全 文 ：林业科学研究摇 圆园员员袁圆源渊猿冤院猿圆员 猿圆远云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员员冤园猿鄄园猿圆员鄄园远
离体昆虫细胞对 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾的
敏感性测定与分析
张摇 欣袁 冯摇 颖鄢袁 丁伟峰袁 马摇 涛
渊中国林业科学研究院资源昆虫研究所曰国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室袁云南 昆明摇 远缘园圆圆源冤
摘要院采用来源于 猿 个目 员源 种昆虫的离体细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 粤糟晕孕灾 渊粤怎贼燥早则葬责澡葬 糟葬造蚤枣燥则灶蚤糟葬
灶怎糟造藻葬则 责燥造赠澡藻凿则燥泽蚤泽 增蚤则怎泽冤和家蚕核型多角体病毒 月皂晕孕灾 渊月燥皂遭赠曾 皂燥则蚤 灶怎糟造藻葬则 责燥造赠澡藻凿则燥泽蚤泽 增蚤则怎泽冤进行敏感性测定遥
试验结果表明院各昆虫细胞系对两种病毒的敏感性不同袁来源于双翅目及直翅目的细胞系均不能被这两种病毒感
染曰粤糟晕孕灾可侵染来源于鳞翅目的 杂枣圆员尧杂枣怨尧匀蚤早澡云蚤增藻尧砸陨砸陨鄄孕载 及 匀在袁宿主范围较广曰而 月皂晕孕灾 仅能侵染 月皂晕 细
胞袁宿主专一遥 粤糟晕孕灾对 杂枣怨 细胞的感染率最高袁接种病毒 员园 凿后感染率平均达 愿源郾 园豫 袁而 砸陨砸陨 原 孕载的 粤糟晕孕灾病
毒产量最高袁形成的多角体数目为 源猿郾 怨孕陨月泽 辕感染细胞遥 接种 月皂晕孕灾员园 凿后袁月皂晕的感染率为 苑圆郾 圆豫 袁形成的多角
体数目为 圆猿郾 员援 孕陨月泽 辕感染细胞遥
关键词院昆虫细胞系曰粤糟晕孕灾曰月皂晕孕灾曰感染
中图分类法院杂苑远猿 文章标识码院粤
收稿日期院 圆园员员鄄园员鄄员园
基金项目院 林业公益性行业科研专项渊编号院源 原 猿愿冤
作者简介院 张摇 欣渊员怨愿员要冤袁女袁云南彝良人袁助理研究员袁主要从事昆虫细胞工程相关研究援
鄢通讯作者援
杂怎则增藻赠 葬灶凿 粤灶葬造赠泽蚤泽 枣燥则 杂怎泽糟藻责贼蚤遭蚤造蚤贼赠 燥枣 蚤灶 增蚤贼则燥 悦怎造贼怎则藻凿 陨灶泽藻糟贼
悦藻造造 蕴蚤灶藻泽 贼燥 粤糟晕孕灾 葬灶凿 月皂晕孕灾
在匀粤晕郧 载蚤灶袁 云耘晕郧 再蚤灶早袁 阅陨晕郧 宰藻蚤鄄枣藻灶早袁 酝粤 栽葬燥
渊砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 砸藻泽燥怎则糟藻 陨灶泽藻糟贼泽袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠曰 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 悦怎造贼蚤增葬贼蚤灶早 葬灶凿 哉贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶
燥枣 砸藻泽燥怎则糟藻 陨灶泽藻糟贼泽 燥枣 杂贼葬贼藻 云燥则藻泽贼则赠 粤凿皂蚤灶蚤泽贼则葬贼蚤燥灶袁 运怎灶皂蚤灶早摇 远缘园圆圆源袁 再怎灶灶葬灶袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 云燥怎则贼藻藻灶 蚤灶泽藻糟贼 糟藻造造 造蚤灶藻泽 枣则燥皂 贼澡则藻藻 燥则凿藻则泽 憎藻则藻 怎泽藻凿 贼燥 遭藻 蚤灶枣藻糟贼藻凿 憎蚤贼澡 粤怎贼燥早则葬责澡葬 糟葬造蚤枣燥则灶蚤糟葬 灶怎糟造藻葬则 责燥造赠澡藻鄄
凿则燥泽蚤泽 增蚤则怎泽 渊粤糟晕孕灾冤 葬灶凿 月燥皂遭赠曾 皂燥则蚤 灶怎糟造藻葬则 责燥造赠澡藻凿则燥泽蚤泽 增蚤则怎泽 渊月皂晕孕灾冤援 栽澡藻 则藻泽怎造贼 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 泽怎泽糟藻责贼蚤遭蚤造蚤贼赠
枣燥则 贼憎燥 增蚤则怎泽藻泽 憎藻则藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬皂燥灶早 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 蚤灶泽藻糟贼 糟藻造造 造蚤灶藻泽援 栽澡藻 糟藻造造 造蚤灶藻泽 憎澡蚤糟澡 糟燥皂藻 枣则燥皂 阅蚤责贼藻则葬 葬灶凿 韵则贼澡燥责贼藻则葬 糟燥怎造凿
