全 文 ：第 v{卷 第 u期
u s s u年 v 月
林 业 科 学
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¤µqou s s u
核桃品种试管嫩茎生根的研究
裴 东 袁丽钗 奚声珂
k中国林业科学研究院林业研究所 北京 tsss|tl
谷瑞升
k中国科学院植物研究所 北京 tsss|vl
摘 要 } 以 y个早实核桃kϑυγλανσρεγια ql新品种为试材 o对长期继代培养的试管嫩茎的生根进行了研究 o
结果表明 }诱导方法 !外源 Œ…„的水平 !嫩茎发育状态以及光照条件等对生根具有明显的影响 ∀选取生长旺
盛 !节间较长 !叶较小呈嫩黄绿色的幼态嫩茎 o采用 u步诱导生根法 o即黑暗条件下 o在 Œ…„ 为 x1s ∗ ts1s °ª#
pt的 tΠw⁄Ž• 培养基中诱导 ts ∗ tx §o而后转移至不含 Œ…„ 的 ⁄Ž• 培养基中 o利用这一方法顺利地诱导了
嫩茎生根 o在对 y个品种的应用中获得了 ys1x h ∗ {|1z h的生根率 o平均根数 u1s ∗ v1y ∀生根的嫩茎已成功
地进行了下地移栽 ∀同时就根原基诱导过程中嫩茎内源 Œ„„和 „…„水平变化进行了研究 o对核桃生根的激
素调控进行了讨论 ∀
关键词 } 核桃品种 o试管嫩茎 o生根诱导 o嫩茎发育状态 o内源激素
收稿日期 }usss2s{2ut ∀
基金项目 }国家高技术应用部门发展项目kusss2uyl/西部经济林良种壮苗技术研究0 ∀
ΣΗΟΟΤ Ρ ΟΟΤΙΝΓ ΙΝ ςΙΤΡ Ο ΦΟΡ ΩΑΛΝΥΤ ΧΥΛΤΙς ΑΡΣ
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k Τηε Ρεσεαρχη Ινστιτυτε οφ ΦορεστρψoΧΑΦ Βειϕινγtsss|tl
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kΤηε Ινστιτυτε οφ Βοτανψo ΧΑΣ Βειϕινγtsss|vl
Αβστραχτ}  ¤¨¶∏µ¨¶·²³µ²°²·¨µ²²·¬±ª²©¬± √¬·µ²¶«²²·¶º¨ µ¨ ¦²±§∏¦·¨§º¬·«¶¬¬³µ¨¦²¦¬²∏¶º¤¯±∏·¦∏¯·¬√¤µ¶º«¬¦««¤§
¥¨ ±¨ ¶∏¥¦∏¯·∏µ¨§©²µw ¼¨ ¤µ¶qŒ·º¤¶©²∏±§·«¤·¶∏¦¦¨¶¶©∏¯ µ²²·¬±ªº¤¶¦¯²¶¨ ¼¯ µ¨ ¤¯·¨§·²¬±§∏¦¬±ª °¨ ·«²§o§∏µ¤·¬²± ²©Œ…„
·µ¨¤·°¨ ±·¶oŒ…„ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶o¯¬ª«·¦²±§¬·¬²±¶o¤±§§¨√¨ ²¯³¬±ª¶·¤·¨²©·«¨ ¶«²²·¶q׫¨ µ²²·¬±ªµ¤·¨¶²©ys1x h ∗ {|1z h
¤±§u1s ∗ v1y µ²²·¶³¨µ¶«²²·º¨ µ¨ ¤¦«¬¨√¨ §¬±¶¬¬¦∏¯·¬√¤µ¶¥¼¤§²³·¬±ª·¨±§¨µ¶«²²·º¬·«¶°¤¯¯¨ µ¯ ¤¨√¨ ¶¤±§ ²¯±ª¨µ¬±·¨µ±²2
§¨¶¤±§∏¶¬±ª·«¨ ·º²¶·¨³¶°¨ ·«²§·«¤·º¤¶©¬µ¶·¯¼¬±§∏¦¨§²±tΠw ⁄Ž• °¨ §¬∏° º¬·«Œ…„ ¥¨·º¨ ±¨x1s·²ts1s °ª#pt ©²µ
