全 文 ：林业科学研究!"#$%!"&"%#$"+ ,,
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!!文章编号!$##$($)*&""#$%##%(#"+(#+
绿竹 70;(<+(基因克隆与异位表达研究
董丽莉! 孙化雨! 赵韩生! 娄永峰! 王丽丽! 高志民!
"国际竹藤中心!竹藤科学与技术重点开放实验室!北京!$##$#"#
收稿日期$ "#$)(#+(,$
基金项目$ 国家科技支撑计划专题%分子辅助育种技术集成与示范&""#$"-./",-#%#)#%竹藤优异种质创制创新与种苗培育标准化
示范&""#$%-./#)-#$#(
作者简介$ 董丽莉"$*&&)#!女!硕士研究生!主要从事竹藤花卉分子育种研究23(4567$7Y@D#$#&<$,2=>4
!
通讯作者$ 高志民"$*+$)#!男!河北唐山人!研究员!博士生导师23(4567$:5>?@6469<6=AB25=2=9
摘要!糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白"LGN.G#因其结构和功能的多样性!决定了它在各种生物学过程中都发挥着重要
作用( 采用同源克隆的方法从绿竹"S(+54%( "23*(+,#中获得一个 :0Q70同源基因!命名为 S":0Q70!=/1.全长
$ ++" AU!其中包括 $ ,% AU的开放阅读框!编码一个 )%$ 55的的蛋白( 蛋白结构分析表明!该蛋白包含 $ 个典型的
LGN.G家族保守区域")+ J"$$#和 $ 个EEmM结构域!在1(端和E(端分别具有 $ 个跨膜信号肽和 $ 个LGN锚定信号
肽!属于LGN.G家族( 构建S":0Q70与:!0融合的表达载体!在洋葱表皮细胞中瞬时表达!结果显示 ->Eb-H$$
L^G融合蛋白定位于细胞膜上!证明S":0Q70基因编码的蛋白为膜蛋白( 分别构建 S":0Q70的正义反义表达载
体并转化烟草"6,)"&,(@( &(5()4+#( GE0检测结果表明!S":0Q70已转入烟草( 与野生型相比!转反义基因植株细
弱!纤维细胞壁明显变薄*而转正义基因植株粗壮!纤维细胞壁明显变厚( 表明 S":0Q70可能对竹子纤维细胞壁的
发育具有调控作用(
关键词!绿竹*糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白基因*亚细胞定位*异位表达*纤维细胞
中图分类号!M+*%2% 文献标识码!.
0&(,+1()+)/!81(#8!"#$%&&()(.70;(<+(.$(I73!613 0/5-3!"
D?6:;,<2,! BC6>4(<14! =>7?>(@<%*$@A! ;?CE"@A
-54A>>59R 05O59! -P6;69:!$##$#"#
*7&1$+81$ L7T=>DT7U@>DU@5O6RT769>D6O>7(59=@>BPR UB>OP69 "LGN.G# U75TD59 64U>BO59OB>7P69 459TA6>7>:6=57
UB>=PDDPDAP=5WDP>Q6ODR6VPBD6OT>QDOBW=OWBP59R QW9=O6>92.LGN.G:P9P85D6D>75OPR QB>4S(+54%( "23*(+,W(
D69:@>4>7>:>WD=7>969:4PO@>R! 59R RPD6:9PR 5DS":0Q702F@PQW7(7P9:O@ =/1.>QS":0Q7085D$++" AU 69=7W(
R69:59 >UP9 BP5R69:QB54P>Q$ ,% AU2F@PUBPR6=OPR UB>OP69 P9=>RPR ATS":0Q7085D)%$ 5469>5=6RD86O@ 5
OB59D4P4AB59PDOBW=OWBP5OO@P1(P9R 59R 5D6:957>QLGN(59=@>B5OO@PE(P9R! 59R 57D>=>9O56969:5OTU6=57=>9(
DPBVPR R>4569 ")+ J"$$# 59R 5EEmM 4>O6Q! 8@6=@ 69R6=5OPR O@5O6O85D54P4AB59PUB>OP69 AP7>9:69:O>LGN.G
