全 文 ：第 wv卷 第 z期
u s s z年 z 月
林 业 科 学
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∂²¯1wv o‘²1z
∏¯ qou s s z
不同提取条件对核桃叶中抗病毒物质活性的影响
翟梅枝 贾彩霞 景炳年 刘朝斌
k西北农林科技大学林学院 杨凌 ztutssl
关键词 } 核桃 ~烟草花叶病毒 ~提取方法
中图分类号 }≥zyv1tu 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kusszlsz p stw{ p sw
收稿日期 }ussy p st p ts ∀
基金项目 }国家自然科学基金kvsxztw|wl o中国博士后基金kusswsvxy{|l o陕西省科技攻关项目kusswŽsv p Švl o西北农林科技大学优秀人
才专项基金ksw• ssxl ∀
Ινφλυενχε οφ Εξτραχτ Χονδιτιον ον Αχτιϖιτψ οφ Αντιϖιραλ Συβστανχεσφροµ Ωαλνυτ Λεαϖεσ
«¤¬ ¬¨½«¬ ¬¤ ≤¤¬¬¬¤ ¬±ª…¬±ª±¬¤± ¬∏≤«¤²¥¬±
kΧολλεγε οφ Φορεστρψo Νορτηωεστ Α & Φ Υνιϖερσιτψ Ψανγλινγ ztutssl
Αβστραχτ } ׫¨ ¤±·¬√¬µ¤¯ ¶∏¥¶·¤±¦¨¶²©º¤¯±∏·¯ ¤¨√¨ ¶º¨ µ¨ ¬¨·µ¤¦·¨§¥¼§¬©©¨µ¨±·¶²¯√¨ ±·¶¤±§°¨ ·«²§¶o¤±§¬·¶¤±·¬√¬µ¤¯ ¤¦·¬√¬·¬¨¶
º¨ µ¨ §¨·¨µ°¬±¨ §q ׫¨ µ¨¶∏¯·¶¶«²º¨ §·«¤·¤±·¬√¬µ¤¯ ¶∏¥¶·¤±¦¨ ¤¦·¬√¬·¼ ¬¶§¬¶¶¬°¬¯¤µ¥¤¶¨§²± ¬¨·µ¤¦·¶©µ²° º¤¯±∏·¯ ¤¨√¨ ¶ º¬·«
§¬©©¨µ¨±·¶²¯√¨ ±·¤±§ °¨ ·«²§¶qŒ±«¬¥¬·¬²±µ¤·¨ ²± א∂ ²©·«¨ ¬¨·µ¤¦·º¬·«|x h k∂Π∂l ·¨«¤±²¯ ¬¶·«¨ ¥¨¶·otss h ~ ’³·¬°∏°
¦²±§¬·¬²± ²©·«¨ ¦²¯§¶²¤®¤µ¨ }|x h k∂Π∂l ·¨«¤±²¯ ¬¶∏¶¨§¤¶¶²¯√¨ ±·o·«¨ µ¤·¬²²© °¤·¨µ¬¤¯ ·²¶²¯√¨ ±·¬¶usΠtss ktΒtsl o¶²¤®
·¬°¨ ¬¶t{ «q׫¨ ¬±«¬¥¬·¬²±µ¤·¨ ²©·«¨ ¬¨·µ¤¦··² א∂ ¬±©¨¦·¬±ª Νιχοτιανα γλυτινοσᬶtss h ∏±§¨µ²³·¬°∏° ¦²±§¬·¬²±q
Κεψ ωορδσ} º¤¯±∏·~·²¥¤¦¦² °²¶¦¤¬¦√¬µ∏¶kא∂l ~ ¬¨·µ¤¦·¨§ °¨ ·«²§
植物病毒病给农业生产造成极大的损失 ∀据统计 o全世界每年仅烟草花叶病毒k·²¥¤¦¦² °²¶¦¤¬¦√¬µ∏¶o
א ∂l造成的损失就达 t亿美元以上k吴云峰 ot||xl ∀植物是天然药物的宝库 o国内外学者对植物中抗病毒
活性物质进行了广泛深入的研究k侯玉霞等 ousss ~李重九等 ot||z ~ ƒµ¨±¦« ετ αλqot||t ~ ƒµ¨§µ¬¦« ετ αλq
t||yl o发现了一些对 א ∂ 有较好效果的抑制剂 ∀目前 o国内外对于植物活性成分的研究主要为对次生代谢
物质的研究 ∀
