全 文 ：


林 业 科 学 !" 卷 #
# # # #
图 $# 基于 !"# 基因编码蛋白的系统进化树分析
%&’( $# )*+,-’./.0&1 02.. 3/3,+4&4 -5 62-0.&/4 ./1-7.7 8+ !"# ’./.4
每个分支上的数字表示 9 ::: 次重复搜索的靴带值。
;<=8.24 -/ =3>-2 823/1*.4 &/7&130. 8--040236 .40&=30.4 5-2 9 ::: 2.6,&130. 3/3,+4.4(
9$? 个，占总数的 $$@ ?A；碱性氨基酸、酸性氨基酸分
别有 !B 个和 CD 个，各占总数的 D@ DA和 "@ DA。经过
EFGHI 和 FJIK%ELG; 软件分析，M-ENI$ 氨基酸序
列包含 9 个保守的结构域（!? O ??$）糖运转子，第 9P9
O 9P! 位为 ; O糖基化位点；还包括蛋白激酶 L 的磷
酸化位点 B 个（CC O C?，9:9 O 9:C，9:? O 9:P，$$$ O
$$!，$?? O $?P，C9P O C9B，!:$ O !:!，!$D O !C:，!!" O
!!D）、酪氨酸激酶!磷酸化位点 C 个（9$ O 9?，$B O C$，
!!9 O !!!）、; O肉豆蔻酰化位点 9" 个（$C O $D，C: O
C?，?C O ?D，PC O PD，$9D O $$C，$C" O $!9，$P: O $P?，
C:? O C9:，CP$ O CPP，CPB O CD!，!!$ O !!P，!?B O !"!，
!D9 O !D"，?9" O ?$9，?$$ O ?$P，?!! O ?!B）、氨基化位
点 C 个（ CC O C"，9:D O 999，9C? O 9CD）、1GF)Q和
1RF)Q7.6./7./0 磷酸化位点 9 个（CBB O !:$），符合蔗
糖运转子特征（S.=-&/. $% &’(，9BDB）。
图 C# )*!"#$ 编码的蛋白跨膜结构域预测
%&’( C# I23/4=.=823/. 7-=3&/4 62.7&10&-/ -5 0*. 62-0.&/ ./1-7.7
8+ )*!"#$
应用在线软件对 M-ENI$ 氨基酸序列进行拓扑
学分析，结果显示 M-ENI$ 的二级结构中具有明显
的 " O螺旋结构和 # O折叠结构。TFFQIF 软件分
析预测，M-ENI$ 包含 9: 个跨膜结构域（图 C），跨膜
部分序列分别为 !9 O !B、D: O BD、99! O 9C$、$P$ O
$B:、C$C O C!:、CP" O CB!、!:P O !$P、!!D O !""、!DC
O ?:C 和 ?$: O ?CD（图 9），属于膜蛋白。
!" #$ !"#$%! 基因在不同部位的表达
以绿竹 +,%-. 基因作内标（李雪平等，$::P），调
整 1U;G 用量和循环数，使内标基因的表达丰度一
致。以调整后的 1U;G 模板量进行 )*!"#$ 基因的
扩增。结果（图 !）表明，)*!"#$ 基因在叶片、叶鞘
和根中均有表达，其中在叶片和叶鞘中的表达丰度
较高且比较接近，在根中有微弱表达，而幼茎中没有
检测到表达。
图 !# )*!"#$ 基因的 HIQ)LH 分析
%&’( !# HIQ)LH 3/3,+4&4 -5 )*!"#$ ’./.
9：叶片 S.35；$：叶鞘 E*.30*；
C：幼茎 E0.=；!：根 H--0(
!" %$ &’()*!+ ,-. 融合蛋白表达载体的构建
ENI%9和 ENIH9 的 )LH 产物测序结果表明：
插入片段为 9 "D$ 86，包含了 )*!"#$ 基因编码区
（9 ""D 86）添加的酶切位点 /0& $（ ILIGRG）、
)&1T$（RRGILL）以及 $ 个保护碱基 GG。序列分
析表明在 )*!"#$ 基因内部有 9 个 /2*$位点（第 !
