 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 在澡藻躁蚤葬灶早 晕燥则皂葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 允蚤灶澡怎葬 猿圆员园园源袁 在澡藻躁蚤葬灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 粤 枣怎灶早怎泽 灶葬皂藻凿 阅晕园圆 憎葬泽 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 贼澡藻 早怎贼 燥枣 悦藻则蚤葬早则蚤燥灶 泽责援 遭赠 皂藻葬灶泽 燥枣 泽责则藻葬凿 责造葬贼藻援
阅晕园圆 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬糟糟燥则凿蚤灶早 贼燥 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿 陨栽杂 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽援 栽澡藻 澡藻则遭蚤糟蚤凿葬造
葬糟贼蚤增蚤贼赠 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼 憎葬泽 责藻则枣燥则皂藻凿 遭赠 早则燥憎贼澡 则葬贼藻 皂藻贼澡燥凿 葬灶凿 泽责则葬赠藻凿 憎蚤贼澡 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 遭则燥贼澡 燥枣 阅晕园圆援
栽澡藻 皂葬蚤灶 葬糟贼蚤增藻 糟燥皂责燥怎灶凿 憎葬泽 蚤泽燥造葬贼藻凿 遭赠 怎泽蚤灶早 糟燥造怎皂灶 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠 葬灶凿 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 燥灶 贼澡藻 遭葬泽蚤泽 燥枣
藻曾贼藻灶泽蚤增藻 泽责藻糟贼则燥泽糟燥责蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 阅晕园圆 憎葬泽 悦燥糟澡造蚤燥遭燥造怎泽 造怎灶葬贼怎泽曰 藻贼澡赠造 葬糟藻贼葬贼藻
藻曾贼则葬糟贼 藻曾澡蚤遭蚤贼藻凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 责澡赠贼燥贼燥曾蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 葬早葬蚤灶泽贼 贼澡藻 则葬凿蚤糟造藻 早则燥憎贼澡 燥枣 耘糟澡蚤灶燥糟澡造燥葬 糟则怎泽早葬造造蚤 葬灶凿
粤皂葬则葬灶贼澡怎泽 则藻贼则燥枣造藻曾怎泽 憎蚤贼澡 陨悦缘园 增葬造怎藻泽 燥枣 圆圆援 怨 滋早 辕 皂蕴 葬灶凿 员猿远援 苑 滋早 辕 皂蕴袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 宰澡藻灶 泽责则葬赠藻凿憎蚤贼澡 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 遭则燥贼澡 燥枣 阅晕园圆袁 贼澡藻 增蚤糟贼蚤皂蚤扎葬贼蚤燥灶 则葬贼藻袁 葬增藻则葬早藻 责造葬灶贼 澡藻蚤早澡贼 葬灶凿 枣则藻泽澡 憎藻蚤早澡贼 燥枣 耘援
