作 者 ：高书颖 范三红 郭蔼光 朱帮福 陈苏民
期 刊 ：西北植物学报 2003年 4期
关键词：人骨形成蛋白-3成熟肽；hBMP-3m；基因表达；烟草；根癌农杆菌介导法；
Keywords:human bone morphogenetic proteins 3 mature peptide (hBMP-3m), Nicotiana tabacum, Agrobacterium tumefaciens mediation,
摘 要 ：PCR扩增人骨形成蛋白-3成熟肽(hBMP-3m)cDNA，纯化后连接人pUC19质粒，构建克隆载体pUC19B3m；用EcoR Ⅰ和HindⅢ酶解pUC19B3m和pJIT163，将目的片段插入pJIT163，构建中间载体pJIT163-B3m；再构建植物表达载体pCAMBIA1300-B3m。利用冻融法将质粒pCAMBIA-hBMP3m转入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404。以烟草(Nicotiana tabacum L.)无菌苗叶盘为外植体，通过根癌农杆菌介导法进行遗传转化，获得了在含25mg／L潮霉素(Hygromycin，Hyg)的筛选培养基上再生的抗性植株，经PCR证实其中部分植株已将人骨形成蛋白-3成熟肽基因整合到烟草基因组中，Western Blot结果表明已有微量BMP表达。关键词：人骨形成蛋白-3成熟肽(hBMP-3m)；烟草；根癌农杆菌介导法。