灶燥贼 遭藻 蚤灶枣藻糟贼藻凿 憎蚤贼澡 粤糟晕孕灾 葬灶凿 月皂晕孕灾援 栽澡藻 枣蚤增藻 糟藻造造 造蚤灶藻泽袁 杂枣圆员袁 杂枣怨袁 匀蚤早澡云蚤增藻袁 砸陨砸陨鄄孕载 葬灶凿 匀在袁 憎澡蚤糟澡 糟燥皂藻 枣则燥皂
蕴藻责蚤凿燥责贼藻则葬袁 糟燥怎造凿 遭藻 蚤灶枣藻糟贼藻凿 憎蚤贼澡 粤糟晕孕灾援 栽澡藻 月皂晕 糟藻造造 造蚤灶藻 糟燥怎造凿 遭藻 蚤灶枣藻糟贼藻凿 燥灶造赠 憎蚤贼澡 月皂晕孕灾援 栽澡藻 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣
粤糟晕孕灾 贼燥 杂枣怨 憎葬泽 贼澡藻 澡蚤早澡藻泽贼袁 则藻葬糟澡藻凿 愿源郾 园豫 葬枣贼藻则 员园 凿葬赠泽 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶援 砸陨砸陨鄄孕载 蚤灶枣藻糟贼藻凿 憎蚤贼澡 粤糟晕孕灾 糟燥怎造凿 责则燥凿怎糟藻 贼澡藻
澡蚤早澡藻泽贼 赠蚤藻造凿 燥枣 责燥造赠澡藻凿则葬造 蚤灶糟造怎泽蚤燥灶 遭燥凿蚤藻泽 憎澡蚤糟澡 则藻葬糟澡藻凿 源猿郾 怨 孕陨月泽 辕 糟藻造造 葬贼 员园 凿葬赠 责燥泽贼 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶援 栽澡藻 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣
月皂晕孕灾 贼燥 月皂晕 憎葬泽 苑圆郾 圆豫 葬枣贼藻则 员园 凿葬赠泽 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶袁 葬灶凿 贼澡藻 赠蚤藻造凿 燥枣 责燥造赠澡藻凿则葬造 蚤灶糟造怎泽蚤燥灶 遭燥凿蚤藻泽 憎葬泽 圆猿郾 员孕陨月泽 辕 糟藻造造援
运藻赠 憎燥则凿泽院 蚤灶泽藻糟贼 糟藻造造 造蚤灶藻泽曰粤糟晕孕灾曰月皂晕孕灾曰蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶
近年来袁离体昆虫细胞作为昆虫生理生化研究尧
生物反应器以及表达基因产物等的重要研究工具袁
受到越来越广泛及深入的研究和利用咱员暂 遥 特别是自
杂皂蚤贼澡等咱圆暂创建了昆虫杆状病毒表达系统以来袁昆虫
杆状病毒作为一种安全尧高效的表达载体被广泛应
用袁从而使昆虫细胞培养倍受青睐遥 苜蓿银纹夜蛾
核型多角体病毒渊粤怎贼燥早则葬责澡葬 糟葬造蚤枣燥则灶蚤糟葬 灶怎糟造藻葬则 责燥造赠鄄
澡藻凿则燥泽蚤泽 增蚤则怎泽袁 简称 粤糟晕孕灾冤和家蚕核型多角体病毒
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆源 卷
渊月燥皂遭赠曾 皂燥则蚤 灶怎糟造藻葬则 责燥造赠澡藻凿则燥泽蚤泽 增蚤则怎泽袁 简称 月皂晕鄄
孕灾冤表达系统是目前最主要的两类昆虫杆状病毒表
达系统咱猿暂 遥 利用杆状病毒要昆虫细胞表达系统除了
能工业化生产重组病毒杀虫剂之外袁还可以高效生
产许多外源蛋白咱源暂 遥 员怨愿猿 年 杂皂蚤贼澡等咱圆暂首次重组了
粤糟酝晕孕灾 袁成功地在草地贪夜蛾细胞 杂枣圆怨 中表达了
人的 茁 原干扰素遥 随后 酝葬藻凿葬 等咱缘暂又用 月皂晕孕灾 为
载体袁在家蚕幼虫体内高水平表达了人的 琢 原干扰
素遥 我国的科学家也利用 粤糟晕孕灾 表达了人可溶性
白细胞介素 原 远 受体咱远暂 尧天蚕抗菌肽咱苑暂等袁利用 月皂鄄
晕孕灾表达了人表皮因子信号肽融合蛋白咱愿暂 尧猪繁殖
与呼吸综合征病毒的蛋白咱怨暂等遥 到目前为止袁国内
外的科学工作者已利用昆虫细胞表达系统成功表达
了 猿园园 余种不同的蛋白质咱员园暂 遥 杆状病毒要昆虫细
胞离体培养系统的发展袁促进了病毒感染机制尧病毒
形态发生尧病毒与宿主的相互作用尧病毒毒株分离的
发展袁并为大规模培养昆虫细胞生产病毒奠定了
基础咱员员暂 遥
目前袁昆虫细胞对昆虫病毒的敏感性几乎成为了
昆虫细胞的生物学特性之一咱员圆 原员源暂 袁昆虫细胞对于侵
染病毒并不具有同一性袁一般均采用与昆虫细胞来源
虫种或亲缘关系较近的病毒来测试昆虫细胞的病毒
敏感性袁杆状病毒的宿主域一直是生物学比较感兴趣
的研究内容袁自然界中杆状病毒具有高度的宿主特异
性袁一种病毒往往只能感染亲缘关系较近的少数几种
昆虫咱员缘暂 遥 在利用昆虫细胞表达杆状病毒时袁大部分
细胞系只能被与来源于亲缘性较近的昆虫的杆状病
毒感染咱员远 原 员愿暂 袁有的昆虫细胞系甚至不能感染与来源
于其同源性昆虫的杆状病毒咱员怨暂 曰但也有昆虫细胞系
能感染来源于不同目昆虫的杆状病毒的报道咱圆园暂 遥 本
文利用目前应用最为广泛的杆状病毒 粤糟晕孕灾和 月皂鄄