糟则怎泽早葬造造蚤 憎藻则藻 远远援 苑豫 袁 缘援 圆 糟皂袁 葬灶凿 员猿援 愿 皂早袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠袁 糟燥皂责葬则葬遭造藻 贼燥 贼澡藻 责燥泽蚤贼蚤增藻 糟燥灶贼则燥造 圆袁 源鄄阅
渊圆袁 源鄄渊凿蚤糟澡造燥则燥遭藻灶扎藻灶藻冤 葬糟藻贼蚤糟 葬糟蚤凿冤援 栽澡藻 糟则怎凿藻 藻曾贼则葬糟贼 糟燥灶贼葬蚤灶藻凿 葬 皂葬蚤灶 葬糟贼蚤增藻 糟燥皂责燥怎灶凿 葬灶凿 蚤贼 憎葬泽
凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 葬泽 则葬凿蚤糟蚤灶蚤灶援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽怎早早藻泽贼 贼澡葬贼 枣怎则贼澡藻则 则藻泽藻葬则糟澡藻泽 葬则藻 灶藻藻凿藻凿 枣燥则 悦援 造怎灶葬贼怎泽 阅晕园圆 葬泽 葬
皂蚤糟则燥遭蚤葬造 澡藻则遭蚤糟蚤凿藻援
运藻赠 憎燥则凿泽院 悦燥糟澡造蚤燥遭燥造怎泽 造怎灶葬贼怎泽曰 则葬凿蚤糟蚤灶蚤灶曰 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶曰 澡藻则遭蚤糟蚤凿葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠
摇 摇 稗草 耘糟澡蚤灶燥糟澡造燥葬 糟则怎泽早葬造造蚤是世界性十大恶性杂
草之一袁是稻田尧麦田和玉米地等的重要草害袁近年
来已经成为水稻产区第一恶性杂草袁严重影响水稻
产量及品质咱员暂 遥 反枝苋 粤皂葬则葬灶贼澡怎泽 则藻贼则燥枣造藻曾怎泽 是苋
属入侵种中发生频率最高尧分布最广尧危害最严重
的杂草咱圆暂 袁为菜园尧果园及棉花和玉米等旱地作物
中的常见杂草袁并且该杂草可富集硝酸盐袁家畜过量
食用后会引起中毒袁造成大量经济损失遥 因此袁防治
稗草和反枝苋对作物的安全生产具有重要意义遥
化学防治是治理稗草和反枝苋危害的主要措
施袁但化学除草剂的长期使用带来了诸如环境污染
日趋严重和耐药杂草种群上升等问题咱员袁猿暂 袁因此袁研
究开发新型除草剂迫在眉睫遥 筛选和利用微生物
代谢产物防治杂草具有许多潜在的优势袁是新型除
草剂的重要研发方向咱源 原 远暂 遥 目前袁主要集中在对植
物病原菌和土壤放线菌的除草活性研究咱苑暂 袁而对于
昆虫肠道菌的相关研究较少遥 昆虫肠道菌是生活
在健康昆虫肠道的一类特境微生物袁具有非常丰富
的多样性遥 已有研究表明袁昆虫肠道菌能分泌一些
消化酶袁帮助昆虫消化食物咱愿 原 怨暂 遥 肠道菌也有可能
合成植物毒素袁这类毒素能杀死植物以利于昆虫消
化吃进去的植物咱员园暂 遥 如 郧藻遭澡葬则凿贼 等咱员员暂从多种昆虫
肠道细菌渊如芽胞杆菌冤中分离得到具有较好活性
的植物毒素遥 因此袁昆虫肠道菌的代谢产物可能是
新除草剂的重要来源遥 本试验在系统研究棉蝗和
负蝗肠道真菌除草活性的基础上咱员园袁员圆暂 袁进一步从豆
娘 悦藻则蚤葬早则蚤燥灶 泽责援肠道中分离到一株具有除草活性的
肠道菌 阅晕园圆袁并对其活性成分进行了分离鉴定袁旨
在为开发新型微生物源除草剂奠定基础遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试昆虫院健康豆娘成虫袁采自浙江师范大学
