全 文 ：书岷山红三叶异黄酮对产蛋后期母鸡生产
性能、骨矿化及血液指标的影响
王元生１，２，李发弟１，３，郝正里１，俞联平４
（１．甘肃农业大学动物科技学院，甘肃 兰州７３００７０；２．兰州市畜牧兽医研究所，甘肃 兰州７３００５０；３．甘肃省饲料工程
技术研究中心，甘肃 兰州７３００７０；４．甘肃省动物营养研究所，甘肃 兰州７３００４６）
摘要：试验旨在研究岷山红三叶异黄酮对产蛋后期母鸡生产性能、骨矿化、血清生化指标、内分泌激素水平等的影
响。将５０周龄罗曼蛋鸡４５０羽，随机分成５组，每组６个重复，每个重复１５羽。１组（对照）饲喂玉米－豆粕－杂
粕型基础饲粮，２，３，４，５组分别在基础饲粮中添加５，１０，２０ｍｇ／ｋｇ红三叶异黄酮和２０ｍｇ／ｋｇ大豆异黄酮（参比）。
预试期２周，正试期１０周。结果表明，１）各组生产性能和蛋品质无显著差异（犘＞０．０５），呈现出添加红三叶异黄酮
提高而添加大豆异黄酮（５组）降低蛋壳强度的趋势（犘＝０．２１３）；２）４组脾脏指数高于１，３（犘＜０．０５）和５组（犘＝
０．１５０）；３）４组胫骨灰含量高于１，２组（犘＜０．０５），３，５高于２组 （犘＝０．１４０，犘＝０．１５２）；４）添加红三叶异黄酮各
组血清钙含量提高（犘＝０．０９１），大豆异黄酮提高血清钙含量的作用似更强；５）４组血清甲状腺素（Ｔ４）含量高于１
（犘＜０．０５）和２，３组（犘＝０．１５０，犘＝０．２０），５组高于１组（犘＝０．０７４）。结果提示，饲粮中添加５，１０，２０ｍｇ／ｋｇ红三
叶异黄酮和２０ｍｇ／ｋｇ大豆异黄酮对产蛋后期母鸡产蛋性能无显著影响；添加红三叶异黄酮一定程度上改善了蛋
壳强度，添加量２０ｍｇ／ｋｇ促进了骨矿化。
关键词：红三叶异黄酮；产蛋鸡；生产性能；蛋品质；骨矿化；血液指标
中图分类号：Ｓ５４１＋．２；Ｓ８３１．５　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００４５７５９（２０１０）０２０１３３０７
 　 红三叶（犜狉犻犳狅犾犻狌犿狆狉犪狋犲狀狊犲）为豆科三叶草属多年生草本植物，原产于小亚细亚与东南欧，广泛分布于温带
及亚热带地区。我国也有大面积种植，主要分布于甘肃、湖北、重庆等地；种植的有３个品种，即巴东红三叶、岷山
红三叶、巫溪红三叶［１］。红三叶草具有较高的饲用价值，除作为优良豆科牧草被利用外［２］，红三叶还具药用保健
作用。从红三叶草中发现的异黄酮类物质共有４０多种，含量较多的４种依次为芒柄花素、鸡豆黄素、染料木黄酮
和黄豆苷元［３］；其含量受基因调控，又与环境因素如季节、土壤等有很大关系［４］。异黄酮对调节新陈代谢、预防中
老年疾病有一定作用，特别是在防骨质疏松和癌症方面具有特殊的功效［５］。
岷山红三叶草（犜．狆狉犪狋犲狀狊犲ｃｖ‘Ｍｉｎｓｈａｎ’）是在甘肃省高寒阴湿地区育成的抗寒耐湿、病虫害少，优质高
产［６］，其茎叶中雌激素异黄酮约占干重的１％；４种主要的异黄酮中，芒柄花素、鹰嘴豆芽素Ａ的含量最高（占干
重的０．１０％～０．９０％），其次为染料木素和大豆黄素［７］。岷山红三叶草茎叶产量高，深度开发及加工增值潜力
大，是集草、药兼用于一体的优良牧草、药用和保健植物［８，９］。
目前，国内外对大豆（犌犾狔犮犻狀犲犿犪狓）、葛根（犘狌犲狉犪狉犻犪犾狅犫犪狋犪）、空心苋（犌犾犲犮犺狅犿犪犾狅狀犵犻狋狌犫犪）、黄芪（犃狊狋狉犪犵犪犾狌狊
犿犲犿犫狉犪狀犪犮犲狌狊）和鸢尾科（Ｉｒｉｄａｃｅａｅ）根茎类植物中异黄酮的含量及其生理作用研究较深入，对红三叶中异黄酮的
研究还处于初级阶段［１０］。本试验用大豆异黄酮为参比，以产蛋后期母鸡为动物模型，研究不同剂量岷山红三叶
异黄酮对其生产性能、骨矿化及血液指标的影响，为进一步研究利用岷山红三叶作为新型绿色饲料添加剂和人体
保健食品提供科学依据。
１　材料与方法
１．１　红三叶异黄酮和大豆异黄酮
红三叶异黄酮：购自岷州集团岷海制药有限公司，总异黄酮含量为１２．６５％，其中主要异黄酮种类有芒柄花
第１９卷　第２期
Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．２
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ 　　
１３３－１３９
２０１０年４月
 收稿日期：２００９０３２５；改回日期：２００９０６０１