核桃kϑυγλανσρεγιαl是胡桃属植物中经济价值最高的一种 o在我国栽培历史悠久 o分布广泛 ∀据报道 o核
桃叶次生物质对蚜虫 !粘虫 !杨毒蛾具有较好的触杀和胃毒效果k翟梅枝等 oussv¤~usst ~ussxl o对金黄色葡
萄球菌k Σταπηψλοχοχχυσ αυρευσl !蜡状芽孢杆菌k Βαχιλλυσχερευσl等具有较好的抑制作用k翟梅枝等 oussv¥l o但核
桃叶抗植物病毒活性方面未见报道 ∀本研究采用不同溶剂和提取方法对核桃叶中次生物质进行提取 o利用
活性跟踪手段测定其抗 א ∂ 活性 o并进行核桃叶中抗病毒活性物质提取条件的优化 o研究结果可望为核桃
叶的综合利用和植物源抗病毒剂的开发提供科学的理论依据 ∀
t 材料与方法
t1t 材料 tl植物样品 核桃叶采自西北农林科技大学核桃采穗圃内 o自然晾干后 o在 wx ε 左右的烘干箱
中烘干 o粉碎过 us目筛k孔径 s1{w °°l o然后密封于塑料袋内 o置冰箱中备用 ∀
ul寄主植物 选用普通烟 Žvuy k Νιχοτιανα ταβαχυµ ¦√ qŽvuyl和心叶烟 k Νq γλυτινοσαl为寄主植物 o前者
为 א ∂ 的系统侵染寄主 o用于病毒的繁殖 ~后者为 א ∂ 的局部枯斑寄主 ∀
供试烟苗均采用直播漂浮育苗技术进行培育 o经 xs §水培后 o将幼苗移入直径 tx ¦°的花盆中土培 o生
长一定时间后 o选长势一致的幼苗用于病毒接种试验 ∀
vl供试病毒 烟草花叶病毒普通株系 o保存在普通烟 Žvuy植株上 o提纯后备用 ∀
wl主要仪器及试剂 主要仪器有 • ∞xu„旋转薄膜蒸发仪 !循环水真空泵 !zxt型分光光度计 !高速离心
机 !植物粉碎机 !恒温水浴锅等 ~试剂有乙醇 !石油醚 !乙酸乙酯 !正丁醇 !聚乙二醇 !二甲基亚砜等 o均为分析
纯 ∀
t1u 方法 tl核桃叶中次生物质的提取 在提取时间 v «!料液比≈质量kªl体积k°l比 tsΠtxs条件下 o用
体积分数 |x h乙醇 !甲醇和水作溶剂 o采取 v种不同的提取方法 o提取核桃叶中的次生物质 o以半叶法接种
心叶烟 o根据提取物对 א ∂ 的抑制效果确定适宜的提取溶剂和方法 ∀
≠索氏提取 称取样品 us ªo加入折叠好的脱脂滤纸 o装入索氏提取器中 o用不同溶剂在水浴中加热连
续提取一定时间 o过滤提取液 o滤液减压浓缩得提取物 • t ∀
回流提取 称取样品 us ª置于圆底烧瓶中 o用不同的溶剂进行回流提取 o过滤提取液 o滤液减压浓缩
得提取物 • u ∀
≈冷浸提取 称取样品 us ª置于烧杯中 o用不同提取溶剂于室温下浸泡一定时间后过滤 o滤液减压浓
缩得提取物 • v ∀
ul萃取物 !分离物的制备 以 |x h乙醇冷浸提取的核桃叶粗提物悬浮于水中 o依次以石油醚 !乙酸乙
酯 !正丁醇为溶剂萃取分离 o分别得到石油醚萃取物 !乙酸乙酯萃取物 !正丁醇萃取物和萃余水相 ~乙酸乙酯
萃取物经聚酰胺柱层析分离得 vs h !xs h !zs h乙醇洗脱物质 o选择活性高的洗脱物质上硅胶柱和 ≥¨ ³«¤§¨¬
‹ p us柱纯化得到化合物 „ ∀
vl核桃叶中抗病毒活性物质提取条件优化 以乙醇浓度 !提取时间和料液比为因素 o设置 v因素 v水平
|kvvl正交试验 o冷浸提取核桃叶中的抗病毒活性物质 o根据活性跟踪结果确定适宜的提取条件 ∀试验因素
及水平见表 t ∀
表 1 试验因素及水平
Ταβ . 1 Τεστεδ φαχτορσ ανδ λεϖελσ
水平
¨√¨¯
乙醇体积分数