校园内遥
试剂及培养基院圆袁源鄄二氯苯氧乙酸渊圆袁源鄄阅冤袁上
海信然生物科技有限公司曰新型快速植物基因组
阅晕粤提取试剂盒袁北京百泰克生物技术有限公司曰
蛋白胨尧牛肉膏尧蔗糖尧琼脂粉等袁购自北京奥博星
生物技术有限责任公司曰生麦芽袁购自亳州市中药
饮片厂曰圆园园 耀 猿园园 目层析柱硅胶和 郧云圆缘源薄层层析
硅胶袁青岛海洋化工厂曰杂藻责澡葬凿藻曾蕴匀鄄圆园袁瑞典 孕澡葬则鄄
皂葬糟蚤葬 月蚤燥贼藻糟澡公司遥 麦芽浸汁琼脂培养基渊皂葬造贼 藻曾鄄
贼则葬糟贼 葬早葬则 皂藻凿蚤怎皂袁酝耘粤冤院麦芽 圆园 早尧蔗糖 圆园 早尧琼脂
圆园 早尧蛋白胨 员 早尧蒸馏水 员 蕴袁责匀 苑援 园遥 不加琼脂为相
应液体培养基渊皂葬造贼 藻曾贼则葬糟贼 皂藻凿蚤怎皂袁酝耘冤遥
仪器院孕悦砸 反应扩增仪尧移液枪 渊范围 员园园 耀
员 园园园 滋蕴尧圆园 耀 圆园园 滋蕴尧园援 缘 耀 员园 滋蕴冤袁德国 耘责责藻灶凿燥则枣
公司曰杂宰鄄悦允鄄员阅洁净工作台袁江苏苏洁净化设备厂曰
再载允鄄圆 离心机袁湘仪离心机仪器有限公司曰匀远鄄员 微
型电泳槽袁上海精益有机玻璃制品仪器厂曰酝葬则蚤灶藻则
质谱仪袁美国 粤月陨 公司曰月则怎噪藻则阅砸载鄄缘园园 核磁共振
仪袁瑞士 月则怎噪藻则 公司曰悦悦粤鄄员员员员 旋转蒸发仪袁上海
爱朗仪器有限公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 豆娘肠道菌 阅晕园圆 的分离与鉴定
菌株分离院将健康豆娘成虫用 苑缘豫酒精表面消
毒 圆 皂蚤灶袁无菌水冲洗 猿 次袁解剖后得到的肠道放至
无菌研钵内进行研磨袁用无菌水对研磨液梯度稀释
成 员园 原员尧员园 原圆尧员园 原 猿袁分别取各梯度稀释液 园援 圆 皂蕴涂
布于 酝耘粤 培养基平板上袁圆愿 益恒温箱中培养遥 待
菌落长出后袁从菌落边缘挑取少量菌丝袁再次转接
酝耘粤培养基平板上袁经纯化得到单菌落 阅晕园圆袁将单
菌落接种到 酝耘粤斜面试管保存备用遥
形态学鉴定院将 阅晕园圆 接种到 酝耘粤 平板上袁圆愿
益黑暗培养袁每天定时观察菌落生长形态遥 显微镜
观察产孢结构以及孢子的形态袁并测量孢子大小遥
分子生物学鉴定院将培养 源 凿 的新鲜菌体作为
阅晕粤提取材料提取菌株基因组 阅晕粤袁员豫琼脂糖凝
胶电泳检测纯度遥 以上述提取的基因组 阅晕粤 为模
板袁 用引物 陨栽杂员 渊 缘忆鄄栽悦悦郧栽粤郧郧栽郧粤粤悦悦栽郧悦郧郧鄄
猿忆冤尧 陨栽杂源 渊 缘忆鄄栽悦悦栽悦悦郧悦栽栽粤栽栽郧粤栽粤栽郧悦鄄猿忆冤 对供
试菌株 则阅晕粤的 陨栽杂区域进行 孕悦砸扩增遥 反应液体
积 圆缘 滋蕴袁包括院 凿凿匀圆韵 员圆援 猿 滋蕴尧员园 伊 孕悦砸 遭怎枣枣藻则源援 园 滋蕴尧凿晕栽孕泽 圆援 园 滋蕴尧陨栽杂员 和 陨栽杂源 各 圆援 园 滋蕴尧栽葬择
阅晕粤聚合酶 园援 圆 滋蕴遥 孕悦砸 反应程序院怨源 益预变性
圆 皂蚤灶曰怨源 益变性 员 皂蚤灶袁缘缘 益复性 员 皂蚤灶袁苑圆 益延伸
员 皂蚤灶袁猿缘 个循环袁最后 苑圆 益延伸 缘 皂蚤灶袁源 益保存遥
孕悦砸产物用 圆豫琼脂糖凝胶测其纯度遥 孕悦砸 扩增产
物经检测后送至上海生工生物工程有限公司进行
测序袁测序引物为 陨栽杂员遥 将测序得到的 陨栽杂 序列通
过 月蕴粤杂栽与 郧藻灶月葬灶噪中的核酸序列进行比对袁利用