基金项目：甘肃农业大学草业科学国家重点学科学术骨干科研项目暨草业生态系统教育部省部共建重点实验室项目和甘肃省草原技术推广
总站项目（ＧＮＫＪ２００５０６）资助。
作者简介：王元生（１９８２），男，甘肃永登人，硕士。Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｙｕａｎｓｈｅｎｇ０５０５＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者。Ｅｍａｉｌ：ｌｉｆｄ＠ｇｓａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
素４．７１％，鹰嘴豆芽素Ａ３．２４％，染料木素０．６５％，大豆黄素０．３８％。
大豆异黄酮：购自陕西昌泰实业有限公司，总异黄酮含量为２０％，其中染料木素１１％，黄豆苷元６．５％，大豆
黄素１．５％。
１．２　试验设计与试验动物
采用单因子分组试验设计。２００７年５月下旬从榆中种鸡场５０周龄罗曼蛋鸡群中选择健康、体重相近的试
鸡４５０只，随机分成５组（各６个重复，每个重复１５只鸡）。预试期（２周）各处理均采食基础饲粮；正试期（１０周）
分别接受５个处理：１组（对照）饲喂以基础饲粮，２，３，４组分别在基础饲粮中添加红三叶异黄酮５，１０，２０ｍｇ／ｋｇ，
５组在基础饲粮中添加大豆异黄酮２０ｍｇ／ｋｇ作为参比。
１．３　试验饲粮及营养水平
参照中华人民共和国农业行业标准（ＮＹ／Ｔ３３－
２００４）中商品蛋鸡营养推荐值设计基础饲粮（玉米－豆
粕－杂粕型）配方，由榆中种鸡场饲料车间配制（粉
料）。基础饲粮组成及营养水平见表１。
１．４　饲养管理
三阶梯式笼养（用中、下层）。鸡舍一侧有窗，以通
风、采光，另补充机械通风及人工光照（总日光照１４
ｈ）。人工喂料（每日３次）、乳头式饮水器供水；人工捡
蛋（上下午各１次）。
１．５　测定指标及方法
１．５．１　生产性能　每日记录各重复的产蛋数、产蛋
量、耗料量、死淘鸡数、破汤蛋数；按周统计产蛋率、产
蛋量、耗料量、料蛋比、死淘率和破汤蛋率等。
１．５．２　鸡蛋品质　于５７周龄，从各处理的每个重复
随机抽取５～６枚蛋（２４ｈ内）供测。称蛋重后，用蛋
形指数测定仪测量蛋的横径、纵径，计算蛋形指数（纵
径／横径）；再用ＴＯＫＹＯＪＡＰＡＮ８１７Ｂ卵壳强度计测
蛋壳强度；用８１８Ｂ，ＫＩＹＡＳＥＩＳＡＫＵＳＨＯ，ＬＴＤ蛋
白高度测定仪测定蛋白高度，计算哈氏单位［哈氏单位
＝１００·ｌｏｇ（Ｈ－１．７Ｗ０．３７＋７．５７）］，Ｈ为浓蛋白高度
（ｍｍ），Ｗ为蛋重（ｇ）；用蛋壳厚度测定仪测定蛋壳厚
度（去壳膜后，在蛋的大、中、小部分各取３样，测后取
平均值）；蛋壳重是去膜蛋壳１００～１０５℃的烘干重，蛋
壳重（每重复测１～２枚蛋）占蛋重的百分比即为蛋壳
率。
表１　基础饲粮组成及营养水平（风干基础）
犜犪犫犾犲１　犜犺犲犮狅犿狆狅狊犻狋犻狅狀犪狀犱狋犺犲狀狌狋狉犻犲狀狋
犾犲狏犲犾狊狅犳犫犪狊犪犾犱犻犲狋（犪犻狉犱狉狔犫犪狊犻狊）
饲料组分
Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ
配比
Ｃｏｎｔｅｎｔ（％）
营养
Ｎｕｔｒｉｅｎｔ
含量
Ｃｏｎｔｅｎｔ
玉米Ｃｏｒｎ ５６．７ ＭＥ（ＭＪ／ｋｇ） １１．５４
小麦麸 Ｗｈｅａｔｂｒａｎ ２．０ ＣＰ（％） １６．７５
菜籽油Ｒａｐｅｓｅｅｄｏｉｌ ０．４ Ｃａ（％） ３．５０
大豆（生）Ｓｏｙｂｅａｎ（ｒａｗ） ３．０ Ｐ（％） ０．７０
大豆粕Ｓｏｙｂｅａｎｍｅａｌ ２１．０ Ｍｅｔ（％） ０．４０
胡麻饼Ｆｌａｘｃａｋｅ ６．０ Ｌｙｓ（％） ０．６５
磷酸氢钙ＣａＨＰＯ４ １．５
石灰石粒Ｌｉｍｅｓｔｏｎｅｇｒａｎｕｌｅ ８．０
食盐Ｃｏｍｍｏｎｓａｌｔ ０．４
预混料Ｐｒｅｍｉｘ １．０
合计Ｔｏｔａｌ １００．０
　预混料由榆中种鸡场生产。ＴｈｅｐｒｅｍｉｘｗａｓｍａｄｅｉｎＹｕｚｈｏｎｇｂｒｅｅｄ
ｉｎｇｂｉｒｄｆａｒｍ．每ｋｇ饲粮中含维生素 Ｖｉｔａｍｉｎｓｐｅｒｋｇｄｉｅｔ：ＶＡ，８０００
ＩＵ；ＶＤ，１６００ＩＵ；ＶＥ，５ＩＵ；ＶＫ，０．５ＩＵ；ＶＢ１，０．８ｍｇ；ＶＢ２，２．５
ｍｇ；泛酸Ｐａｎｔｏｔｈｅｎｉｃａｃｉｄ，２．２ｍｇ；ＶＢ６，３．０ｍｇ；生物素Ｂｉｏｔｉｎ，０．１０
ｍｇ；叶酸Ｆｏｌｏｃａｃｉｄ，０．２５ｍｇ；ＶＢ１２，０．００４ｍｇ；胆碱Ｃｈｏｌｉｎｅ，５００ｍｇ；