晕孕灾对来源于鳞翅目尧双翅目及直翅目的 员源 种昆虫
细胞系进行侵染测定袁以期望找出高水平表达 粤糟晕孕灾
和 月皂晕孕灾病毒的细胞系袁为昆虫细胞与病毒的关系
研究袁以及昆虫细胞用于外源基因表达尧病毒扩增及
病毒杀虫剂等研究奠定科学基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
员郾 员郾 员摇 供试细胞系摇 本文采用来源于 猿 个目的 员源
种离体昆虫细胞系进行侵染测定袁其中袁鳞翅目细胞
为院杂枣圆员 渊来源于草地夜蛾 渊 杂责燥凿燥责贼藻则葬 枣则怎早蚤责藻则凿葬
杂皂蚤贼澡冤卵巢细胞冤袁杂枣怨渊来源于草地夜蛾卵巢细胞克
隆株冤袁匀蚤早澡云蚤增藻 渊来源于粉纹夜蛾 渊 栽则蚤糟澡燥责造怎泽蚤葬 灶蚤
匀俟遭灶藻则 冤卵巢细胞冤袁晕陨粤杂鄄酝葬月则鄄愿缘渊来源于甘蓝夜
蛾渊酝葬皂藻泽贼则葬 遭则葬泽泽蚤糟葬藻 蕴蚤灶灶葬藻怎泽冤缘 龄幼虫脂肪体细
胞冤袁粤藻渊来源于桉大蚕蛾渊粤灶贼澡藻则葬藻葬 藻怎糟葬造赠责贼蚤 杂糟燥贼贼冤
卵巢细胞冤袁云砸陨鄄杂责陨皂鄄员圆圆怨渊来源于桑斑血灯蛾渊杂责蚤鄄
造燥泽燥皂葬 蚤皂责葬则蚤造蚤泽 月怎贼造藻则冤 缘 龄幼虫脂肪体细胞冤袁匀在
渊来源于美洲棉铃虫渊匀藻造蚤燥贼澡蚤泽 扎藻葬 月燥凿凿蚤藻冤蛹卵巢细
胞冤袁晕陨粤杂鄄孕曾鄄缘愿 渊来源于柑橘凤蝶 渊 孕葬责蚤造蚤燥 曾怎贼澡怎泽
蕴蚤灶灶葬藻怎泽冤卵巢细胞冤袁砸陨砸陨鄄孕载渊来源于柑橘凤蝶新
孵幼虫细胞冤袁月皂晕渊来源于科家蚕 渊月燥皂遭赠曾 皂燥则蚤
蕴蚤灶灶葬藻怎泽冤胚胎细胞冤遥 双翅目细胞为院粤藻凿藻泽 葬造遭燥责蚤糟鄄
贼怎泽渊来源于白纹伊蚊渊粤藻凿藻泽 葬造遭燥责蚤糟贼怎泽藻 蕴蚤灶灶葬藻怎冤新孵
幼虫细胞冤袁杂蕴圆 渊来源于黑腹果蝇渊阅则燥泽燥责澡蚤造葬 皂藻造葬鄄
灶燥早葬泽贼藻则 杂皂蚤贼澡冤胚胎细胞冤袁栽砸粤鄄员苑员 渊来源于巨蚊
渊栽燥曾燥则澡赠灶糟澡蚤贼藻泽 葬皂遭燥蚤灶藻灶泽蚤泽 阅燥造藻泽糟澡葬造冤幼虫细胞冤遥
直翅目细胞为院砸陨砸陨鄄郧郧员渊来源于短翅鸣螽渊郧葬皂责鄄
泽燥糟造藻蚤泽 早则葬贼蚤燥泽葬 宰葬贼贼藻灶憎赠冤胚胎细胞冤遥
以上细胞均由中国林业科学研究院资源昆虫研
究所保存袁其中袁 砸陨砸陨鄄孕载 及 砸陨砸陨鄄郧郧员 为自建细
胞系遥
员郾 员郾 圆摇 供试病毒摇 粤糟晕孕灾渊苜蓿银纹夜蛾核型多角
体病毒渊粤怎贼燥早则葬责澡葬 糟葬造蚤枣燥则灶蚤糟葬 灶怎糟造藻葬则 责燥造赠澡藻凿则燥泽蚤泽 增蚤鄄
则怎泽冤冤尧月皂晕孕灾渊家蚕核型多角体病毒渊月燥皂遭赠曾 皂燥则蚤
灶怎糟造藻葬则 责燥造赠澡藻凿则燥泽蚤泽 增蚤则怎泽冤冤袁由江苏大学生命科学研
究院提供遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 病毒对细胞的感染摇 取对数生长期细胞袁调
配成 员 伊 员园远 个窑皂蕴 原员浓度袁接种到培养瓶中袁每瓶
员园 皂蕴遥 培养 圆 猿 澡 后袁弃去培养基袁留下贴壁细
胞遥 将制备好的病毒液接种于该细胞渊感染复数
酝韵陨 越 员园冤袁每瓶 员园园 怎蕴遥 每天观察细胞被感染的情
况袁在接种病毒 员园 凿 后袁以细胞中出现多角体为感
染袁计算细胞感染率袁重复 猿 次袁取其平均值遥 用冻
融法裂解病毒感染细胞袁充分释放多角体袁利用血球
计数板计算出多角体的浓度遥
员郾 圆郾 圆摇 病毒感染滴度渊栽悦陨阅缘园冤测定摇 以原浓度为
基本浓度单位袁将病毒液用细胞培养基以 员园 倍稀释
法稀释至 员园 原员尧员园 原圆尧员园 原 猿尧员园 原源尧员园 原缘尧员园 原远尧员园 原苑尧
员园 原愿等 愿 个浓度梯度袁加入同体积的 员 伊 员园远 个窑
皂蕴 原员浓度的细胞悬液混匀遥 取 怨远 孔板袁加入各级
病毒细胞混匀液 园郾 员 皂蕴袁每个浓度加 员员 个孔袁其余
愿 个孔加入用培养基稀释 员 倍的细胞液作对照遥 怨远
孔板用封口膜封好袁在 圆愿 益培养箱中静止培养 员园 凿
圆圆猿
第 猿 期 张摇 欣等院离体昆虫细胞对 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾的敏感性测定与分析
后袁在显微镜下观察袁以产生多角体为感染特征袁按
照 砸藻藻凿鄄酝怎藻灶糟澡 算法测定了各病毒感染细胞系的
渊半数组织培养感染剂量冤栽悦陨阅缘园值袁即院蕴早栽悦陨阅缘园 越高于 缘园豫感染率稀释度的对数 原渊高于 缘园豫的感染率 原 缘园豫 冤 辕 渊高于 缘园豫的感染率