酝耘郧粤 缘援 园缘 软件进行系统发育分析遥 采用邻接法
渊灶藻蚤早澡遭燥则鄄躁燥蚤灶蚤灶早袁晕允冤构建系统发育树袁并进行 缘园园
次自举分析渊月燥燥贼泽贼则葬责冤袁估算其内分支的支持率遥
员援 圆援 圆 阅晕园圆 发酵液粗提物的制备
在装有 员园园 皂蕴 酝耘 培养基的 圆缘园 皂蕴 锥形瓶中
接种豆娘肠道内生真菌 阅晕园圆袁圆愿 益尧员愿园 则 辕 皂蚤灶 摇床
培养 猿 凿 作为种子液袁接种到装有 圆园园 皂蕴 酝耘 培养
基的 员 园园园 皂蕴 锥形瓶中渊每瓶约 员园 皂蕴 种子液冤袁
圆愿 益尧员愿园 则 辕 皂蚤灶培养 苑 凿制得发酵液袁猿 层纱布过滤
后用乙酸乙酯萃取 猿 次袁将所得的萃取液在旋转蒸
发仪渊源缘 益下减压蒸馏冤中进行浓缩袁得到发酵液粗
提物遥
怨怨员 期 邵明伟等院豆娘肠道真菌 阅晕园圆 的鉴定及其除草活性成分
员援 圆援 猿 粗提物除草活性测定
将粗提物用丙酮配制成 员 园园园尧员园园尧员园尧员 滋早 辕 皂蕴
稀释液袁分别加 缘 皂蕴 于铺有滤纸的培养皿中袁溶剂
挥发后加入 缘 皂蕴 无菌水袁用丙酮同样处理作为对
照遥 选取露白的稗草或反枝苋种子放在滤纸上渊每
皿 员园 粒冤袁每处理重复 猿 次袁在 圆苑 益尧相对湿度
苑园豫尧定时光照渊员圆 澡 光照尧员圆 澡 黑暗冤的人工气候箱
中培养袁源 凿后测量根长遥 根生长抑制率渊豫冤 越 渊对照
平均根长 原处理平均根长冤 辕对照平均根长 伊员园园遥
员援 圆援 源 阅晕园圆发酵液对盆栽稗草幼苗生长的抑制活性
将过滤后的 阅晕园圆 发酵液原液用蒸馏水分别稀
释 员园尧圆园尧源园尧愿园 和 员园园 倍后备用遥 将催芽后的稗草
种子播于直径 员园 糟皂 的温室花盆中袁在出苗后第 猿
天喷施 阅晕园圆 发酵液原液及各稀释液袁蒸馏水和
员园园 滋早 辕 皂蕴 圆袁源鄄阅 分别作为阴性和阳性对照袁每处
理设 猿 个重复袁员猿 凿后观察幼苗受害程度袁统计受害
率尧株高和鲜重遥 稗草受害级别分为 源 级咱员猿暂 院园 级院
全株正常曰员 级院叶或根变色曰圆 级院全株 员 辕 圆 以上部
分枯黄曰猿 级院全株枯萎至死亡遥 受害率 渊豫 冤 越移 咱渊每盆各受害级别株数 伊级别冤 辕 渊每盆株数 伊
最高级别冤暂 伊 员园园遥
员援 圆援 缘 活性物质的分离纯化和结构鉴定
乙酸乙酯粗提物经硅胶柱层析分离后用重结
晶的方法得到纯的单体化合物遥 测定单体化合物
的分子量袁结合活性物质的员匀鄄晕酝砸 和员猿 悦鄄晕酝砸 谱
图数据袁对活性物质进行结构鉴定遥
员援 猿 数据分析
利用 耘曾糟藻造 圆园园猿 软件计算有效半抑制浓度 陨悦缘园
值曰采用 杂孕杂杂 圆员援 园 软件的 阅怎灶糟葬灶 氏新复极差法检
验差异显著性遥
圆 结果与分析
圆援 员 菌种鉴定
形态学鉴定院在 酝耘粤 培养基上袁阅晕园圆 的菌丝
初为白色袁后逐渐转为墨绿色至黑色袁短绒状袁紧凑袁
菌落圆形尧平展袁周缘整齐曰菌丝具隔膜袁多分枝袁宽
圆援 园 耀 源援 员 滋皂曰分生孢子梗单生或簇生袁产生于菌丝
末端和中央细胞袁少分枝袁直或顶端屈膝状弯曲袁具
隔膜袁浅褐色至深褐色袁端部颜色稍浅袁光滑袁长可
达 员苑园 滋皂袁宽 圆 耀苑 滋皂曰分生孢子顶侧生袁卵形或纺
锤形袁猿 个隔膜分为 源 个胞腔袁从基部数第 猿 个细胞
最大袁色较深袁端部细胞颜色渐浅渊图 员冤遥 上述特征
与王玲等咱员源暂报道的新月旋孢腔菌 悦援 造怎灶葬贼怎泽 基本一