每ｋｇ饲粮中含微量元素 Ｍｉｃｒｏｅｌｅｍｅｎｔｓｐｅｒｋｇｄｉｅｔ（ｍｇ）：Ｆｅ，９０；Ｚｎ，
１６０；Ｃｕ，８；Ｍｎ，９０；Ｉ，０．３５；Ｓｅ，０．３．ＭＥ：代谢能 Ｍｅｔａｂｏｌｉｚａｂｌｅ
ｅｎｅｒｇｙ．
１．５．３　脏器指数与骨发育　试验结束后，从每个重复随机抽取１只母鸡，称重后颈部放血致死；褪毛、剖腹后取
样测定。
１）小心地取出卵巢、输卵管、脾脏和胸腺，剥离其上附着的脂肪、称重。
２）取下左腿，置沸水中煮３０ｍｉｎ，沥水、冷却、剥去肌肉与筋腱，完整地取出胫骨及软骨帽。观察胫骨形态，
用游标卡尺测其长、宽（最细处、股骨端、跖骨端）；用骨钳从中间夹断胫骨、包以脱脂滤纸，依次用无水乙醇脱水
２４ｈ、乙醚抽提脱脂２４ｈ、１０５℃干燥２ｈ并恒重（Ａ）、５５０～６００℃灼烧至骨变为白色并恒重（Ｂ）。结果表示为脱水
脱脂胫骨的灰分含量（犅／犃×１００％）。
１．５．４　血清生化指标及内分泌激素　血清生化指标：屠宰时收集血液于１０ｍＬ离心管中，将离心管倾斜４５°，析
出血清，－２０℃保存。用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒测定以下指标。
４３１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１０） Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．２
１）血清钙：甲基百里香酚蓝络合比色法［１１］。２）血清磷：钼酸铵－偏矾酸铵比色法［１２］。３）碱性磷酸酶
（ＡＫＰ）：对硝基苯磷酸二钠法［１３］。４）总抗氧化酶（ＴＳＯＤ）：黄嘌呤氧化酶法［１４］。５）丙二醛（ＭＤＡ）：ＴＢＡ法［１５］。
内分泌激素：用ＥＪ２００８型自动γ免疫计数器测定血清中４种内分泌激素。雌二醇（Ｅ２）、孕酮（Ｐ４）、三碘甲
腺原氨酸（Ｔ３）测定用北京普尔伟生物科技有限公司提供药盒；甲状腺素（Ｔ４）测定用南京建成生物工程研究所提
供药盒。
１．６　数据统计分析
采用ＳＰＳＳ１１．５统计软件中ＯｎｅＷａｙＡＮＯＶＡ过程对数据进行方差分析。差异显著时用Ｄｕｎｃａｎ’ｓ法作
多重比较。所有数据均以平均数±标准差表示。
２　结果与分析
２．１　不同处理组母鸡的生产性能
将各处理母鸡产蛋性能数据列入表２。处理２，３的鸡日与入舍母鸡产蛋率均与对照处理（１）接近，处理４，５
均偏低且死淘率较高，但表中所列各指标在处理间均无显著差异（犘＞０．０５）。
２．２　不同处理组母鸡的鸡蛋品质
处理间蛋重与各蛋品质指标的差异均不显著（犘＞０．０５），但呈现出添加红三叶异黄酮（处理３、４）蛋壳强度提
高，而添加大豆异黄酮（处理５）降低的趋势（犘＝０．２１３）（表３）。
２．３　脏器指数
处理４脾脏指数显著高于１，３（犘＜０．０５），并呈现高于５的趋势（犘＝０．１５０）。处理间其他指标的差异不显
著（犘＞０．０５），但显示出处理３，４，５胸腺指数大于１，２的趋势（犘＝０．２１３），但各处理较对照组均有不同程度的提
高（表４）。
表２　不同处理母鸡的产蛋性能
犜犪犫犾犲２　犜犺犲狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲狅犳犾犪狔犻狀犵犺犲狀狊犳狅狉犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犲犪狋犿犲狀狋狊
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
鸡日产蛋率
Ｈｅｎｄａｙｅｇｇ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ（％）
入舍母鸡产蛋率
Ｈｅｎｈｏｕｓｅｄｅｇｇ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ（％）
入舍母鸡总蛋量
Ｅｇｇｍａｓｓ
（ｋｇ／每舍母鸡Ｐｅｒｈｅｎｈｏｕｓｅｄ）
耗料量
Ｆｅｅｄｉｎｔａｋｅ
（ｇ）
料蛋比
Ｆｅｅｄ∶ｅｇｇ
（ｇ：ｇ）
死淘率
Ｍｅｒｔａｌｉｔｙａｎｄ
ｃｕｌｏｕｔ（％）
破汤蛋率
Ｅｇｇｗｉｔｈｄｅｆｅｃｔｉｖｅ
ｓｈｅｌｓ（％）
１ ７６．３２±４．７８ ７６．２５±４．７８ ３．３３±０．３７ １１７．２±４．７７ ２．４８±０．２４ １．１１±２．７２ ３．１２±１．４０