原低于 缘园豫的感染率冤遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 离体昆虫细胞系对 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾的敏感性
摇 摇 接种病毒 缘 凿及 员园 凿后袁观察细胞对病毒的敏
感性遥 各昆虫细胞系对两种病毒的感染性不同渊表
员冤袁本文试验采用的 猿 种双翅目细胞系及 员 种直翅
目细胞系在接种 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾 员园 凿后细胞核内
无多角体形成袁细胞液不表现任何病理变化袁表明这
源 个细胞系对鳞翅目昆虫病毒 粤糟晕孕灾 和 月皂晕孕灾 均
不具有敏感性曰而 员园 种来源于鳞翅目昆虫细胞系
中袁猿 个夜蛾细胞系尧员 个柑桔凤蝶细胞系尧员 个棉铃
虫细胞系细胞核内产生多角体袁对 粤糟晕孕灾 表现出感
染特征袁家蚕离体细胞系被 月皂晕孕灾感染后细胞核内
产生多角体袁表现出感染特征遥 不同细胞对病毒的
敏感性具有差异袁接种病毒 缘 凿 后袁杂枣圆员尧杂枣怨尧匀蚤早澡鄄
云蚤增藻及 砸陨砸陨鄄孕载 细胞被 粤糟晕孕灾 侵染袁月皂晕孕灾 仅能
侵染 月皂晕 细胞曰接种病毒 员园 凿 后袁杂枣圆员尧杂枣怨尧匀蚤早澡鄄
云蚤增藻尧砸陨砸陨鄄孕载及少部分 匀在 细胞能被 粤糟晕孕灾 侵染袁
而 月皂晕孕灾仍然仅能侵染 月皂晕细胞遥 结果表明院粤糟鄄
晕孕灾的侵染宿主较广袁月皂晕孕灾 对 月皂晕 细胞侵染具
有专一性遥
表 员摇 员源 种昆虫细胞对 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾的敏感性
细胞系
感染结果
粤糟晕孕灾
缘 凿 员园 凿
月皂晕孕灾
缘 凿 员园 凿
杂枣圆员 垣 垣 垣 垣 原 原
杂枣怨 垣 垣 垣 垣 原 原
匀蚤早澡 云蚤增藻 垣 垣 垣 垣 原 原
晕陨粤杂鄄酝葬月则鄄愿缘 原 原 原 原
粤藻 原 原 原 原
云砸陨鄄杂责陨皂鄄员圆圆怨 原 原 原 原
匀在 原 垣 原 原
晕陨粤杂鄄孕曾鄄缘愿 原 原 原 原
砸陨砸陨鄄孕载 垣 垣 垣 垣 原 原
月皂晕 原 原 垣 垣 垣 垣
粤藻凿藻泽 葬造遭燥责蚤糟贼怎泽 原 原 原 原
杂蕴圆 原 原 原 原
栽砸粤 原员苑员 原 原 原 原
砸陨砸陨 原 郧郧员 原 原 原 原
摇 摇 注院 野 垣 垣 冶细胞感染特征明显袁大部分细胞被感染袁野 垣 冶表示
细胞感染特征不明显袁少量细胞被感染袁野 原 冶表示细胞不能被病毒
感染遥
圆郾 圆摇 感染离体昆虫细胞系的病毒产量及病毒感染
滴度渊栽悦陨阅缘园冤测定圆郾 圆郾 员摇 粤糟晕孕灾感染离体昆虫细胞系的敏感性及病毒
感染滴度渊栽悦陨阅缘园冤测定摇 接种病毒 员园 凿后袁杂枣圆员尧杂枣怨尧匀蚤早澡云蚤增藻尧匀在及 砸陨砸陨鄄孕载能被 粤糟晕孕灾侵染袁但感染效
应不同遥 杂枣圆员与 杂枣怨细胞对 粤糟晕孕灾感染情况相似袁均
较为敏感袁接种病毒 圆源 澡后即可观察到部分细胞开始
膨大袁细胞边缘变得不整齐和模糊袁核内产生了多角
体袁缘 凿后大部分细胞已经感染了 粤糟晕孕灾袁且多角体体
积较大袁员园 凿 时可见游离于培养基内的多角体渊图
员粤尧月冤遥 匀蚤早澡 云蚤增藻在接种病毒 圆源 澡变化不明显袁源愿 澡
后可观察到部分细胞聚集袁核膜膨大袁少数细胞内开
始有多角体颗粒出现袁缘 凿时细胞被感染现象明显袁员园
凿后多数细胞被感染袁有部分多角体释放于培养液中
渊图 员悦冤遥 匀在细胞对 粤糟晕孕灾较不敏感袁接种病毒 缘 凿
后未见细胞核内有多角体形成的现象袁但随着接种时
间的增长袁逐渐观察到有少数细胞内产生多角体袁接
种病毒 员园 凿后可观察到有小部分细胞核内形成多角
体渊图 员阅冤遥 砸陨砸陨鄄孕载细胞在接种病毒 苑圆 澡后即可观
察到部分细胞内产生了多角体袁部分细胞的细胞核膨
大明显袁单个细胞内的多角体数量较多袁细胞边缘也
变得不整齐袁部分细胞失去贴壁习性袁缘 凿后约 员 辕 猿 细
胞感染袁员园 凿时细胞内多角体数量增加袁但破裂释放
多角体的细胞很少渊图员耘冤遥 接种病毒 员园 凿后进行感
染率及产量的统计渊表 圆冤袁结果表明院缘 个细胞系对病
毒的感染性及病毒产量并不具统一性袁其中袁杂枣怨 细胞
对 粤糟晕孕灾的感染率最高袁为 愿源郾 园豫袁而每个感染细胞
形成的多角体数 砸陨砸陨鄄孕载 最高袁为 源猿郾 怨 个遥 采用病
毒 员园倍稀释法和 怨远 孔板培养袁细胞的感染情况见表
猿袁按照 砸藻藻凿鄄酝怎藻灶糟澡算法测定 粤糟晕孕灾感染 杂枣圆员等细
胞系的 栽悦陨阅缘园值渊表 源冤袁杂枣圆员与 杂枣怨的 栽悦陨阅缘园值最高袁