致袁因此袁初步鉴定 阅晕园圆为新月旋孢腔菌 悦援 造怎灶葬贼怎泽遥
菌株分子生物学鉴定院以 陨栽杂 为引物扩增出序
列长度为 缘猿圆 遭责袁经 月蕴粤杂栽比对袁上述 阅晕园圆 的序列
和新月旋孢腔菌 悦援 造怎灶葬贼怎泽 渊 郧藻灶月葬灶噪 登录号院
匀匝圆源愿员怨员援 员冤的相似度最高袁在系统发育树上处于
同一分支渊图 圆冤袁同源性达 怨怨援 远豫 袁因此袁将 阅晕园圆
鉴定为新月旋孢腔菌 悦援 造怎灶葬贼怎泽遥
图 员 阅晕园圆 的孢子形态渊源园园 伊 冤
云蚤早援 员 栽澡藻 泽责燥则藻 皂燥则责澡燥造燥早赠 燥枣 阅晕园圆
图 圆 基于 缘援 愿杂 则阅晕粤基因片段序列构建的系统发育树
云蚤早援 圆 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 缘援 愿杂 则阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻泽
园园员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
圆援 圆 粗提物除草活性
阅晕园圆 粗提物对稗草和反枝苋幼根均有很好
的抑制活性袁随着粗提物浓度的升高袁抑制作用
逐渐增强袁对两种杂草幼根抑制活性的 陨悦缘园分别为圆圆援 怨 滋早 辕 皂蕴和 员猿远援 苑 滋早 辕 皂蕴渊表 员冤遥
圆援 猿摇 阅晕园圆发酵液对盆栽稗草幼苗生长的抑制活性
盆栽试验表明袁阅晕园圆 发酵液对盆栽稗草幼苗
表现出很强的抑制活性渊表 圆冤遥 随着发酵液浓度的
升高袁其对稗草的抑制作用逐渐增强遥 当喷施发酵
液原液时袁稗草受害率尧平均株高尧平均鲜重分别为
远远援 苑豫 尧缘援 圆 糟皂尧员猿援 愿 皂早袁其抑制活性与阳性对照 圆袁
源鄄阅相当遥
圆援 源 活性物质的分离纯化和结构鉴定
发酵液 猿园 蕴经 猿 层纱布过滤后得滤液袁用乙酸
乙酯萃取滤液得 员员援 愿 早粗提物袁以硅胶柱层析分离袁
以氯仿鄄甲醇梯度洗脱渊员园园豫氯仿寅员园园豫甲醇冤得
苑 个馏分渊悦蕴员院员援 猿 早曰悦蕴圆院员援 圆 早曰悦蕴猿院源援 愿 早曰悦蕴源院
员郾 源 早曰悦蕴缘院员援 猿 早曰悦蕴远院园援 怨 早曰悦蕴苑院园援 远 早冤袁生物活性
测试发现 悦蕴猿 活性最好袁继续用硅胶柱层析和重结
晶方法分离得到了 员 个单体物质渊圆 愿园园 皂早冤遥 对该
单体物质进行质谱和核磁共振谱分析袁具体数据如
下院匀砸鄄耘杂陨鄄酝杂院皂 辕 扎 圆猿苑援 园苑缘苑 咱酝 垣 匀暂 垣 袁理论值
悦员圆匀员猿韵缘 圆猿苑郾 园苑远猿曰员匀 晕酝砸 渊悦阅悦造猿冤 啄院 源郾 猿苑渊员匀袁凿择袁允 越员圆郾 猿袁远郾 圆 匀扎袁匀鄄圆冤袁源郾 园园渊员匀袁凿袁允 越员圆郾 猿 匀扎袁匀鄄
猿冤袁猿郾 愿苑 渊员匀袁 泽袁 猿鄄韵匀冤袁缘郾 愿远 渊 员匀袁 泽袁 匀鄄愿 冤袁 远郾 园缘
渊员匀袁凿择袁允 越 员缘郾 源袁员郾 远 匀扎袁匀鄄怨冤袁远郾 怨苑 渊员匀袁凿择袁允 越
员缘郾 源袁苑郾 员 匀扎袁匀鄄员园冤袁员郾 怨远渊猿匀袁凿择袁允 越 苑郾 园袁员郾 源 匀扎袁
匀鄄员员冤袁员郾 远缘 渊猿匀袁 凿袁 允 越 远郾 圆 匀扎袁 匀鄄员圆 冤曰 员猿悦 晕酝砸
渊悦阅悦造猿冤 啄院愿园郾 园 渊 悦鄄圆冤袁苑圆郾 园 渊 悦鄄猿冤袁员愿愿郾 苑 渊 悦鄄源冤袁怨苑郾 愿渊 悦鄄源葬冤袁员缘远郾 愿 渊 悦鄄缘冤袁员远源郾 猿 渊 悦鄄苑冤袁怨苑郾 愿 渊 悦鄄