位），选用 /0&$ V )&1T$、/2*$ V )&1T$对构建
的载体质粒进行酶切指纹分析（图略）。结果显示
与预期的完全一致，证明所构建的载体是正确的，即
获得了由 C?E 启动，包含 )*!"#$ W 345 融合的植物
表达载体（图 ?）。
!" /$ 亚细胞定位观察
取烟草抗性悬浮细胞进行显微镜观察，结果表
明，在 !DD /= 激发光下观察，绿色荧光信号主要分
D!

林 业 科 学 !" 卷 #
技，$"（%）：&$’ ( &$)*
黄 # 勇 * %++$* 绿竹种源的光合特性研究 * 福建林业科技，$+（$）：
’+ ( ’$，,%*
李雪平，高志民，彭镇华，等 * %++,- 绿竹咖啡酸 ( . ( 甲基转移酶
基因（!"#$）的克隆及相关分析 * 林业科学研究，（ ’）：,%%
( ,%’*
马小龙，刘 颖 慧，袁 祖 丽，等 * %++)- 玉 米 蔗 糖 转 运 蛋 白 基 因
%&’()" /0123 的克隆与逆境条件下的表达 * 作物学报，$’
（4）：&!&+ ( &!&,*
戚继艳，阳江华，唐朝荣 * %++,* 植物蔗糖转运蛋白的基因与功能 *
植物学通报，%!（!）：’$% ( ’!$*
胥 # 婷，任 # 蔷，李关荣 * %++"- 水稻蔗糖转运基因家族研究进展 *
生命科学研究，&+（!）：$, ( &%*
张立军，李晓宇，阮燕晔 * %++4- 双子叶与单子叶植物蔗糖转运蛋
白的研究进展 * 沈阳农业大学学报，（$）：%’) ( %"!*
郑炳松，金爱武，程晓建，等 * %++&- 雷竹光合特性的研究 * 福建林学
院学报，%&（!）：$’) ( $"%*
2567 1，87953: ;，;<6<=<3=7 >，*+ ,-. &)))- ?5@:/A@<9 /@5B7BC :EF9:3375B &,/0 L*）* M@2567 1，O=7IH:@D M，85:9:B P，*+ ,-. %++%- ;=9:: 3A/953: I9C:B:3 <9: :EF9:33:D 7B I=: D:Q:@5F7BC C9<7B 5H =:EM@S<96:9 L，TA=B N，O:73: 2，*+ ,-. %+++- >U;%，< FAI3:B359 7B 37:Q: :@:J:BI3* M@N=:B V=7@7BC，WA W7，L7A L7B<，*+ ,-* %++,- X35@/:@@3* M95C9:33 7B 1/7:B/:，&,（%）：&’" ( &"%*
N=75A ; [，SA3= 0 \* &))4- >A/953: 73 < 37CB<@ J5@:/A@: 7B <337J7@F<9I7I75B7BC* M95/ 1/7，)’：!,4! ( !,44*
N=7A O:BY7B，L7B N=75A=5BC，N=/=<93GBI=<3: H95J C9::B Y&,+：’$ ( "$*
^<5 V=7J7B，L7 _A:F7BC，L7 LAY7B，*+ ,-. %++"- 2B :HH:/I7Q: J:I=5D H59
I5I<@ \12 735@/7:B/: ;:/=B5@5CG，’（$）：’% ( ’!*
^5IIR<@D [ \，T9G3I=: 7B F@I9/7，),：&$),) ( &$)4!- *
L<@5BD: >，8:@@J/<997:93：I9L<@5BD: >，O7FH 0，P95JJ:9 O S* %++!- ;959C\:Q M@L:J57B: \* %+++- >A/953: I93I9A/IA9:* SS2ZS75J:JY9L:J57B: \，>:9C: 0，^<@@:I .，*+ ,-. &)4)* ;=: 3A/953: /<997:9 5H I=:
F@<3J< J:JY9S75F=G3 2:I<，),4："’ ( ,&*
\7:3J:7:9 [ O，O7@@J7IK:9 L， P95JJ:9 O S* &))%- X35@/=<9:EF9:3375B 7B G:<3I* ‘?S. [，&&：!,+’ ( !,&$*
\7:3J:7:9 [ O，O7@@J7IK:9 L，P95JJ:9 O S* &))!- ‘Q7D:B/: H59 :33:BI7<@ 95@: 5H I=: 3A/953: I9<337J7@>J::6:B3 >* %+++- >AC<9Z7BDA/:D 37CB<@ I9\:Q M@（责任编辑 # 徐 # 红）
+’