为 猿郾 苑缘 伊员园 原苑遥 实验结果表明院从离体昆虫细胞对病
毒等敏感性尧栽悦陨阅缘园值等可见袁粤糟晕孕灾 对与原宿主细
胞亲缘关系近的 杂枣圆员与 杂枣怨细胞侵染性更强遥
表 圆摇 感染昆虫细胞对 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾的
感染率及产量
细胞系 感染病毒
细胞感染
率 辕 豫
多角体浓度
渊 伊 员园远 孕陨月窑皂蕴 原员 冤 多角体产量渊孕陨月泽 辕感染细胞冤
杂枣圆员 粤糟晕孕灾 远愿郾 愿 员缘郾 猿 圆圆郾 圆
杂枣怨 粤糟晕孕灾 愿源郾 园 员园郾 苑 员圆郾 苑
匀蚤早澡 云蚤增藻 粤糟晕孕灾 缘员郾 源 愿郾 员 员缘郾 愿
匀在 粤糟晕孕灾 圆猿郾 园 员郾 怨 愿郾 圆
砸陨砸陨鄄孕载 粤糟晕孕灾 猿怨郾 愿 员苑郾 缘 源猿郾 怨
月皂晕 月皂晕孕灾 苑圆郾 圆 员远郾 苑 圆猿郾 员
猿圆猿
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆源 卷
粤援 粤糟晕孕灾 感染 杂枣圆员曰 月援 粤糟晕孕灾 感染 杂枣怨曰 悦援 粤糟晕孕灾 感染 匀蚤早澡 云蚤增藻曰 阅援 粤糟晕孕灾 感染 匀在曰
耘援 粤糟晕孕灾 感染 砸陨砸陨鄄孕载曰 云援 月皂晕孕灾感染 月皂晕
图 员摇 细胞系感染病毒后的形态变化渊箭头处为产生的多角体冤
圆郾 圆郾 圆摇 月皂晕孕灾感染离体昆虫细胞系的敏感性及病
毒感染滴度渊栽悦陨阅缘园冤测定摇 试验发现 月皂晕孕灾 仅能
感染 月皂晕细胞袁细胞接种病毒 圆源 澡 即可以见到细
胞核膨大袁源愿 澡可以见到部分细胞内产生了多角体袁
到 缘 凿后大部分细胞已经感染了 月皂晕孕灾袁员园 凿 时可
见游离于培养基内的多角体渊图 员云冤遥 此时对其进
行感染率及产量的统计袁月皂晕 对 月皂晕孕灾 的感染率
为 苑圆郾 圆豫 袁每个感染细胞形成的多角体数为 圆猿郾 员 个
渊表 圆冤遥 采用病毒 员园 倍稀释法和 怨远 孔板培养袁细
胞的感染情况见表 猿袁按照 砸藻藻凿鄄酝怎藻灶糟澡 算法测定
月皂晕孕灾感染 月皂晕细胞系的 栽悦陨阅缘园值为 猿郾 远猿 伊 员园 原苑渊表 源冤遥
源圆猿
第 猿 期 张摇 欣等院离体昆虫细胞对 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾的敏感性测定与分析
表 猿摇 感染昆虫细胞对不同浓度 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾的感染率 豫
细胞系 感染病毒 员园 原员 员园 原圆 员园 原 猿 员园 原源 员园 原 缘 员园 原 远 员园 原苑 员园 原 愿
杂枣圆员 粤糟晕孕灾 员园园 员园园 员园园 怨园郾 怨 愿员郾 愿 苑圆郾 苑 缘源郾 缘 源缘郾 缘
杂枣怨 粤糟晕孕灾 员园园 员园园 员园园 怨园郾 怨 愿员郾 愿 愿员郾 愿 缘源郾 缘 源缘郾 缘
匀蚤早澡 云蚤增藻 粤糟晕孕灾 员园园 远猿郾 远 缘源郾 缘 猿远郾 源 圆苑郾 猿 员愿郾 怨 怨 怨郾 园
匀在 粤糟晕孕灾 愿员郾 愿 苑圆郾 苑 缘源郾 缘 圆苑郾 猿 怨郾 园 怨郾 园 园郾 园 园郾 园
砸陨砸陨鄄孕载 粤糟晕孕灾 员园园 员园园 员园园 员园园 愿员郾 愿 远猿郾 远 猿远郾 猿 圆苑郾 圆
月皂晕 月皂晕孕灾 员园园 员园园 员园园 怨园郾 怨 愿员郾 愿 苑圆郾 苑 缘源郾 缘 猿远郾 猿
表 源摇 感染昆虫细胞对 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾的 栽悦陨阅缘园 测定
细胞系 感染病毒 栽悦陨阅缘园
杂枣圆员 粤糟晕孕灾 猿郾 苑缘 伊 员园 原苑
杂枣怨 粤糟晕孕灾 猿郾 苑缘 伊 员园 原苑
匀蚤早澡 云蚤增藻 粤糟晕孕灾 员郾 远猿 伊 员园 原苑
匀在 粤糟晕孕灾 员郾 缘怨 伊 员园 原苑
砸陨砸陨鄄孕载 粤糟晕孕灾 猿郾 圆缘 伊 员园 原苑
月皂晕 月皂晕孕灾 猿郾 远猿 伊 员园 原苑
猿摇 结论与讨论
本文研究表明院供试的 员源 种离体昆虫细胞系对
粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾的敏感性具有较大的差异袁其中袁
猿 种双翅目细胞系及 员 种直翅目细胞系均不能被两
种病毒侵染袁来源于鳞翅目的 缘 种细胞系能被 粤糟鄄
晕孕灾感染袁表明 粤糟晕孕灾 的侵染宿主较广袁但对与原
宿主细胞亲缘关系近的细胞侵染性更强曰而 月皂晕孕灾
