作 者 :陈迪 陈永勤 杨之帆 张艳艳 肖柳青
期 刊 :西北植物学报 2009年 2期
关键词:盾叶薯蓣;环阿屯醇合酶基因;基因表达;基因克隆;薯蓣皂甙元生物合成;Dioscorea zingiberensis;
Keywords:cycloartenol synthase gene, gene expression, gene cloning, diosgenin biosynthesis,
摘 要 :利用巢式PCR和RACE技术从盾叶薯蓣中克隆了阿屯醇合酶的cDNA(定名为DZCAS).结果表明,该cDNA的开放读码框为2 280 bp,编码759个氨基酸的多肽,分子量为86 924 Da,等电点为6.39.氨基酸序列比对表明盾叶薯蓣阿屯醇合酶与其他植物阿屯醇合酶的相似性超过70%,含有环阿屯醇合酶共有的保守序列.利用氧化鲨烯环化酶基因缺陷型酵母表达DZCAS,并用高效液相色谱和液质联用仪检测酵母细胞中环阿屯醇合成情况,证明DZCAS编码环阿屯醇合酶.RT-PCR分析表明,DZCAS在盾叶薯蓣幼叶中表达量最高,其次是在地下幼嫩块茎中,而地上幼茎表达量最低.