２ ７６．７８±５．１１ ７６．１４±４．４６ ３．３３±０．３４ １１９．６±５．９６ ２．５１±０．２３ １．１１±２．７２ ３．９７±３．０１
３ ７６．１８±３．００ ７５．７３±３．６１ ３．３８±０．２４ １３２．９±２９．８ ２．７６±０．７３ ２．２２±３．４４ ３．４３±１．３３
４ ７４．８４±４．８０ ７３．３５±５．７１ ３．１９±０．４２ １１９．６±６．４３ ２．４６±０．５３ ３．３３±５．５８ ２．９８±０．８８
５ ７４．００±５．４８ ７１．７３±３．６６ ３．１８±０．３４ １１６．７±３．４８ ２．５３±０．２８ ４．４４±５．４４ ３．５７±１．１３
犘值 Ｖａｌｕｅ ０．８３３ ０．３３８ ０．７９０ ０．２８５ ０．７７７ ０．５８６ ０．８６９
表３　不同处理饲粮母鸡５７周龄的蛋品质
犜犪犫犾犲３　犜犺犲犲犵犵狇狌犪犾犻狋狔狅犳犾犪狔犲狉犳狅狉犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犲犪狋犿犲狀狋
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
蛋重
Ｅｇｇｓｉｚｅ（ｇ）
蛋壳厚度
Ｓｈｅｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ（ｍｍ）
蛋壳率
Ｓｈｅｌｍａｓｓ／ｅｇｇｓｉｚｅ（％）
蛋壳强度
Ｓｈｅｌｓｔｒｅｎｇｔｈ（ｋｇ／ｃｍ２）
蛋形指数
Ｅｇｇｓｈａｐｅｉｎｄｅｘ
哈氏单位
Ｈａｕｇｈｕｎｉｔｅ
１ ６５．３９±１．８６ ０．３６５±１．５２ ８．４３±１．１１ ３．１６±０．２４ １．３２±０．０３ １００．８７±０．０４
２ ６４．４０±１．３９ ０．３６７±１．５４ ８．３０±０．７６ ３．２９±０．２７ １．３２±０．０３ １００．８４±０．０６
３ ６４．８８±１．６３ ０．３７３±０．７５ ８．６１±０．３６ ３．４８±０．２９ １．３２±０．０３ １００．８６±０．０４
４ ６３．５１±１．８４ ０．３７２±０．８７ ８．６２±０．６７ ３．５０±０．３２ １．３２±０．０１ １００．８６±０．０３
５ ６４．１３±３．５９ ０．３６５±１．６１ ８．４１±１．０７ ３．００±０．６３ １．３２±０．０３ １００．８４±０．０７
犘值 Ｖａｌｕｅ ０．６４１ ０．７４１ ０．９５８ ０．２１３ ０．９９３ ０．７９９
５３１第１９卷第２期 草业学报２０１０年
表４　不同处理母鸡的脏器指数
犜犪犫犾犲４　犜犺犲犻狀狋犲狉狀犪犾狅狉犵犪狀犻狀犱犲狓犲狊狅犳犾犪狔犲狉犳狅狉犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犲犪狋犿犲狀狋 ％
处理Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ 脾脏指数Ｓｐｌｅｅｎｉｎｄｅｘ 胸腺指数Ｔｈｙｍｕｓｉｎｄｅｘ 输卵管指数Ｏｖｉｄｕｃｔｉｎｄｅｘ 卵巢指数Ｏｖａｒｙｉｎｄｅｘ
１ ０．０６５±０．０１３ｂ ０．０２２±０．０１２ ４．６０±１．２１ ２．０９±０．４９
２ ０．０９５±０．０２７ａｂ ０．０２６±０．０１１ ４．２２±１．００ ２．２４±０．４９
３ ０．０６７±０．００８ｂ ０．０３３±０．０１６ ３．７６±１．２０ ２．３０±０．４１
４ ０．１０５±０．０３１ａ ０．０３２±０．０１３ ４．３２±１．１４ ２．３４±０．６３
５ ０．０８８±０．０２４ａｂ ０．０４５±０．０２６ ４．１６±１．００ ２．６３±０．６６
犘值 Ｖａｌｕｅ ０．０３７ ０．２１３ ０．７７４ ０．３４１
　注：同列数字不同小写字母表示差异显著（犘＜０．０５）。下同。
　Ｎｏｔｅ：Ｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎ，ｖａｌｕｅｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｍｅａｎｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（犘＜０．０５）．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
２．４　胫骨形态与矿质化