仅能感染 月皂晕细胞袁对其余 员猿 种细胞均不能感染袁
具有宿主专一性遥 粤糟晕孕灾 和 月皂晕孕灾 对离体昆虫细
胞的侵染具有很大的差异性遥 据张传溪咱圆员暂报道袁可
感染 粤糟晕孕灾的离体昆虫细胞系有 员源 种袁但其中未
包含本试验中能感染的棉铃虫及柑橘凤蝶离体细胞
系遥 粤糟晕孕灾和 月皂晕孕灾对离体昆虫细胞的侵染能力
与其对活体昆虫的侵染能力相符袁粤糟晕孕灾 感染宿主
范围较广袁能感染 圆愿 种昆虫之多咱圆圆暂 袁 月皂晕孕灾 能感
染家蚕以外的昆虫的报道很少遥 粤糟晕孕灾 和 月皂晕孕灾
病毒基因组全长核苷酸序列的同源性约 苑园豫 袁而宿
主域却不同咱圆猿暂 袁研究发现杆状病毒对细胞的侵染性
是由杆状病毒侵染宿主的有关基因及蛋白质决定
的咱圆源暂 袁实验证明将两种杆状病毒杂交重组或相互替
换基因位点能扩大其宿主域袁如 酝燥则蚤 等咱圆缘暂将 月皂晕鄄
孕灾 阅晕粤 的 月葬皂匀陨 酶切片段与 粤糟晕孕灾阅晕粤 共转染
杂枣圆员细胞袁使之在细胞内进行重组袁获得的子代病毒
匀赠晕孕灾袁其宿主范围扩大袁能感染 月皂晕 细胞袁也能感
染 杂枣细胞遥 粤则早葬灶凿等咱圆远暂将 粤糟晕孕灾基因组在解旋酶
基因产物的 猿 个位点用相应的 月皂晕孕灾 特异性氨基
酸替代后袁其宿主范围可扩展到家蚕遥 说明杆状病
毒的宿主域是由其遗传特性决定的遥 其次袁不同目
离体昆虫细胞的遗传背景具有很大的差异袁除了其
本身具有的遗传特征外袁在长期的离体培养中遗传
物质也发生着改变袁如无限传代的鳞翅目昆虫细胞
系染色体异倍化严重咱圆苑暂 袁双翅目细胞系染色体倍性
不发生改变咱圆愿暂 袁而直翅目细胞系染色体只有少部分
发生改变遥 由此分析袁杆状病毒与昆虫细胞在遗传
背景上的相互选择袁造成了各细胞系对不同杆状病
毒的敏感差异性遥
在昆虫细胞对 粤糟晕孕灾敏感性的试验中袁各昆虫
细胞系的敏感性及敏感程度差异较大袁即使是来自
于同种昆虫的细胞系袁其敏感性差异也较明显遥 试
验中 晕陨粤杂鄄孕曾鄄缘愿 及 砸陨砸陨鄄孕载 为来源于柑橘凤蝶的
细胞细胞系袁但在对 粤糟晕孕灾的敏感性上却存在巨大
差异袁细胞系 砸陨砸陨鄄孕载 能被 粤糟晕孕灾 感染袁且单个细
胞的病毒产量最大袁而 晕陨粤杂鄄孕曾鄄缘愿 不能被 粤糟晕孕灾感
染遥 说明即使是来源于同一昆虫的不同细胞系袁对
同一病毒的敏感性也会有很大的差异遥 产生差异的
原因除了与病毒的特异性有关外袁还可能与细胞的
收受性尧细胞生长的不同步性和细胞种群的不均一
有关咱圆怨暂 曰也可能与离体细胞的来源有关遥 试验中
晕陨粤杂鄄孕曾鄄缘愿 及 砸陨砸陨鄄孕载分别来源于柑橘凤蝶的卵巢
及新孵幼虫组织袁而核多角体病毒对不同昆虫的侵
染部位是不同的咱猿园暂 袁所以病毒对不同组织来源的同
种昆虫细胞系的侵染能力也有所不同遥 试验中 砸陨鄄
砸陨鄄孕载 细胞单个细胞的病毒产量最高袁但其感染率
并不高袁可能是由于 砸陨砸陨鄄孕载是新建细胞系袁病毒的
感染率也与细胞的收受性尧细胞生长的不同步性和
细胞种群的不均一差异较大有关袁但具体原因还有
待于进一步的研究遥
本文结果表明院就宿主范围而言袁粤糟晕孕灾 感染
的宿主范围更广袁对多种昆虫细胞均具有感染性袁而
月皂晕孕灾的宿主专一袁只能对家蚕细胞具有感染力遥
就感染率及病毒产量而言袁月皂晕 细胞对 月皂晕孕灾 的
感染率及病毒产量较高曰感染 粤糟晕孕灾的各细胞系感
染率及病毒产量差异较大袁多数细胞感染率不高袁在
今后可通过改变实验条件来提高病毒的感染率与产
缘圆猿
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆源 卷
量遥 就感染细胞而言袁杂枣圆员尧杂枣怨尧匀蚤早澡云蚤增藻尧砸陨砸陨鄄孕载
及 匀在细胞易于培养尧生长旺盛袁而 月皂晕 细胞生长
及继代较慢袁表达病毒所需时间较长咱圆圆暂 遥 在细胞系
的利用研究中袁可针对不同的研究目的合理选择较
为合适的杆状病毒表达系统及离体昆虫细胞系遥
参考文献院
咱员暂 酝葬则葬皂燥则燥泽糟澡 运袁罗曦霞援昆虫细胞系的发展院历史回顾咱 允暂 援 武汉
大学学报袁员怨怨圆渊源冤院员员缘 原 员圆园
咱圆暂 杂皂蚤贼澡 郧 耘袁杂怎皂皂藻则泽 酝 阅援 孕则燥凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 澡怎皂葬灶 遭藻贼葬 蚤灶贼藻则枣藻则燥灶 蚤灶 蚤灶鄄
泽藻糟贼 糟藻造造泽 蚤灶枣藻糟贼藻凿 憎蚤贼澡 葬 遭葬糟怎造燥增蚤则怎泽 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 增藻糟贼燥则咱允暂 援 酝燥造 悦藻造造