ts ∗ tx §¤¼¶∏±§¨µ§¤µ®¦²±§¬·¬²±o·«¨ ±·µ¤±¶©¨µµ¨§·²·«¨ ⁄Ž• °¨ §¬∏° º¬·«²∏·Œ…„ ∏±§¨µ¯¬ª«·q  ¤¨±º«¬¯¨ o¦«¤±ª¨¶²©
Œ„„ ¤±§„…„ ¯¨ √¨ ¯¬±¶«²²·¶º¨ µ¨ °²±¬·²µ¨§§∏µ¬±ªµ²²·¬±ª¬±§∏¦¬±ªq׫¨ µ¨ª∏¯¤·¬²±¶¤±§¦²±·µ²¯ ²©«²µ°²±¨ ¶§∏µ¬±ªº¤¯2
±∏·¶«²²·µ²²·¬±ªº¤¶§¬¶¦∏¶¶¨§¬±·«¬¶³¤³¨µq׫¨ µ²²·¨§¶«²²·¶«¤√¨ ¥¨ ±¨ ¶∏¦¦¨¶¶©∏¯¯ ¼·µ¤±¶³¯¤±·¨§·²©¬¨ §¯q
Κεψ ωορδσ} ϑυγλανσρεγιαq¦∏¯·¬√¤µo≥«²²·¬±√¬·µ²o•²²·³µ²°²·¬±ªo≥«²²·§¨√¨ ²¯³°¨ ±·¤¯ ¶·¤·¨o∞±§²ª¨ ±²∏¶«²µ°²±¨
核桃无性繁殖困难一直是困扰核桃发展的最为突出的问题k郗荣庭等 ot||y ~陈正华 ot|{y ~刘淑兰
等 ot|{yl o表现在 }一方面新品种不断涌现 o而另一方面应用于规模化栽培的新品种却寥寥无几 o因而
严重制约着核桃优种化和产业化进程 o是急待解决的重要课题 ∀核桃无性繁殖困难表现在其常规扦插
难于生根 o嫁接成活率不稳定 !繁殖系数低等 ~另外早实优良品种形成长枝的能力很差 o尤其 z ∗ {¤生以
上的树体表现更为突出k裴东等 ot||{l o接穗量远远不能满足嫁接需要 ∀因此探索新方法解决核桃试管
苗生根问题和提高繁殖系数成为研究的关键 ∀试管培养作为新兴植物再生技术具遗传稳定 o繁殖系数
高 o条件可控制 !繁殖率稳定等特点 o已广泛地应用到植物的繁殖实践中 ∀然而 o核桃的试管繁殖研究尽
管起步于 us世纪 {s年代初 o但试管嫩茎生根问题一直没有得到很好的解决 ∀进入 |s年代 o在生根研
究方面虽然获得了一定的进展kŠ¤¯¨ ετ αλqot|{{ ~ …¨ µµ²¶ ετ αλqot||v ~ „±¤ ετ αλqot||v ~ ⁄∏µ²∏¶ ετ αλqo
t||z ~⁄µ¬√¨ µετ αλqot|{wl o但采用的外植体多为合子胚 !实生苗 !杂种核桃等在发育阶段上属幼态的组
织 o对于核桃成龄品种的试管繁殖则少见报道 ∀本研究自 t||u年开始 o以长期继代培养的核桃品种为
试材 o通过外源激素处理的 u步诱导生根和嫩茎外植体的选择等 o成功地诱导了试管嫩茎生根 o获得了
较为满意的结果 ∀
t 材料和方法
111 材料
继代培养 w ¤的核桃品种试管嫩茎 o继代间隔约为 us §o品种为 }辽宁2t号 !新早丰 !中林 x号 !元
丰 !维那k∂¬±¤l !强特勒k≤«¤±§¯ µ¨lk郗荣庭等 ot||yl ∀
112 方法
t1u1t 培养基及培养条件 基本培养基为 ⁄Ž• k⁄µ¬√¨ µετ αλqot|{wl o继代扩繁培养基为 ⁄Ž• 附加 t1s
°ª#pt …„和 s1sst °ª#pt Œ…„ ∀第 t步诱导生根培养基为 tΠw ⁄Ž• 附加不同浓度 Œ…„ ~第 u步生根培
养基为不含生长调节剂的 ⁄Ž• ∀转移培养的介质为蛭石附加一定量的 ⁄Ž• ∀培养温度为 ux ε ? v ε o
光照强度为 t{ss¬o每天 ty «光照和 { «黑暗 ∀继代和生根诱导均在 uxs °圆柱状培养瓶中进行 ∀
t1u1u 生根处理 生根诱导方法分别采用 t步和 u步诱导生根法 ∀t步诱导生根法的做法是 }将试管
嫩茎一直培养在添加生长素类kŒ…„ !‘„„l的培养基中 ∀在过去的工作及预备试验的基础上 o设计了 u
步诱导生根法 ∀对试管嫩茎进行了不同生长素kŒ…„l处理与不同处理天数的试验 o以及不同天数的光或