处理１，３胫骨的近股骨端相对宽度（近股骨端宽／体重）显著高于５（犘＜０．０５）；处理４胫骨灰含量显著高于
１，２（犘＜０．０５）。处理间其他指标的差异均不显著（犘＞０．０５）（表５）。
２．５　血清生化指标与激素水平
２．５．１　血液生化指标　处理间血清中钙、磷、ＡＫＰ、ＴＳＯＤ和 ＭＤＡ测定值的差异均不显著（犘＞０．０５）；但显示
出添加红三叶草异黄酮与大豆异黄酮处理（２，３，４，５）血清钙浓度较对照处理提高的趋势（犘＝０．０９１）；相同添加
水平（２０ｍｇ／ｋｇ）相比，三叶草异黄酮（处理４）提高血清钙的作用低于大豆异黄酮（处理５）（表６）。
２．５．２　血清激素水平　处理间Ｅ２、Ｐ４ 和Ｔ３ 的差异均不显著（犘＞０．０５）。处理４血清Ｔ４ 含量显著高于１（犘＜
０．０５），呈现４高于２，３（犘＝０．１５０，犘＝０．２０）与５高于１的趋势（犘＝０．０７４）（表７）。
表５　不同处理母鸡的胫骨特点
犜犪犫犾犲５　犜犺犲狋犻犫犻犪犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊狅犳犾犪狔犲狉犳狅狉犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犲犪狋犿犲狀狋
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
胫骨灰分
Ａｓｈｉｎｔｉｂｉａｅ（％）
胫骨长／体重
Ｔｉｂｉａｌｅｎｇｈｔｈ／ｌｉｖｅｗｅｉｇｈｔ
胫骨宽／体重Ｔｉｂｉａｗｉｄｔｈ／ｌｉｖｅｗｅｉｇｈｔ
最细处Ｔｈｉｎｓｉｔｅ 近股骨端Ｎｅａｒｔｈｉｇｈｂｏｎｅ 近跖骨端Ｎｅａｒｂａｓｉｄｉｇｉｔａｌｂｏｎｅ
１ ５８．９０±３．１１ｂ ０．６２±０．０８ ０．０３８±０．００６ ０．０６１±０．００４ａ ０．０５１±０．００６
２ ５８．２３±１．９９ｂ ０．６２±０．０５ ０．０３６±０．００５ ０．０５８±０．００６ａｂ ０．０５１±０．００５
３ ６０．６６±０．１７ａｂ ０．６２±０．０８ ０．０３９±０．００５ ０．０５９±０．００３ａ ０．０５１±０．００５
４ ６２．３０±１．９８ａ ０．６１±０．０２ ０．０３８±０．００２ ０．０５７±０．００３ａｂ ０．０５０±０．００２
５ ６０．５５±２．８３ａｂ ０．６０±０．０３ ０．０３７±０．００４ ０．０５３±０．００２ｂ ０．０４８±０．００３
犘值 Ｖａｌｕｅ ０．０４５ ０．９４２ ０．８７３ ０．０１８ ０．６８３
表６　不同处理母鸡的血清生化指标
犜犪犫犾犲６　犛犲狉狌犿狆狉狅犳犻犾犲狊狅犳犾犪狔犲狉犳狅狉犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犲犪狋犿犲狀狋
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
钙
Ｃａｉｃｉｕｍ（ｍｍｏｌ／Ｌ）
磷
Ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ（ｍｍｏｌ／Ｌ）
碱性磷酸酶
ＡＫＰ（ｍｍｏｌ／Ｌ）
总抗氧化酶
ＴＳＯＤ（Ｕ／ｍｏｌ）
丙二醛
ＭＤＡ（ｍｍｏｌ／Ｌ）
１ ３．２０±０．３９ １．１４±０．３５ １５．９７±６．０５ １８５．６６±１．９３ ７．８６±３１．２２
２ ３．４３±０．３６ １．０１±０．１７ １６．５０±６．７８ １８４．２０±３．１２ ８．３３±３３．３０
３ ３．８０±０．６１ ０．９１±０．１３ １２．５４±３．９０ １８７．８５±１５．８３ ６．４３±４２．０３
４ ３．６９±１．００ ０．９２±０．１７ １４．４９±７．４９ １８０．５６±１０．９２ ８．０５±２６．０２
５ ４．２９±０．４８ ０．９４±０．１０ １６．７４±６．６４ １８５．７６±４．９６ ７．６４±２５．０８
犘值 Ｖａｌｕｅ ０．０９１ ０．３９６ ０．７６３ ０．８０８ ０．８４２
６３１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１０） Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．２
表７　不同处理母鸡的血清激素水平