Q5467T2F@PU759OPYUBPDD6>9 VP=O>B86O@ S":0Q70$$:!085D=>9DOBW=OPR 59R OB59DQ>B4PR 69O>>96>9 PU6RPB457
=P7D2F@PBPDW7OD>QQ7W>BPD=P9O46=B>D=>UPD@>8PR O@5OO@PQWDPR UB>OP69D8PBP45697T7>=5OPR >9 O@P=TO>U75D46=
4P4AB59P! 8@6=@ BPVP57PR O@5OO@PUB>OP69 P9=>RPR ATS":0Q7085D54P4AB59PUB>OP692F@PPYUBPDD6>9 VP=O>BD>Q
DP9DP59R 59O6DP9DPS":0Q708PBP=>9DOBW=OPR 69O>O@P4W7O6U7P=7>969:D6OPD>QU-N$"$ BPDUP=O6VP7T! 59R OB59D(
Q>B4PR 69O>O>A5==>4PR65OPR 86O@ 5:B>A5=OPB6W42F@POB59D:P96=U759OD>QS":0Q708PBP=>9Q6B4PR ATGE04PO@(
>R2F@PU@P9>OTUPDD@>8PR O@P59O6DP9DPOB59D:P96=U759OD8PBPO@69! 8@67PO@PDP9DPOB59D:P96=>9PD8PBPDO>WO
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9PB! 8@67PO@5O>QO@PDP9DPOB59D:P96=>9PD85DD6:96Q6=59O7TO@6=ePBO@59 O@5O>Q867R OTUP! 69R6=5O69:O@5OO@PS":<
林!业!科!学!研!究 第 "& 卷
GN.G45TU75T5BP:W75O>BTB>7P69 O@P857RPVP7>U4P9O>QQ6AB>WD=P769 A54A>>2
9%- :($/&$ S(+54%( "23*(+,* :7T=>DT7U@>DU@5O6RT769>D6O>7(59=@>BPR UB>OP69 :P9P* DWA=P7W75B7>=576?5O6>9* P=(
O>U6=PYUBPDD6>9* Q6AB>WD=P7
竹类植物是重要的森林资源!在全球森林资源
锐减的情况下!竹类植物以其速生且材质优良的特
点而倍受关注!我国每年竹材替代了全国将近 $\%
的木材使用量( 随着竹产业的迅速发展!竹资源出
现了质量相对单一!不能满足竹产业规模化多元化
利用需求的问题( 细胞壁组分结构是影响竹材材
性的重要因素!研究竹细胞壁的生物合成对于培育
符合生产实际需要的竹材新品种具有重要的现实意
义( 目前!关于竹类植物细胞壁生物合成相关的基
因已有一些报道!如木质素生物合成相关基因
8?JT
,$-
8/>
,"-
S"07;O
,,-
细胞色素G)%#,)- 0$0<
7;
,%-
S"07;-
,-
S"07;O
,+-
!纤维素合成酶基因
0G8$%7-
,&-
!蔗糖合成酶基因,*-与蔗糖运输基因 S"<
BCTO
,$#-等!但尚有许多与竹类植物细胞发育相关的
基因资源有待挖掘(
糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白":7T=>DT7U@>DU@5O6(
RT769>D6O>7(59=@>BPR UB>OP69! LGN.G#广泛存在于真核
生物的细胞质膜上!一类非常重要的膜蛋白!它通过
糖基磷脂酰肌醇插入于内质网膜和质膜来实现对细
胞壁生物合成的调控,$$- ( 拟南芥的 LGN.G同源蛋
白 .OEb-通过和其它相关蛋白共同参与纤维素微
纤丝取向与合成来调控细胞壁的生物合成,$"- !玉米
-e" 的功能是作用于木质素和纤维素之间的相互调
节以保持器官的灵活性而不是直接参与纤维素生物
合成,$,- !水稻的 BMJQ蛋白是通过控制泡状细胞的形成来调节叶片卷曲
度,$)- !水稻的-E$ 蛋白功能缺失!都会使其细胞壁
厚度和纤维素含量下降!提高木质素含量!导致茎
秆叶片变脆的表型!导致其机械强度下降,$%- ( 因
此!LGN.G对于植物细胞壁的生物合成及细胞伸展
有着重要的调节作用( 绿竹"S(+54%( "23*(+,#是
重要的笋用竹种!竹竿可作建筑用材或劈篾编制用
具!也可作为造纸原料!其基础研究一直倍受关注!