∞·«¤±²¯ √²¯∏°¨µ¤·¬²Πh
„
时间
׬° Π¨«
…
料液比
•¤·¬²²© °¤·¨µ¬¤¯ ·²¶²¯√¨ ±·kª}°l
≤
t zx y usΠtxs
u |x tu usΠuss
v tss t{ usΠuxs
wl א ∂ 病毒的提纯 烟草花叶病毒经心叶
烟纯化后 o在普通烟 Žvuy上繁殖 ∀ א ∂ 的提纯
参考 Š²²§¬±ª等kt|yzl的方法 o略有修改 o其中在
第一次加入聚乙二醇k°∞Šl之前采取 u次离心的
方法 o离心速度为 x sss µ#°¬±pt o每次 vs °¬±o其
他步骤不变 ∀
xl病毒接种液的配制 取一定量样品提取
液 o加入少量 ⁄≥’ 溶解后 o加蒸馏水稀释至 t
°o接种前加入提纯病毒液 o使提取液中病毒的
终浓度为 us ∗ vs Λª#°pt o混合均匀后用于接种 o以不含样品提取物的相同浓度病毒溶液为对照接种液 ∀
yl抗病毒活性的测定 采用半叶法混合接种 ∀选择健康 !生长旺盛的 y ∗ {叶期心叶烟 o左半叶接种含
有 א ∂ 的植物样品提取液 o右半叶接种对照液 ∀每处理接种 w ∗ x个叶片 o重复 v次 ov §后分别统计枯斑数
目 o抑制率计算公式为 }
抑制率k h l € ≈k对照平均每叶枯斑数 p处理平均每叶枯斑数lΠ对照平均每叶枯斑数  ≅ tss h ∀
u 结果与分析
u1t 提取溶剂和方法对核桃叶提取物抗 א ∂ 活性的影响 在提取时间kv «l !料液比ktsΠtxsl一定时 ov种
不同提取方法所得提取物抗 א ∂ 活性跟踪测定结果k表 ul表明 }用水作为溶剂提取时 o提取物对 א ∂ 的抑
制率仅为 ys h左右 o而甲醇和体积分数 |x h乙醇作溶剂提取时 o抑制率都在 zx h以上 ~|x h乙醇作为提取
溶剂 o回流提取 !索氏提取所得提取物对 א ∂ 的抑制率分别为 {y1y{ h !|v1ux h ~冷浸提取所得提取物对
א ∂ 的抑制率最高 o为 tss h o即完全抑制了病毒的混合侵染 ∀这可能是由于乙醇冷浸提取物中所含杂质相
对较少 !活性物质多且各成分间协同增效作用所致 ∀
由表 u还可看出 }提取方法相同时 o|x h乙醇提取物抑制效果好于甲醇提取物和水提取物的抑制效果 ~
提取溶剂相同时 o冷浸提取物抑制效果最好 o其次为索提提取物 o回流提取物抑制效果最差 ∀因此 o从提取物
的抗 א ∂ 活性和溶剂的安全性 !实用性等来考虑 o核桃叶中抗 א ∂ 活性物质的提取以 |x h乙醇溶液冷浸提
取较好 ∀
u1u 核桃叶提取k萃取 !分离l物对 א ∂ 的抑制效果 核桃叶提取k萃取 !分离l物对 א ∂ 侵染心叶烟的抑
制效果见表 v ∀由表 v可看出 o在供试质量浓度为 x °ª#°pt时 o|x h乙醇冷浸提取物对 א ∂ 侵染心叶烟的
抑制率仍为 tss h ∀在冷浸提取物的各萃取物 !分离物中 o乙酸乙酯萃取物和化合物 „对 א ∂ 浸染心叶烟的
抑制率都在 {x h以上 o分别为 {y1|t h和 {x1xx h ~各萃取物在供试质量浓度为 t °ª#°pt时 o对 א ∂ 浸染心
|wt 第 z期 翟梅枝等 }不同提取条件对核桃叶中抗病毒物质活性的影响
表 2 不同溶剂和方法提取的核桃叶活性物质
对 Τ Μς 侵染心叶烟的抑制效果 ≠
Ταβ . 2 Ινηιβιτινγ εφφεχτ οφ τηε αχτιϖε συβστανχε φροµ διφφερεντ
σολϖεντσ ανδ µετηοδσιν ωαλνυτ λεαϖε το Τ Μς ινφεχτινγ Ν . γλυτινοσα