犜犪犫犾犲７　犜犺犲狊犲狉狌犿犺狅狉犿狅狀犲犾犲狏犲犾狊狅犳犾犪狔犻狀犵犺犲狀狊犳狅狉犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犲犪狋犿犲狀狋
处理Ｔｒｅａｔｍｗｎｔ 雌二醇Ｅ２（ｐｇ／ｍＬ） 孕酮Ｐ４（ｎｇ／ｍＬ） 三碘甲腺原氨酸Ｔ３（ｎｇ／ｍＬ） 甲状腺素Ｔ４（ｎｇ／ｍＬ）
１ ２８０３．３０±１３７２．０４ １．５５±０．０６ １．２７±０．６４ ３９．１１±７．６４ｂ
２ ３２０６．４９±９９５．５８ １．５８±０．０７ ０．９５±０．３３ ４４．５２±７．５８ａｂ
３ ３２６５．４２±７４４．２８ １．５６±０．０５ １．０４±０．１７ ４４．１８±９．７７ａｂ
４ ２５９４．０７±１５７６．８５ １．５８±０．０３ １．０５±０．２９ ５４．３４±７．５４ａ
５ ２５２６．５５±１６３２．６５ １．６０±０．０４ ０．９８±０．１０ ５１．９５±７．６４ａｂ
犘值 Ｖａｌｕｅ ０．８０１ ０．４３２ ０．５８９ ０．０２０
３　讨论
３．１　红三叶异黄酮对产蛋后期母鸡产蛋性能的影响
禽类的产蛋性能主要受下丘脑－垂体－性腺构成的生殖轴的调控，其中促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）是主
要因子，在体内性激素与中枢系统下丘脑受体结合，通过改变ＧｎＲＨ的释放而影响垂体促黄体素（ＬＨ）的分泌。
雌激素可直接对ＧｎＲＨ神经元产生作用，诱导ＧｎＲＨ神经元的性别差异、调节ＧｎＲＨ的合成和分泌，但是雌激
素对ＧｎＲＨ的合成和分泌既有促进效应，又有抑制效应，且前者相对缓慢，后者较快速。本试验母鸡处于产蛋后
期（５０～６２周龄），即产蛋衰退期，雌激素已经上升到足以抑制垂体ＬＨ和促卵泡素（ＦＳＨ）激素的分泌和释放的
水平，产蛋率开始下降。在产蛋后期饲粮中添加红三叶异黄酮５，１０，２０ｍｇ／ｋｇ和大豆异黄酮２０ｍｇ／ｋｇ（参比
组），均未改善母鸡的生产性能和饲料转化效率。这与弓琴等［１６］的试验结果基本一致，其在５０周龄农大矮小型
产蛋鸡饲粮中添加大豆黄酮１０ｍｇ／ｋｇ和染料木黄酮１０ｍｇ／ｋｇ，对产蛋率、产蛋量和平均蛋重均无显著影响。但
一些试验中，添加异黄酮提高了蛋鸡产蛋率。刘燕强和韩正康［１７］及孟婷等［１８］在初产鸡、产蛋高峰期和产蛋后期
鸡试验中，饲粮中添加大豆异黄酮３ｍｇ／ｋｇ提高产蛋率和蛋重的效果优于６和１５ｍｇ／ｋｇ。柯叶艳等［１９］在鹌鹑
试验中，添加３ｍｇ／ｋｇ大豆异黄酮显著提高了开产、高峰期和产蛋后期的产蛋率，而高峰期添加６ｍｇ／ｋｇ大豆异
黄酮使产蛋率显著下降。与这些试验结果相比，本试验异黄酮的添加水平较高，可能产生了抗雌激素样作用。据
报道，大豆异黄酮不仅具有雌激素样作用，而且还有抗雌激素样作用；当机体雌激素水平低时其发挥雌激素作用，
反之起抗雌激素作用［２０］。Ｌｅｏｐｏｌｄ等［２１］报道，加利福尼亚地区的野生鹌鹑摄入富含异黄酮的牧草后，产蛋性能
显著下降。近年来的研究发现，异黄酮植物雌激素对禽类的产蛋效果与其剂量、家禽的种类及机体所处的生理状
态等因素有一定的关系［２２］。
３．２　红三叶异黄酮对蛋壳品质、骨矿化及血清钙浓度的影响
试验结果表明，红三叶异黄酮和大豆异黄酮影响钙代谢和利用的途径似乎有差别。呈现出添加不同水平红
三叶异黄酮提高蛋壳强度，而添加２０ｍｇ／ｋｇ大豆异黄酮使蛋壳强度下降的趋势；随红三叶异黄酮添加水平提
高，血清钙含量呈升高趋势，但其对血清钙水平的影响低于大豆异黄酮；红三叶异黄酮对骨矿化的作用高于大豆
异黄酮，大豆异黄酮试鸡的胫骨灰含量与１０ｍｇ／ｋｇ红三叶异黄酮组相近，而比添加２０ｍｇ／ｋｇ红三叶异黄酮组
低１．７５个百分点（犘＞０．０５）。对２种来源异黄酮可能存在的不同作用特点，尚须进一步试验证实。
３．３　红三叶异黄酮对母鸡脏器指数及激素水平的影响
免疫器官指数法是目前研究机体免疫体况的方法之一。一般认为免疫器官指数降低为免疫抑制所致，而免
疫器官指数增加则为免疫增强的表现。张勇等［２３］研究表明，红三叶异黄酮具有增强小鼠免疫功能的作用。本试
验结果也显示岷山红三叶异黄酮有免疫增强作用，饲粮中添加２０ｍｇ／ｋｇ显著提高了产蛋后期母鸡脾脏指数（较
对照组提高６１．６％），添加５ｍｇ／ｋｇ也有所提高（对照组提高３１．６％）。脾脏是重要的外周免疫器官之一，通过生
成红细胞、消除衰老死亡的红细胞和血液中的大部分抗原，以及对血液循环中抗原产生免疫应答等途径实现其免