涉及竹笋生长发育,$ J$+- 细胞壁生物合成,$&-及花
发育,$* J"#-等相关基因的表达及功能初步研究( 本
研究以绿竹为材料!从分离 LGN.G同源蛋白基因入
手!通过其在烟草中的异位表达!来揭示其对细胞生
长发育的调控作用!为实现竹子的定向培育提供基
因资源和参考(
$!材料与方法
;2;<材料
绿竹"S(+54%( "23*(+,#为盆栽扦插苗!培养条
件为 "%K!光照 "##
!
4>7+4
J"
+D
J$
!光周期$光暗]$ @\& @(
;=><基因全长8?@*克隆与分析
采用FB6?>7法提取绿竹幼嫩叶片的总 01.,"$- !
参照GB>4P:5反转录试剂盒操作说明合成 =/1.!按
照E7>9OP=@ 的 MC.0FFC 0.E3试剂盒合成 ,I=/1.
和 %I=/1.(
根据S[O"/l$,*&+)#的保守区序列设计引物!
LGN.G(^$$%I(..EF.EE.L.FLF.EELLE(,I和LGN(
.G(0$$%I(LFFLF.L..EFFL.LEEELF.L(,I( 反应
体系 "#
!
H$" -`WQPB$#
!
H!R1FG"各 "2% 44>7+
H
J$
#,2"
!
H! $^"$#
!
4>7+H
J$
#"
!
H!0$"$#
!
4>7
+H
J$
#"
!
H!=/1."#2#)
!
:+H
J$
#$
!
H!C676(l水
$2
!
H!F5X 酶"% _+
!
H
J$
# #2"
!
H( 反应条件$
*)K $ 469!&K $ 469!+"K $ 469!共 ,%个循环( 电
泳回收GE0产物并连接到 UL3C(FP5DT载体上!转化
大肠杆菌"M%*$#,)*,( )"2,#菌株/Z%
#
感受态细胞!经
筛选检测后!将阳性克隆测序"上海生工生物工程技
术服务有限公司#( 根据获得的序列!在保守区设计
0.E3引物( %I(0.E3引物$% J$$%I(.LLF.L.EL(
LFLL.LLLL.EL.FLLFL(,I!% J"$%I(FL.ELLFEF(
FLFFLLFLLFLEE.LEL(,I( ,I(0.E3引物$, J$$
%I(FL..EF.E.EEE.LFLL.ELEFELFEL(,I!, J"$
%I(.ELLLEFE..LFFEF.E..EL.EEFLEFE(,I( 分
别以 %I=/1.和 ,I=/1.为模板!用引物 % J$ 和 , J
$ 与分别与_GC"试剂盒提供#配对!按试剂盒操作
说明进行第一轮 GE0扩增"GB>:B54
)
#( 反应结束
后分别以降落GE0的产物为模板!分别用 % J" 和 ,
J" 与1_G"试剂盒提供#配对进行巢式 GE0扩增
"GB>:B54
"
#!回收 GE0产物!连接到 UL3C(F35DT
载体后测序(
利用 A75DO" @OU$\\88829=A6296@2:>V\A75DO#进
行序列比对分析!利用在线软件 GB>OM=57P预测蛋白
的疏水性\亲水性,""- !C>O6QM=59 预测功能域,",- !
MbGC.预测蛋白二级结构,")- !FCG03/预测跨膜
&"
第 % 期 董丽莉!等$绿竹->LGN.G基因克隆与异位表达研究
序列,"%- !M6:957G()2# 预测信号肽,"- (
;2B<基因表达载体的构建
根据目的基因序列的酶切位点特征!以及植物
表达载体 UGhGU-N$"$ 的多克隆位点!分别设计添
加 5`(
)
和 S(+Z
)
酶切位点的正义引物!LGN.G(
"^$%I(..FEF.L..FLL.LEFEELEELE..EFEE(,I
"%I端添加 5`(
)
酶切位点 # 和 LGN.G(0"$ %I(
LL.FEEFLLE.EE.LL.LE.LE.EE.L(,I" %I端添
加S(+Z
)
酶切位点#!以及反义引物 LGN.G(^,$%I(
LL.FEE.FLL.LEFEELEELE..EFEE(,I" %I端添
加 S(+Z
)