月蚤燥造袁员怨愿猿袁 猿院圆员缘远 原 圆员远缘
咱猿暂 朱摇 江袁吴祥甫援 昆虫杆状病毒表达系统研究进展及其应用展
望咱允暂 援蚕业科学袁圆园园猿袁圆怨 渊圆冤院 员员源 原 员员怨
咱源暂 洪华珠袁彭建新援 一株高水平表达重组蛋白昆虫细胞系的建立
咱允暂 援昆虫学报袁圆园园员袁源源 渊猿冤院 圆苑远 原 圆苑怨
咱缘 暂 酝葬藻凿葬 杂袁 运葬憎葬蚤 栽袁 韵遭蚤灶葬贼葬 酝袁 藻贼 葬造援 孕则燥凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 澡怎皂葬灶
圆圆蚤灶贼藻则枣藻则燥灶 蚤灶 泽蚤造噪憎燥则皂 怎泽蚤灶早 葬 遭葬糟怎造燥增蚤则怎泽 增藻糟贼燥则 咱 允暂 援 晕葬贼怎则藻袁
员怨愿缘袁 猿员缘院 缘怨圆 原 缘怨源
咱远暂 常炳圣袁李摇 元援人可溶性白细胞介素鄄远 受体基因在昆虫细胞内
的克隆与表达咱允暂 援 中国医学科学院学报袁圆园园员袁圆猿 渊员冤院 猿远 原 猿苑
咱苑暂 黄亚东袁郑摇 青袁李摇 校袁等援天蚕抗菌肽 粤阅基因在 粤糟晕孕灾载体
系统中的表达研究 咱 允暂 援 中国抗生素杂志袁圆园园猿袁圆愿 渊缘冤院 猿园源
原 猿园苑
咱愿暂 吕正兵袁张文平袁于摇 威袁等援家蚕表达人表皮生长因子 早责远苑 信
号肽融合蛋白及生物学特性研究咱 允暂 援 生物工程学报袁圆园园愿袁圆源
渊员冤院 员员员 原 员员远
咱怨暂 王摇 丹袁月匀粤杂运粤砸 砸燥赠袁李兴华袁等援 利用杆状病毒 月葬糟鄄贼燥鄄月葬糟
系统在家蚕表达猪繁殖与呼吸综合征病毒的 耘 蛋白和 酝 蛋白
咱允暂 援蚕业科学袁圆园员园袁猿远渊缘冤院 愿缘缘 原 愿缘怨
咱员园暂 宋德伟袁马摇 艳袁冯摇 颖袁等援 昆虫细胞工程研究进展咱允暂 援 林业
科学研究袁圆园园源 袁员苑渊员冤 院员员远 原 员圆源
咱员员暂 胡远扬援 昆虫病毒研究的回顾与展望咱 允暂 援 中国病毒学袁圆园园源袁
员怨 渊猿冤院 猿园猿 原 猿园愿
咱员圆暂 再藻澡 杂 悦袁 蕴藻藻 杂 栽袁 宰怎 悦 再袁 藻贼 葬造援 粤 糟藻造造 造蚤灶藻 渊晕栽哉鄄酝灾冤 藻泽贼葬遭鄄
造蚤泽澡藻凿 枣则燥皂 酝葬则怎糟葬 增蚤贼则葬贼葬 渊蕴藻责蚤凿燥责贼藻则葬院 孕赠则葬造蚤凿葬藻冤院 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬鄄
贼蚤燥灶袁 增蚤则葬造 泽怎泽糟藻责贼蚤遭蚤造蚤贼赠袁 葬灶凿 责燥造赠澡藻凿则葬 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶咱允暂 援 允 陨灶增藻则贼藻遭则
孕葬贼澡燥造袁圆园园苑袁 怨远院员猿愿 原 员源远
咱员猿暂 在澡葬灶早 匀袁 在澡葬灶早 再 粤袁 匝蚤灶 匝袁 藻贼 葬造援 晕藻憎 糟藻造造 造蚤灶藻泽 枣则燥皂 造葬则增葬造 枣葬贼
遭燥凿蚤藻泽 燥枣 杂责燥凿燥责贼藻则葬 藻曾蚤早怎葬院 悦澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 葬灶凿 泽怎泽糟藻责贼蚤遭蚤造蚤贼赠 贼燥
遭葬糟怎造燥增蚤则怎泽藻泽渊 蕴藻责蚤凿燥责贼藻则葬院 晕燥糟贼怎蚤凿葬藻冤 咱 允暂 援 允 陨灶增藻则贼藻遭则 孕葬贼澡燥造袁
圆园园远袁 怨员院 怨 原 员圆
咱员源暂 孕葬灶贼 哉袁 杂怎凿藻藻责 粤 月袁 粤贼澡葬憎葬造藻 杂 杂袁 藻贼 葬造援 月葬糟怎造燥增蚤则怎泽 泽贼怎凿蚤藻泽 蚤灶
灶藻憎 蚤灶凿蚤早藻灶燥怎泽 造藻责蚤凿燥责贼藻则葬灶 糟藻造造 造蚤灶藻泽 咱 允暂 援 陨灶凿蚤葬灶 允 耘曾责贼 月蚤燥造袁
圆园园圆袁 源园 渊员冤院远猿 原 远愿
咱员缘暂 刘丽华袁沈卫德援 几种核型多角体病毒感染性的检测咱 允暂 援东北
林业大学学报袁圆园园苑袁猿缘 渊员园冤院 苑员 原 苑猿
咱员远暂 宰葬灶早 悦 匀袁 悦澡燥怎 悦 酝袁 蕴蚤怎 匀 悦袁 藻贼 葬造援 悦燥灶贼蚤灶怎燥怎泽 糟藻造造 造蚤灶藻 枣则燥皂
责怎责葬造 燥增葬则赠 燥枣 孕藻则蚤灶葬 灶怎凿葬 渊 蕴藻责蚤凿燥责贼藻则葬院 蕴赠皂葬灶贼则蚤蚤凿葬藻冤 贼澡葬贼 蚤泽
责藻则皂蚤泽泽蚤增藻 贼燥 灶怎糟造藻葬则 责燥造赠澡藻凿则燥泽蚤泽 增蚤则怎泽 枣则燥皂 孕援 灶怎凿葬 咱允暂 援 允 陨灶增藻则鄄
贼藻遭则袁 孕葬贼澡燥造袁 员怨怨远袁远苑院员怨怨 原 圆园源
咱员苑暂 杂澡蚤澡 悦 允袁 蕴蚤灶 砸 宰袁 宰葬灶早 悦 匀援 耘泽贼葬遭造蚤泽澡皂藻灶贼 燥枣 葬 糟藻造造 造蚤灶藻 枣则燥皂