h
溶剂
≥²¯√ ±¨·
方法  ·¨«²§
索提
≥²¬«¯ ·¨¨ ¬·µ¤¦·¬²±
回流
• ©¨¯∏¬
冷浸
≤²¯§¶²¤®
水 • ¤·¨µ yu1wu x{1wy yw1xx
甲醇  ·¨«¤±²¯ {y1sw z{1x{ {{1|y
|x h乙醇 ∞·«¤±²¯ |x h |v1ux {y1y{ tss1ss
≠ 提取物的供试质量浓度为 s1st ª#°pt ~表中数据为 v次重复提取物
对 א ∂ 抑制率的平均值 ∀ ≤²±¦¨±·µ¤·¬²± ¬±²¦∏¯¤·¨§¬¶s1st ª#°pt1 ⁄¤·¤²©·«¨
·¤¥¯¨¬¶·«¨ ¤√¨ µ¤ª¨ ²©·«µ¨¨µ¨³¨·¬·¬²±q
叶烟的抑制率作用大小依次为 }乙酸乙酯萃取
物 正丁醇萃取物 石油醚萃取物 萃余水
相 ∀乙酸乙酯萃取物经多次聚酰胺柱层析分离
得到的 v个不同洗脱流份中 ovs h乙醇洗脱物
质对 א ∂ 侵染心叶烟的抑制率最高 o为
zu1vz h ∀该洗脱物经 ≥¨ ³«¤§¨¬‹ p us柱纯化
得到化合物 „ o活性检测表明 }„ 物质对 א ∂
侵染心叶烟具有较好的抑制效果 o抑制率达
{x1xx h o说明化合物 „是乙酸乙酯萃取物中的
主要抗病毒活性成分之一 ∀
u1v 核桃叶中抗 א ∂ 活性物质提取条件的优
化 由正交试验结果k表 wl的直观分析可以看
表 3 核桃叶提取(萃取 !分离)物对 Τ Μς 侵染心叶烟的抑制效果
Ταβ . 3 Ινηιβιτινγ εφφεχτσ οφ διφφερεντ εξτραχτσφροµ ωαλνυτ λεαϖεστο Τ Μς ινφεχτινγ Ν . γλυτινοσα
提取k萃取 !分离l物
∞¬·µ¤¦·
浓度
≤²±¦¨±·µ¤·¬²±Π
k°ª#°ptl
接种叶片数
‘∏°¥¨µ²©
¬±²¦∏¯¤·¬²± ¯¨ ¤©
右Π左半叶平均枯斑数
•¬ª«·Π¯ ©¨·¤√ µ¨¤ª¨
±¨ ¦µ²¶¬¶±∏°¥¨µ
抑制率
Œ±«¬¥¬·¬²±µ¤·¨Π
h
|x h乙醇冷浸提取物 ≤²¯§¶²¤® ¬¨·µ¤¦·¶²© ·¨«¤±²¯ |x h x tu {xΠs tss1ss
石油醚萃取物 ∞¬·µ¤¦·¶²©³¨·µ²¯ ∏¨° ·¨«¨µ t tu zuΠvx xt1v|
乙酸乙酯萃取物 ∞¬·µ¤¦·¶²© ·¨«¼¯ ¤¦¨·¤·¨ t tu {wΠtt {y1|t
正丁醇萃取物 ∞¬·µ¤¦·¶²©±2¥∏·¤±²¯ t tu zyΠu{ yv1ty
萃余水相 • ¶¨¬§∏¤¯ ¬¨·µ¤¦·¶¬± º¤·¨µ t tu {xΠwy wu1x|
vs h乙醇洗脱物质 ∞¬·µ¤¦·º¤¶«¨ §²© ·¨«¤±²¯ |x h s1x tu zyΠut zu1vz
xs h乙醇洗脱物质 ∞¬·µ¤¦·º¤¶«¨ §²© ·¨«¤±²¯ |x h s1x tu {sΠvt yt1ux
zs h乙醇洗脱物质 ∞¬·µ¤¦·º¤¶«¨ §²© ·¨«¤±²¯ zs h s1x tu zuΠu| x|1zu
化合物 „ ≤²°³²∏±§ „ s1x tu |sΠtu {x1xx
表 4 正交试验设计方案及结果分析 ≠
Ταβ . 4 Ορτηογοναλτεστ δεσιγν ανδ αναλψσεσ
试验号
‘²q
浓 度
≤²±¦¨±·µ¤·¬²±
时 间
׬°¨
料液比
•¤·¬²²© °¤·¨µ¬¤¯
·²¶²¯√¨ ±·
提取得率
∞¬·µ¤¦·
µ¤·¨Πh
抑制率
Œ±«¬¥¬·¬²±