酶切位点#和 LGN.G(0,$ %I(..FEF.(
L.FLLE.EE.LL.LE.LE.EE.L(,I"%I端添加 5`(
)
酶切位点#( 采用 F5e5B5公司的高保真酶 GT(
B>APDO进行扩GE0扩增( 产物经测序正确后采用双
酶切" 5`(
)
\S(+Z
)
#直接将目的基因的编码区
"不含终止密码子#连接到 UGhGU-N$"$ 的多克隆
位点!分别形成了由 E5Cm,%M 启动的目的基因与
:!0融合的植物表达载体!以及目的基因的正义反
义表达载体(
;2E<基因瞬时表达显微观察
将目的基因与 :!0基因融合的植物表达载体
质粒按照制备成金粉子弹!采用基因枪系统 G/M($
###\ZP"美国伯乐公司#!轰击"$ $## U2D26#洋葱
"72,4+)$G(#表皮( 样品 "%K培养过夜后!利用激
光共聚焦扫描显微镜".Y6>VPBOM$##!hP6DD!LPB45(
9T#激发光 )&& 94对转基因洋葱表皮细胞进行观
察!采集图像,"+- (
;2F<反义基因转化与检测
将目的基因的正义反义表达载体转入农杆菌
"7A#"5()&$#,4+&4+$F(),$@%#!经菌落 GE0鉴定正确
后!选取单克隆培养!采用叶盘法转化烟草!同时以
转空载 U-N$"$ 为对照( 经过预培养浸染共培养
选择培养"S59 %# 4:+HJ$#生根培养和移栽后!获
得转基因再生植株,"&- ( 分别提取转基因烟草和野
生烟草植株的基因组 /1.!利用引物 LGN.G(^)$%I(
.FLL.LEFEELEELE..EFEE(,I和 LGN.G(0)$%I(
FLLE.EE.LL.LE.LE.EE.L(,I进行检测(
;2G<转基因植株纤维细胞表型观察
分别取株高 ,# =4的转基因烟草和野生烟草植
株茎秆!取其中间部位"约 " =4#!将样品按轴向劈
成片!投入装有离析液",#g过氧化氢[冰醋酸]$[
$#的试管中!盖好试管塞后将试管放入烘箱中!控制
温度在 #K!保持 , @( 待样品发白后!取出样品!
用纯净水洗 + 次!期间每隔 " @ 换一次水!直至
样品没有酸味( 用玻璃棒轻轻将纤维捣成单根的纤
维!用吸管吸取适量的纤维置于载玻片上!气干!每
个样品设置 , 个重复,"*- ( 使用三目显微镜测量"型
号$H3NE./CH-"#!将气干的载玻片放在显微镜
下!每个样品分别记录 ,# 根纤维细胞的长度细胞
壁厚度!进行统计分析(
"!结果与分析
>=;<基因8?@*全长获得
利用引物 LGN.G(^$ 和 LGN.G(0$ 以绿竹叶片
的=/1.为模板进行GE0!产物克隆到 UL3C(F35DT
载体上!经测序获得一个 *,* AU的插入片段!与1E(
-N公共数据库进行比对分析发现该片段为糖基磷
脂酰肌醇锚定蛋白"LGN.G#基因保守区的部分序
列( 应用 0.E3引物进行扩增! ,I(0.E3和 %I(
0.E3产物测序分别得到 ,I端序列 %+) AU和 %I端序
列 &, AU( 经过序列拼接!得到一个全长为 $ ++"
AU的=/1.( 序列分析表明!该序列包括一个完整
的开放阅读框 $ ,% AU!%I非翻译区 $$+ AU!,I非翻
译区 "* AU和 ,# AU的 U>7T.尾巴( 将该基因命名
为->LGN.G"LP9-59e注册号$SC"+)"#(
>2><基因编码蛋白性质与结构预测分析
蛋白的结构决定其性质和功能( 序列分析表
明!S":0Q70编码一个 )%$ 55的蛋白!预测分子量和
等电点 UN分别为 )*2,+* e/5和 &2)*( 蛋白亲水
性\疏水性分析结果显示!该蛋白总体呈现亲水性(
->LGN.G包含 $ 个典型的 LGN.G家族保守区域
Eb-H")+ J"$$#和 $ 个EEmM结构域( 二级结构预
测显示!->LGN.G含有
#
螺旋延伸链
/
折叠和无
规则卷曲四种结构!其中无规则卷曲最长!覆盖了
%#2$$g的氨基酸残基""" 55#!其次为延伸链覆盖
了 $$, 55""%2#g#!