暗培养条件 o目的是筛选出最佳处理的生长素浓度和处理天数 o以及培养条件 o详见本文 u qt ∀u步诱导
生根试验所采用的外植体均为幼嫩 !节间较长 !叶片较小并呈嫩绿色 !茎叶夹角小的嫩茎 ∀即本文 u1v
的 ´类幼态茎 ∀每个处理的嫩茎数为 vs ∗ vy株 o每个处理重复 v次 ∀
t1u1v 生长素kŒ„„l和脱落酸k„…„l测定 采用高效液相色谱进行分析 o取样量为 vs株组培苗 o充分
混匀后用于分析 ∀准确称取样品 t ∗ v ªo在研钵中剪细并加入 {s h冰甲醇 ts °o研细后转至 txs °三
角瓶中 o再加 us °{s h冰甲醇后加塞 o超声波振荡 u «k不断加入冰块 o保证温度低于 w ε l后过滤 o滤渣
中再加入 us °{s h冰甲醇 o摇匀后放置冰箱中过夜后再过滤 o合并滤液 ∀取 ts °滤液通过 ≥¨ ³³¤µ≤t{
小柱 o弃去滤出液 o用 u °乙腈冲洗 ≥¨ ³³¤µ≤t{小柱 o收集洗出液 o经 s1wx Λ°滤膜过滤后 o清洗液待上
‹°≤分析 ∀Œ„„提取回收率大于 |s h ∀
t1u1w 数据统计分析 数据按 ⁄˜‘≤„‘新复极差分析进行多重比较 ∀不同小写字母表示差异显著性
k Π s1sxl ∀
u 结果与分析
211 嫩茎外植体不定根的诱导
嫩茎k≥«²²·¶l为试管内由芽或不定芽抽生的茎 o有些研究者称之为幼茎或无根试管苗 ∀为了便于分
析单因素的作用 o本实验所用的品种为新早丰 ∀
u1t1t 诱导生根法对嫩茎生根的影响 采用 t步诱导生根法诱导生根的效果很差 ∀如果培养基中附
加的生长素浓度较高 o嫩茎外植体的基部会肿大并愈伤化 o很少有根的形成 o而且长时间处理会出现茎
尖坏死 !叶片干枯 !脱落以致全株死亡 ~若降低附加生长素的浓度 o又几乎没有不定根发生 ∀总之 o几年
的试验结果表明 o采用一步诱导生根法辽宁2t号等 y个供试品种的试管生根率均在 vs h以下 ∀根据核
桃对生长素反应的特点 o结合植物生根对外源生长调节剂需求特点 o我们研究了采用将嫩茎先放在含有
生长素的培养基培养一定时间 o而后转至无外源激素的培养基中的 u步诱导生根法 ∀获得了良好的诱
导生根的效果 o极显著地提高了生根率和降低了嫩茎基部愈伤化发生 o生根植株的生长状态普遍良好
k图版 ´ p t !ul ∀
以下研究对诱导嫩茎生根所附加的生长调节剂的种类 !浓度 !处理天数及暗培养的效果进行了筛
选 o方法均采用 u步诱导生根法 ∀
u1t1u Œ…„的浓度和处理天数 对生长素的种类和浓度研究结果表明 }在暗培养条件下 Œ…„和 ‘„„均
vv 第 u期 裴 东等 }核桃品种试管嫩茎生根的研究
可诱导核桃试管嫩茎生根 o但以 Œ…„效果更好k表 tl ∀
表 1 ΙΒΑ对核桃试管嫩茎生根的影响(新早丰) ≠
Ταβ .1 Ιµπαχτ οφΙΒΑ ον ροοτινγ οφτηεσηοοτ ιν ϖιτρο φορ Ξινζαοφενγ χυλτιϖαρ
浓度
≤²±¦¨±·µ¤·¬²±k°ª#ptl
生根率
• ²²·¬±ªµ¤·¨k h l
平均根数
„√¨ µ¤ª¨ µ²²·±∏°¥¨µk•²²·¶l
平均根长
„√¨ µ¤ª¨ ¯¨ ±ª·«²©µ²²·k¦°l
生根指数
Œ±§¨¬²©µ²²·¬±ª
s1s s¨ s s s
t1s s¨ s s s
v1s vz1x§ t1|¤ t1v¤ s1|v
w1s xx1{¦ u1w¤ t1|¤ u1x|
x1s {u1z¤ u1u¤ t1{¤ v1uz
y1s {u1|¤ u1{¤ t1{¤ w1tv