µ¤·¨Πh
t t t t z1{y {|1tu
u t u u |1su |u1vy
v t v v tu1uy |{1su
w u t v ty1zx |{1xz
x u u t ts1y{ ||1||
y u v u ut1wu tss1ss
z v t u tt1vy |u1xy
{ v u v tx1{y {{1vy
| v v t ts1|y {y1|u
Κt uz|1xs u{s1ux u{|1tt
Κu u|{1xy u{s1zt u{w1|u
Κv uyz1{w u{w1|w u{w1|x
Κt |v1tz |v1wu |y1vz
Κu ||1xu |v1xz |w1|z
Κv {|1u{ |w1|{ |w1|{
Ρ ts1uw t1xy t1ws
≠ Κt o Κu o Κv 分别代表浓度为 t ou ov水平提取时 o各水平 v个组合的提
取物对 א ∂ 的抑制率之和 ~ Κt o Κu o Κv分别代表 Κt o Κu o Κv 的平均值 ~ Ρ代
表各因素不同水平平均值的极差 ∀提取物接种时的供试浓度为 s1st ª#°pt ∀
Κt o Κu o Κv µ¨¶³¨¦·¬√¨ ¼¯ ¬±§¬¦¤·¨¶·«¨ ¶∏° ²©¬±«¬¥¬·¬²± µ¤·¨¶©µ²° ·«¨ ¦²µµ¨¶³²±§¬±ª
¯¨ √¨¯ ohΚt ohΚu ohΚv µ¨¶³¨¦·¬√¨ ¼¯ µ¨³µ¨¶¨±·¶·«¨ ¤√¨ µ¤ª¨ ²© Κt o Κu o Κv ~ Ρ¬¶·«¨ ¬¨·µ¨°¨
√¤¯∏¨ q≤²±¦¨±·µ¤·¬²±¬±²¦∏¯¤·¨§¬¶s1st ª#°pt1
出 }tl v个试验因素对活性物质抗 א ∂ 抑
制率的影响顺序依次为 }乙醇浓度 提取
时间 料液比 ∀即乙醇浓度为影响提取物
抗 א ∂ 活性的主要因素 ∀所以 o进行核桃
叶中活性物质的提取时 o必须将乙醇浓度
控制在最优水平上 o对于次要因素则可在
一定范围内选取适当的水平 ∀ul核桃叶中
活性物质提取的适宜条件为 „u…v ≤u 和
„u …u ≤t o这 u种组合所得的提取物 o对 א ∂
的抑制率分别为 tss h 和 ||1|| h ∀但两
者的提取物得率因料液比 !提取时间不同
差异较大 o„u …v ≤u组合提取 t{ «o得率为
ut1wu h ~ „u…u ≤t 组合因料液比 小于
„u …v ≤u组合 o且提取短ktu «l o得率仅为
ts1y{ h o前者的提取得率为后者的 u1st
倍 ∀综合考虑提取时间 !料液比和提取物
得率等因素对活性成分的影响 o选择
„u…v≤u作为核桃叶中抗 א ∂ 活性物质提
取条件的最优组合 ∀即以 |x h 乙醇为提
取溶剂 o料液比 usΠussktΒtsl o冷浸 t{ «o
sxt 林 业 科 学 wv卷
所得活性物质对 א ∂ 抑制作用最强 o且提取物得率较高 ∀
v 小结与讨论
v1t 小结 tl 同一植物材料因提取溶剂 !提取方法不同 o所得活性物质对 א ∂ 侵染心叶烟的抑制效果不
同 ∀核桃叶中抗 א ∂ 活性物质的提取以 |x h乙醇溶液冷浸提取较好 ∀
ul 核桃叶的 |x h乙醇冷浸提取物经萃取分离和活性跟踪显示 o各萃取物中对 א ∂ 侵染心叶烟的抑制
作用大小依次为 }乙酸乙酯萃取物 正丁醇萃取物 石油醚萃取物 萃余水相 ~乙酸乙酯萃取物经柱层析
分离 !纯化和重结晶得到化合物 „ o„物质对 א ∂ 侵染心叶烟具有较好的抑制效果 o抑制率达 {x1xx h ∀