愿冤袁员苑远郾 源渊悦鄄愿葬冤袁员圆圆郾 远渊悦鄄怨冤袁员源员郾 员 渊悦鄄员园冤袁员愿郾 愿
渊悦鄄员员冤袁员愿郾 员渊悦鄄员圆冤遥 上述数据与 在澡葬灶早等咱员圆暂报道
的根匍柄菌素渊则葬凿蚤糟蚤灶蚤灶冤基本一致袁因此袁确定该物
质为根匍柄菌素袁具体的分子结构如图 猿 所示遥
表 员 阅晕园圆 粗提物对稗草和反枝苋幼根的生长抑制效果
栽葬遭造藻 员 栽澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 糟则怎凿藻 藻曾贼则葬糟贼 葬早葬蚤灶泽贼 贼澡藻 则葬凿蚤糟造藻 早则燥憎贼澡 燥枣 耘糟澡蚤灶燥糟澡造燥葬 糟则怎泽早葬造造蚤 葬灶凿 粤皂葬则葬灶贼澡怎泽 则藻贼则燥枣造藻曾怎泽
浓度渊滋早 辕 皂蕴冤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
稗草 耘援 糟则怎泽早葬造造蚤 反枝苋 粤援 则藻贼则燥枣造藻曾怎泽
平均根长 渊皂皂冤
砸燥燥贼 藻造燥灶早葬贼蚤燥灶
抑制率 渊豫冤
陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻
平均根长 渊皂皂冤
砸燥燥贼 藻造燥灶早葬贼蚤燥灶
抑制率 渊豫冤
陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻
员 园园园 员援 源 依 园援 园远 藻 怨猿援 愿 依 猿援 园 葬 远援 圆 依 园援 员缘 藻 远缘援 愿 依 愿援 员 葬
员园园 愿援 愿 依 园援 圆猿 凿 远园援 远 依 员援 园 遭 怨援 圆 依 园援 圆源 凿 源怨援 源 依 员援 猿 遭
员园 员猿援 远 依 园援 圆源 糟 猿愿援 怨 依 员援 员 糟 员猿援 缘 依 园援 员猿 糟 圆缘援 源 依 苑援 猿 糟
员 员苑援 怨 依 园援 源源 遭 员怨援 远 依 员援 怨 凿 员缘援 苑 依 园援 员愿 遭 员猿援 远 依 员援 员 凿
悦运 圆圆援 猿 依 园援 猿怨 葬 要 员愿援 员 依 园援 员怨 葬 要
摇 摇 表中数据为平均数 依标准差袁同列数据后不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验差异显著渊孕 约 园援 园缘冤遥 阅葬贼葬 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援
阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼 渊孕 约 园援 园缘冤援
表 圆 阅晕园圆 发酵液对稗草幼苗生长的抑制效果
栽葬遭造藻 圆 陨灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 贼燥 贼澡藻 泽藻藻凿造蚤灶早 早则燥憎贼澡
参数 孕葬则葬皂藻贼藻则 稀释倍数 阅蚤造怎贼蚤燥灶 则葬贼蚤燥园 员园 圆园 源园 愿园 员园园
员园园 滋早 辕 皂蕴
圆袁源鄄阅 悦运
受害率 灾蚤糟贼蚤皂蚤扎葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 渊豫 冤 远远援 苑 远圆援 圆 猿苑援 愿 猿园援 园 员源援 员 员员援 员 苑园援 园 员园援 员