#
螺旋结构和
/
折叠分别覆盖
了 &) 55"$&2,g#和 %, 55"2"$g#( 跨膜结构分
析表明!->LGN.G从1(端开始具有 , 个跨膜螺旋结
构"& J") 55$& J$*$ 55),) J)%$ 55#( 信号肽预
测显示!在1(端有 $ 个导向内质网的信号肽"$ J",
55#"切割位置$.m.
&
f/#
,"-
*E(端具有LGN(59=@>B
信号特征序列!包括一个非结构化的连接区域")#*
J)",$/3ESCGGG/FfGfHG#一个LGN锚定位点
0
位点")")$ M#一个中等极性间隔区 ")"% J),"$
M.Gm.GH0#和一个疏水性氨基酸组成的尾巴"),,
J)%$$ MFN..L..M.HHHmHHHmG#
,,# J,$-
( ->LGN.G
*"
林!业!科!学!研!究 第 "& 卷
符合LGN锚定蛋白的特征,,"- ( 因此!推测 S":0Q70
基因编码了一个LGN锚定蛋白质!位于细胞膜上(
>2B<同源性比较与系统进化树分析
蛋白序列的同源性是蛋白之间保守性及其进化
关系的判断重要依据( -75DO结果表明!在 1E-N数
据库中与 ->LGN.G一致性为 +g以上的序列就有
$## 条!表明该蛋白是相对保守的!其中与绿竹的糖
基磷脂酰肌醇锚定蛋白 ->Eb-H".E.#)*+&#一致
性达 *&2)g!主要区别在于 E(端相差 $$ 55"图 $#(
与模式植物水稻 Eb-0."1Gs##$#%#,#拟南芥
Eb-0.(76ePUB>OP69 )"1Gs$*+#+#的一致性分别为
&*2&g和 +$2*g(
图 $!->LGN.G与->Eb-H蛋白序列E(端差异比较
基于不同物种 LGN.G同源蛋白序列构建系统
进化树!结果表明来自单子叶植物和双子叶植物的
LGN.G同源蛋白分别聚集成两个大的分支( 在单子
叶植物分支中!绿竹与短药野生稻聚集在一起!与大
麦和二穗短柄草组成的分支靠近!其次是谷子玉
米高粱等单子叶植物!而与同是单子叶植物的节节
麦的距离较远"图 "#(
每个分支上的数字表示 $### 次重复搜索的靴带值(
图 "!基于LGN.G同源蛋白序列的系统进化树分析
>2E<基因表达载体构建与检测
分别用引物 LGN.G(^" 和 LGN.G(0"LGN.G(^,
和LGN.G(0, 扩增!GE0产物经连接到 UL3C(F35DT
载体后测序结果显示!插入片段均为 $ ,+ AU!其中
LGN.G(^" 和LGN.G(0" 扩增序列依次包含了 5`(
)
酶切位点"FEF.L.#S":0Q70基因编码区"不包括
终止密码子#和 S(+Z
)
酶切位点"LL.FEE#!而
LGN.G(^, 和LGN.G(0, 扩增序列依次包含了 5`(
)
酶切位点S":0Q70基因反向编码区"不包括终止密
码子#和 S(+Z
)
酶切位点!与预期完全吻合( 用
5`(
)
\S(+Z
)
双酶分别消化含有目的片段的
UL3C(FP5DT质粒以及 UGhG和 U-N$"$ 表达载体质
粒!回收目的片段!分别将正义 S":0Q70连接到
UGhG和 U-N$"$ 载体的 5`(
)
和 S(+Z
)
酶切位点
之间!将反义S":0Q70连接到 U-N$"$ 载体的 5`(
)
和S(+Z
)
酶切位点之间!转化大肠杆菌感受态细
#,
第 % 期 董丽莉!等$绿竹->LGN.G基因克隆与异位表达研究
胞!提取质粒并酶切验证!结果与预期相符"图略#!
即获得了由 E5Cm,%M 启动子启动的 S"8?S;$$
:!0融合植物表达载体!以及 S":0Q70的正义反
义植物表达载体"图 ,#(
图 ,!S":0Q70的植物表达载体
>2F<瞬时表达分析
分别用 S":0Q70$$:!0融合表达载体和 UGhG
表达载体转化洋葱表皮细胞!经培养后显微镜观察
表明!在 )&& 94激发光下观察!转化S"8?S;$$:!0
的洋葱表皮细胞绿色荧光信号主要是分布在细胞膜
上"图 ) .! -! E#!而只转化 UGhG表达载体的洋葱
表皮细胞绿色荧光信号分布无特异性!主要分布于
细胞核和胞质溶胶中"图 ) /! 3! #^( 由此证明!