疫功能［２４］。但是，添加１０ｍｇ／ｋｇ试鸡的脾脏指数几乎与对照组相同，其原因有待进一步探讨。本试验结果也与
有关异黄酮对免疫器官重量影响的研究报道基本一致［２２，２３］。
７３１第１９卷第２期 草业学报２０１０年
饲粮中添加红三叶异黄酮，血液中Ｔ４ 水平升高，表明该植物雌激素对产蛋鸡甲状腺激素的分泌有影响。红
三叶异黄酮与内源性的雌二醇受体结合，可能发挥弱的雌激素样和抗雌激素样作用。而雌激素能增强脑垂体对
甲状腺释放激素（ＴＲＨ）的敏感性，一般情况下，雌激素水平高时，血液中促甲状腺素（ＴＳＨ）浓度也较高，而ＴＳＨ
又能促进甲状腺激素的合成和分泌［１８］。
本试验中，添加红三叶异黄酮与大豆异黄酮，产蛋后期鸡血清Ｅ２ 含量变化不显著（犘＞０．０５），这与周玉传
等［２５］的试验结果一致，其在饲粮中添加大豆异黄酮对产蛋初期鸭Ｅ２ 水平的影响不明显。由此推测，大豆异黄酮
在体内的多种作用是通过活化靶细胞上Ｅ２ 受体，然后与之结合，而不是增加内源性Ｅ２ 水平。
４　小结
本试验条件下，饲粮中添加５，１０，２０ｍｇ／ｋｇ岷山红三叶异黄酮和２０ｍｇ／ｋｇ大豆异黄酮对产蛋后期母鸡的
产蛋性能无改善，但呈现出添加不同量红三叶异黄酮提高蛋壳强度，而添加２０ｍｇ／ｋｇ大豆异黄酮使蛋壳强度下
降的趋势。添加２０ｍｇ／ｋｇ红三叶异黄酮显著提高了产蛋后期鸡脾脏指数、胫骨灰分含量和血清中Ｔ４ 的含量。
红三叶异黄酮提高胫骨灰含量的作用高于大豆异黄酮，而提高血清钙含量的作用低于后者。
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犈犳犳犲犮狋狊狅犳犜狉犻犳狅犾犻狌犿狆狉犪狋犲狀狊犲犮狏‘犕犻狀狊犺犪狀’犻狊狅犳犾犪狏狅狀犲狅狀狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犪狀犱犫狅狀犲
犿犻狀犲狉犪犾犻狕犪狋犻狅狀犪狀犱犫犾狅狅犱狆狉狅犳犻犾犲狅犳犾犪狔犻狀犵犺犲狀狊犻狀犾犪狋犲狉狆犲狉犻狅犱
ＷＡＮＧＹｕａｎｓｈｅｎｇ１，２，ＬＩＦａｄｉ１，３，ＨＡＯＺｈｅｎｇｌｉ１，ＹＵＬｉａｎｐｉｎｇ４
（１．ＦａｃｕｌｔｙｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＧａｎｓｕＡｇｒｉｃｕｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ；
２．ＬａｎｚｈｏｕＨｕｓｂａｎｄｒｙ＆ＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００５０，Ｃｈｉｎａ；３．Ｇａｎｓｕ
ＦｅｅｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ；
４．ＧａｎｓｕＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００４６，Ｃｈｉｎａ）
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆ犜狉犻犳狅犾犻狌犿狆狉犪狋犲狀狊犲ｃｖ‘Ｍｉｎｓｈａｎ’ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ（ＴＰＩ）ｏｎｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｉｚａ
ｔｉｏｎ，ｂｌｏｏｄｐｒｏｆｉｌ，ｅａｎｄｅｎｄｏｃｒｉｎｅｈｏｒｍｏｎｅｌｅｖｅｌｏｆｌａｙｅｒｓｄｕｒｉｎｇｔｈｅｌａｔｅｒｌａｙｉｎｇｐｅｒｉｏｄｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．Ａｔｏｔａｌｏｆ
４５０，５０ｗｅｅｋｏｌｄＲｏｍａｎｌａｙｅｒｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｒａｎｄｏｍｌｙｉｎｔｏｆｉｖｅｇｒｏｕｐｓｗｉｔｈｓｉｘｒｅｐｅａｔｓｏｆ１５ｌａｙｅｒｓｅａｃｈ．
Ｔｈｅｓｅｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｆｅｄｂａｓａｌｄｉｅｔｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆｃｏｒｎ，ｓｏｙｂｅａｎｍｅａｌａｎｄｆｌａｘｍｅａｌ，ａｌｏｎｅｉｎｇｒｏｕｐ１，ｏｒｗｉｔｈａ
ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｏｆ５，１０，ｏｒ２０ｍｇ／ｋｇＴＰＩ，ｏｒｗｉｔｈ２０ｍｇ／ｋｇｓｏｙｉｓｆｌａｖｏｎｅ（ＳＩ）（ｇｒｏｕｐｓ２，３，４，ａｎｄ５ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ
ｌｙ）．Ａｆｔｅｒａｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｐｅｒｉｏｄｏｆｔｗｏｗｅｅｋｓ，ｔｈｅｔｒｉａｌｌａｓｔｅｄ１０ｗｅｅｋｓ．１）Ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔｏｆ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｏｎｔｈｅｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｅｇｇｑｕａｌｉｔｙ（犘＞０．０５），ｂｕｔｔｈｅｒｅｗａｓａｔｅｎｄｅｎｃｙｆｏｒｅｇｇｓｈｅｌｓｔｏｂｅｓｔｒｏｎ
ｇｅｒｉｎｇｒｏｕｐｓｗｉｔｈＴＰＩａｄｄｅｄｔｏｔｈｅｄｉｅｔｂｕｔｌｏｗｅｒｆｏｒｔｈｅｇｒｏｕｐｏｆ２０ｍｇ／ｋｇＳＩ（犘＝０．２１３）．２）Ｔｈｅｓｐｌｅｅｎｉｎ
ｄｅｘｗａｓｈｉｇｈｅｒｆｏｒｇｒｏｕｐ４ｔｈａｎｆｏｒｇｒｏｕｐ１，３（犘＜０．０５），ａｎｄ５（犘＝０．１５０）．３）Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｉｂｉａａｓｈ
ｆｒｏｍｇｒｏｕｐ４ｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｆｒｏｍｇｒｏｕｐｓ１ａｎｄ２（犘＜０．０５），ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｆｏｒｇｒｏｕｐｓ３ａｎｄ５ｔｅｎｄｅｄ
ｔｏｂｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｆｏｒｇｒｏｕｐ２（犘＝０．１４０，犘＝０．１５２）．４）Ｔｈｅｓｅｒｕｍｃａｌｃｉｕｍｌｅｖｅｌｗａｓｈｉｇｈｅｒｆｏｒｇｒｏｕｐｓ
ｗｉｔｈａｄｄｅｄＴＰＩ（犘＝０．０９１），ｗｉｔｈｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｉｎｇｒｏｕｐ５．５）Ｓｅｒｕｍｔｈｙｒｏｘｉｎｅ（Ｔ４）ｃｏｎｔｅｎｔｗａｓｈｉｇｈｅｒｆｏｒ
ｇｒｏｕｐ４ｔｈａｎｆｏｒｇｒｏｕｐ１（犘＜０．０５）ａｎｄｆｏｒｇｒｏｕｐｓ２（犘＝０．１５０）ａｎｄ３（犘＝０．２０），ａｎｄｔｈａｔｆｏｒＴ４ｗａｓａｌｓｏ
ｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｇｒｏｕｐ５ａｎｄｇｒｏｕｐ１（犘＝０．０７４）．Ｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｏｎｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｐｅｒｆｏｒｍ
ａｎｃｅｏｆｔｈｅｌａｔｅｒｌａｙｉｎｇｐｅｒｉｏｄｏｆｈｅｎｓａｓａｒｅｓｕｌｔｏｆａｄｄｉｎｇ５，１０，ｏｒ２０ｍｇ／ｋｇＴＰＩｏｒ２０ｍｇ／ｋｇＳＩ，ｂｕｔａｄｄｉｎｇ
ＴＰＩｉｍｐｒｏｖｅｄｅｇｇｓｈｅｌｓｔｒｅｎｇｔｈｔｏａｃｅｒｔａｉｎｄｅｇｒｅｅａｎｄａｄｄｉｎｇ２０ｍｇ／ｋｇ（ｇｒｏｕｐ４）ｏｆＴＰＩｉｍｐｒｏｖｅｄｂｏｎｅｍｉｎ
ｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ｉｓｆｌａｖｏｎｅｆｒｏｍ犜狉犻犳狅犾犻狌犿狆狉犪狋犲狀狊犲ｃｖ‘Ｍｉｎｓｈａｎ’；ｌａｙｉｎｇｈｅｎ；ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ；ｅｇｇｑｕａｌｉ
ｔｙ；ｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ；ｂｌｏｏｄｐｒｏｆｉｌｅ
９３１第１９卷第２期 草业学报２０１０年