平均株高 粤增藻则葬早藻 澡藻蚤早澡贼 渊糟皂冤 缘援 圆 缘援 远 愿援 圆 员园援 源 员园援 愿 员员援 圆 源援 员 员圆援 缘
平均鲜重 粤增藻则葬早藻 憎藻蚤早澡贼 渊皂早冤 员猿援 愿 员苑援 园 员愿援 圆 圆园援 园 圆缘援 圆 圆怨援 缘 员圆援 源 猿园援 员
图 猿 根匍柄菌素结构式
云蚤早援 猿 酝燥造藻糟怎造葬则 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 则葬凿蚤糟蚤灶蚤灶
猿 讨论
目前袁关于微生物除草剂开发的研究已有很大
进展遥 据报道袁已有约 愿园 种微生物可防除约 苑园 种
杂草咱员缘暂 遥 我国是世界上较早研究和利用微生物防
治杂草的国家之一袁如 员怨远猿 年山东省农业科学院刘
志海等研制成功的野鲁保一号冶可用于防除大豆田
员园员员 期 邵明伟等院豆娘肠道真菌 阅晕园圆 的鉴定及其除草活性成分
菟丝子咱员远暂 遥 然而微生物源除草剂的研究主要集中
于植物病原菌和土壤等环境微生物袁昆虫相关菌来
源的除草剂鲜有报道遥 本试验从健康豆娘成虫肠
道菌中筛选出一株对稗草和反枝苋具有抑制活性
的菌株 阅晕园圆袁结合形态学特征观察和分子生物学
测序分析袁鉴定该菌为新月旋孢腔菌袁活性测试发
现其乙酸乙酯粗提物对稗草和反枝苋幼根具有很
好的抑制效果袁该菌的发酵液对稗草幼苗也有很好
的抑制活性遥 因此袁阅晕园圆 具有开发成微生物源除
草剂的潜力遥
据报道袁弯孢菌属菌株 悦怎则增怎造葬则蚤葬 泽责援 和链格孢
属菌株 粤造贼藻皂怎则蚤葬 澡藻造蚤怎灶贼澡蚤 可产生根匍柄菌素咱员圆袁员苑暂 袁
但未见其来源于新月旋孢腔菌的报道遥 另外袁已有
研究表明袁根匍柄菌素对稗草幼根的生长具有很强
的抑制作用咱员圆暂 袁因此袁本试验分离得到的根匍柄菌
素可能是 阅晕园圆 的主要除草活性成分之一遥 有关该
菌的其它活性成分分离鉴定尧活性作用机制及大田
试验等袁还有待于进一步探讨遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 张朝贤袁 倪汉文袁 魏守辉袁 等援 杂草抗药性研究进展援 中国
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咱源暂 仉欢袁 王开运援 微生物除草剂研究进展援 杂草科学袁 圆园员园
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咱苑暂 徐文平袁 陶黎明援 以微生物代谢物进行除草剂开发的研究
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咱员源暂 王玲袁 黄世文袁 唐绍清袁 等援 新月弯孢 悦蕴耘菌株胞外蛋白
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咱员缘暂 张剑袁 董晔欣袁 张金林袁 等援 一株具有高除草活性的真菌
菌株援 菌物学报袁 圆园园愿袁 圆苑渊缘冤院 远源缘 原 远缘员
咱员远暂 高昭远袁 干静娥援 菟丝子的生物防除 要要要野鲁保一号冶 的
研究进展援 中国生物防治袁 员怨怨圆袁 愿渊源冤院 员苑猿 原 员苑缘
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