->Eb-H$$L^G融合蛋白位于洋葱表皮细胞中的细
胞膜上!初步证明 S":0Q70基因编码的蛋白为膜蛋
白!亚细胞定位于细胞膜上(
.! -! E$ 表达->Eb-H$$L^G融合蛋白的细胞* /! 3! $^ 表达
L^G融合蛋白的细胞* .! /$ 暗场*-! $^ 明场*E! $^合并模式(
图 )!->LGN.G$$L^G和 L^G在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位
>2G<转基因植株检测与表型分析
通过对转基因植株的 GE0检测!扩增产物电泳
结果表明!共获得 % 个转基因阳性植株!其中正义植
株 , 株!反义植株 " 株!转目的基因植株和质粒对照
均具有特异的目的条带!而水对照未转基因的烟草
植株转空载 U-N$"$ 植株没有目的条带!表明获得
了S":0Q70转基因植株"图 %#(
$! "$ 反义植株* ,! )! %$ 正义植株* $ 野生型*
+$ 转控载体对照* &$ 水对照* *$质粒对照
C$ /1.分子量标记(
图 %!转基因烟草GE0检测
表型分析发现!与野生型相比!转反义基因植株
细弱!而转正义基因植株粗壮( 纤维细胞壁观察表
明!转反义基因植株转正义基因植株与野生型烟草
的纤维细胞长度虽有差异!但差别不明显*而纤维细
胞厚度变化明显!转反义基因植株的纤维细胞厚度
略低于野生型!而转正义基因植株纤维细胞壁明显
变厚!比野生型增厚约 $ 倍左右"图 #(
$! "$ 反义植株* ,$ 野生型* )! %! $ 正义植株(
图 !转烟草纤维细胞厚度分析
$,
林!业!科!学!研!究 第 "& 卷
,!讨论
LGN.G是一类基于膜结合方式而定义的蛋白!
因此各类蛋白之间并无序列的保守性,,,- !在植物中
各类LGN.G是具有多基因成员的家族!同家族蛋白
成员之间的保守性较高( 如 Eb-0.同源蛋白在拟
南芥水稻玉米中分别有 $" 个$$ 个和 * 个,,)- !它
们都包含 $ 个典型的保守区域 Eb-H和 $ 个 EEmM
结构域( 本研究从绿竹中获得的 S":0Q70基因编
码的蛋白与其它植物中的 Eb-0.蛋白有着较高的
一致性!尤其是与其近缘种的一致性更高!如与水稻
同源蛋白的一致性最高达 &*2&g( 与同是来自绿
竹的->Eb-H的差异仅为 $2g!集中在于 E(端疏
水区域"图 $#!这可能意味着在插入内质网膜脂中
时它们的稳定性存在差异!而与其成熟蛋白影响不
大!但->LGN.G与->Eb-H是否存在功能上的差异!
尚需进一步验证(
研究表明!植物 LGN.G在细胞扩张细胞表面
连接维持细胞壁结构和次生细胞壁的生物合成中
均发挥着重要作用,$$! ,% J,- ( 对水稻突变体 5)- 的
研究表明!其茎秆叶片叶鞘变脆!机械强度下降的
表型是因为S8- 基因突变引起的,$%- ( 通过对 S":<
0Q70在洋葱表皮细胞中瞬时表达研究表明!该基因
表达的蛋白定位于细胞膜上!与预测的结果一致(
在烟草中过量表达 S":0Q70基因!转基因植株生长
健壮!纤维细胞壁有明显增厚!而转反义的 S":0Q70
基因植株长势较弱!纤维细胞壁厚度小于野生型!表
明该基因的功能与维管束纤维细胞壁的发育有关!
其原因可能是正义过量表达 S":0Q70产生的膜蛋
白!促进了细胞膜和细胞壁之间的物质交换!引起次
生细胞壁增厚!而反义表达则起抑制作用!影响了细
胞壁的次生生长!但 S":0Q70基因的功能尚需要通
过在绿竹中进行验证( 同时!S":0Q70基因的同家
族成员对竹子细胞壁发育的调控如何!对竹材理化
性质产生怎样的影响!都需要深入开展研究!才能通
过基因工程来实现人为对竹子目标材性的有效调
控!培育出符合生产实际需要的新品种(
参考文献!
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