杂责燥凿燥责贼藻则葬 造蚤贼怎则葬 渊蕴藻责蚤凿燥责贼藻则葬院 晕燥糟贼怎蚤凿葬藻冤 葬灶凿 则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 杂援
造蚤贼怎则葬 灶怎糟造藻葬则 责燥造赠澡藻凿则燥泽蚤泽增蚤则怎泽 蚤灶 增蚤贼则燥 咱 允暂 援 允 陨灶增藻则贼藻遭则 孕葬贼澡燥造袁
员怨怨苑袁远怨院 员 原 远
咱员愿暂 月燥赠葬责葬造造藻 杂袁 孕葬造 晕袁 酝蚤造造藻则 宰 粤 袁 藻贼 葬造援 粤 早造葬泽泽赠鄄憎蚤灶早藻凿 泽澡葬则责鄄
泽澡燥燥贼藻则 糟藻造造 造蚤灶藻 泽怎责责燥则贼泽 则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 砸澡燥责葬造燥泽蚤责澡怎皂 责葬凿蚤 增蚤则怎泽
渊阅蚤糟蚤泽贼则燥增蚤则蚤凿葬藻冤 咱允暂 援 允 陨灶增藻则贼藻遭则 孕葬贼澡燥造袁圆园园苑袁远苑院员怨怨 原 圆园源
咱员怨暂 悦澡藻灶 再 砸袁 杂燥造贼藻则 蕴 云袁 悦澡蚤藻灶 栽 再袁 藻贼 葬造援 悦澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 葬 灶藻憎
蚤灶泽藻糟贼 糟藻造造 造蚤灶藻 渊晕栽哉鄄再月冤 凿藻则蚤增藻凿 枣则燥皂 贼澡藻 糟燥皂皂燥灶 早则葬泽泽 赠藻造造燥憎
遭怎贼贼藻则枣造赠袁 耘怎则藻皂葬 澡藻糟葬遭藻 渊蕴蚤灶灶葬藻怎泽冤 渊孕蚤藻则蚤凿葬藻院 蕴藻责蚤凿燥责贼藻则葬冤 葬灶凿
蚤贼泽 泽怎泽糟藻责贼蚤遭蚤造蚤贼赠 贼燥 皂蚤糟则燥泽责燥则蚤凿蚤葬 咱 允暂 援 允 陨灶增藻则贼藻遭则 孕葬贼澡燥造袁圆园园怨袁
员园圆院圆缘远 原 圆远圆
咱圆园暂 蕴藻增蚤灶 阅 月袁 匀怎葬灶早 允援 杂责燥凿燥责贼藻则葬 造蚤贼贼燥则葬造蚤泽 栽赠责藻 月 晕怎糟造藻燥责燥造赠澡藻凿则燥鄄
增蚤则怎泽 陨灶枣藻糟贼蚤燥灶 燥枣 葬 郧则葬泽泽澡燥责责藻则 悦藻造造 蕴蚤灶藻 咱允暂 援 允 陨灶增藻则贼藻遭则 孕葬贼澡燥造袁
员怨怨怨袁苑源曰员愿源 原 员怨圆
咱圆员暂 张传溪援 昆虫杆状病毒 责澡尧责噪 基因分析和人 耘孕韵 基因在杆状
病毒 原昆虫系统中的表达咱酝暂援北京院高等教育出版社袁圆园园员
咱圆圆暂 吴小锋袁曹翠平袁许雅香袁 等援 月皂晕孕灾 和 粤糟晕孕灾 扩大寄主域杂
交重组病毒表达载体的构建和改进咱 允暂 援 中国科学 悦 辑院生命
科学袁 圆园园源袁 猿源 渊圆冤院 员缘远 原 员远源
咱圆猿暂 王文兵袁马双双袁李摇 兵袁 等援 利用双色荧光观察分析重组家蚕
杆状病毒对昆虫细胞及蚕体组织的感染咱允暂 援 蚕业科学袁圆园园怨袁
猿缘 渊猿冤 院 远猿源 原 远猿苑
咱圆源暂 李充壁袁庞摇 义援 杆状病毒侵染的分子基础咱 允暂 援 微生物学通
报袁圆园园员袁圆愿渊缘冤院愿园 原 愿源
咱圆缘暂 酝燥则蚤 匀袁 晕葬早葬扎葬憎葬 匀袁 杂澡蚤葬蚤 晕袁 藻贼 葬造援 云燥则藻蚤早灶 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 遭赠 葬
遭葬糟怎造燥增蚤则怎泽 增藻糟贼燥则 憎蚤贼澡 葬灶 藻曾责葬灶凿藻凿 遭燥泽贼 则葬则早藻 咱 允暂 援 允 郧藻灶 灾蚤则燥造袁
员怨怨圆袁 苑猿院员愿苑苑 原 员愿愿园
咱圆远暂 粤则早葬怎凿 韵袁 悦则燥蚤扎蚤藻则 蕴袁 蕴燥责藻扎鄄云藻则遭藻则 酝袁 藻贼 葬造援 栽憎燥 噪藻赠 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽
蚤灶 贼澡藻 澡燥泽贼鄄则葬灶早藻 泽责藻糟蚤枣蚤糟蚤贼赠 凿燥皂葬蚤灶 燥枣 贼澡藻 责员源猿 早藻灶藻 燥枣 粤怎贼燥早则葬责澡葬
糟葬造蚤枣燥则灶蚤糟葬 灶怎糟造藻燥责燥造赠澡藻凿则燥增蚤则怎泽 葬则藻 则藻择怎蚤则藻凿 贼燥 噪蚤造造 月燥皂遭赠曾 皂燥则蚤
造葬则增葬藻咱允暂 援 允 郧藻灶 灾蚤则燥造袁 员怨怨愿袁 苑怨 渊源冤院 怨猿员 原 怨猿缘
咱圆苑暂 张摇 欣袁冯摇 颖袁丁伟峰袁等援 七种鳞翅目昆虫细胞系染色体分
析咱允暂 援 林业科学研究袁 圆园园愿袁圆员渊源冤院源怨猿 原 源怨怨
咱圆愿暂 张摇 欣袁冯摇 颖袁马摇 涛袁等援 五种双翅目昆虫细胞系染色体分
析咱允暂 援 林业科学研究袁圆园园苑袁圆园渊源冤院缘缘员 原 缘缘缘
咱圆怨暂 于洪春袁王晓云袁李国勋援四株昆虫细胞系对粘虫核型多角体病
毒敏感性的测定咱 允暂 援 东北农业大学学报袁圆园园园袁猿员 渊源冤院猿源圆
原 猿源缘
咱猿园暂 包建中袁古德祥援 中国生物防治 咱酝暂援 太原院山西科学出版
社袁员怨怨愿
远圆猿