vl 采用冷浸提取时 o核桃叶中抗 א ∂ 活性成分提取的优化条件是 }|x h乙醇为提取溶剂 o料液比 usΠuss
ktΒtsl o提取 t{ «∀
v1u 讨论 tl 活性物质的提取 一植物材料用不同的提取溶剂提取 o所得提取物的抗烟草花叶病毒活性
有一定差异 ~当提取溶剂相同时 o因提取方法的不同所得提取物的抗病毒活性也有一定的差异 ∀乙醇是活
性成分提取中最常用的溶剂 o其毒性小 !价格便宜 !浓缩回收方便 ~以水为溶剂 o虽然成本较低 o但提取物中
其他杂质含量较多 o且水提取物浓缩困难 !易腐败变质 ~而甲醇有毒 !污染严重 o故试验中尽量少用 ∀因此 o
从经济和安全的角度来看 o选择乙醇为溶剂提取核桃叶中具有抗病毒活性的次生物质较适宜 ∀活性物质提
取中最常用的方法有冷浸法 !回流法和索氏提取法 ∀回流法和索氏提取时 o都有可能因材料持续受热时间过
长 o破坏材料中的非耐热活性成分 o导致所得提取物的抗病毒活性下降 ∀因此 o在进行活性物质的提取时 o特
别是当活性成分耐热性差时 o宜选用冷浸法 ∀
ul 活性组分的分离 核桃叶的乙醇提取物具有成分复杂 o所含物质种类多的特点 o以不同溶剂k极性依
次由小到大 }石油醚 !乙酸乙酯和正丁醇l对乙醇提取物进行初步分离 o可将其大致分为 v个极性不同的部
分 o有利于活性成分的进一步跟踪分离 ∀本研究获得的化合物 „只是乙酸乙酯萃取物中的抗病毒活性成分
之一 o结构正待鉴定 ∀核桃叶中的其他抗病毒活性成分正在深入研究中 ∀
参 考 文 献
侯玉霞 o李重九 o马立新 qusss1 中草药中抗植物病毒 א ∂ 活性物质 °t 作用机理研究 q中国农业大学学报 ox ktl }ut p uw
李重九 o侯玉霞 o王蔚霞 o等 qt||z1 植物病毒病选择性治疗药剂的筛选研究 q植物病理学报 ouzkwl }vwv p vw{
吴云峰 qt||x1 生物病毒农药筛选及应用 q世界农业 okxl }vx p vy
翟梅枝 o杨秀萍 o林奇英 o等 qussv¤1 核桃叶提取物对杨毒蛾生物活性的研究 q西北林学院学报 ot{ kul }yx p yz
翟梅枝 o杨秀萍 o刘 路 qusst1 核桃叶提取物对蚜虫的触杀作用 q西北林学院学报 oty kwl }xx p xy
翟梅枝 o张凤云 o刘朝斌 o等 qussx1 核桃叶中植物农药的拒食活性研究 q西北林学院学报 ous kul }tv{ p tws
翟梅枝 o李晓明 o林奇英 o等 qussv¥1 核桃叶抑菌成分的提取及其抑菌活性 q西北林学院学报 ot{ kwl }{| p |t
ƒµ¨±¦« ≤ o ∞¯ §¨µ o¨ªª¨·ƒ o ετ αλqt||t1 ƒ¯ ¤√²±²¬§¶¬±«¬¥¬·¬±©¨¦·¬√¬·¼ ²©·²¥¤¦¦² °²¶¤¬¦√¬µ∏¶q≤¤± °¯¤±·°¤·«²¯ otv ktl }t p y
ƒµ¬¨§µ¬¦«o¤º·²± Žo⁄¬±¦«¨µ≥ o ετ αλqt||y1 …¨ ±½²·«¯¬¤§¬¤½²¯¨¬±§∏¦¨¶¶¼¶·¨°¬¦¤¦´∏¬µ¨§µ¨¶¬¶·¤±¦¨ ¬±·²¥¤¦¦²q°¯¤±·ots }yt p zs
Š²²§¬±ª Š ∂ o ‹ ¥¨¨µ·× „ qt|yz1 „ ¶¬°³¯¨·¨¦«±¬´∏¨ ©²µ³∏µ¬©¬¦¤·¬²± ²©·²¥¤¦¦² °²¶¤¬¦√¬µ∏¶¬± ¤¯µª¨ ∏´¤±·¬·¬¨¶q°«¼·²³¤·«²¯²ª¼oxz }tu{x p tu{|
k责任编辑 朱乾坤l
txt 第 z期 翟梅枝等 }不同提取条件对核桃叶中抗病毒物质活性的影响