{1s {v1v¤ v1v¤ t1y¤ w1u|
ts1s z|1y¤ u1|¤ t1w¤ v1tu
tu1s wv1x§ w1w¤ t1t¤ u1tu
tx1s ut1{¦ v1s¤ t1s¤ s1yw
≠小写字母表示在 s1sx水平下差异显著性 o下同 ∀ ⁄¬©©¨µ¨±·¯ ·¨¨µ¶¬±§¬¦¤·¨·«¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·§¬©©¨µ¨±¦¨ ¬± ¶·¤·¬¶·¬¦¶¤··«¨ s1sx ¯¨ √¨ ¯q¨·¨µ¶¬± ²·«¨µ
·¤¥¯ ¶¨¬±·«¬¶³¤³¨µ«¤√¨¶¤°¨ ¬±§¬¦¤·¬²±q
生根指数 €平均根长 ≅平均根数 ≅生根率 q•²²·¬±ª¬±§¨¬€ „√ µ¨¤ª¨ µ²²·¯ ±¨ª·«≅ „√ µ¨¤ª¨ µ²²·±∏°¥¨µ≅ •²²·¬±ªµ¤·¨ q
由表 t可以看出 o两步诱导生根法采用 x ∗ ts °ª#pt Œ…„处理 o嫩茎的生根率没有表现出明显差
异 o生根率较高 ∀低浓度或高浓度均对生根不利 ∀浓度过低生根率低 o浓度过高不但生根率下降而且
茎基愈伤化明显 o嫩茎尖变黑 o叶片脱落 ∀
在 tΠw⁄Ž• 基本培养基中附加 x °ª#pt Œ…„ o进行黑暗处理 o其嫩茎处理的天数直接影响生根率k图
tl ∀图 t表明 oŒ…„处理的最佳日数为 ts ∗ tx§o生根率为 zv h ∗ {v h ∀不足 ts§和超过 tx§都对生根不
利 ∀时间短生根率低 o超过 tx§不仅生根率下降 o更重要的是会出现茎基愈伤化 o茎尖变黑和叶片脱落
现象 o对以后的移栽会造成不利的影响 ∀
212 暗与光照条件对试管嫩茎生根的影响
黑暗处理是诱导生根的必要条件 ∀在对两个品种新早丰和辽宁 t号的研究中发现 o在光和暗条件
下各 yx株试管嫩茎进行生根诱导中 o光诱导的 o生根率为零 ~经过暗处理 o两个品种分别有 w|株和 xv
株生根 o生根率分别为 zx1w h和 {t1x h ∀
图 t Œ…„处理时间对核桃嫩茎生根的影响
ƒ¬ªqt Œ°³¤¦·²©·µ¨¤·°¨ ±··¬°¨ ²±¬± √¬·µ²¶«²²·µ²²·¬±ª©²µ÷¬±½¤²©¨ ±ª¦¯∏·¬√¤µ

图 u 黑暗与光照条件对
核桃嫩茎生根的影响
ƒ¬ªqu ∞©©¨¦·²©§¤µ®¤±§ ¬¯ª«·²±¬± √¬·µ²
¶«²²·µ²²·¬±ª©²µº¤¯±∏·¦∏¯·¬√¤µ¶
υ新早丰 ÷¬± ½¤²©¨ ±ª~τ 辽宁 t号 ¬¤²±¬±ªt q

wv 林 业 科 学 v{卷
213 嫩茎外植体的发育状态与不定根诱导
在嫩茎外植体状态对生根影响的研究中 o根据嫩茎的表现特征 o将其分为 w类 }´类k幼态茎l }幼
嫩 o节间较长 o叶片较小并呈嫩绿色 !茎叶夹角小 ~µ类k幼嫩嫩茎l }与 ´类相比苗的状态更为幼嫩 o节
间更短 o叶片和茎叶夹角更小 ~¶类k半木质化嫩茎l }与 ´类相比苗的状态老化 o茎部半木质化 o节间较
长 ~·类k老态嫩茎l与 ¶类相比苗的状态更老化 o叶片呈淡黄色 o节间较短 o茎叶夹角较大 ∀取 w类表观
不同 !具有不同发育状态的嫩茎进行不定根诱导 o其生根率表现出很大差异k表 ul ∀
表 2 不同发育状态嫩茎的生根状况
Ταβ .2 Ροοτινγ στατυσ οφτηεσηοοτσ ωιτη διφφερεντ δεϖελοπµενταλ ατ στατε
嫩茎类别
×¼³¨¶²©¶«²²·¶
调查株数
‘²q²©¶«²²·¶k¶«²²·¶l
生根株数
‘²q²©µ²²·¨§¶«²²·¶
生根率
•²²·¬±ªµ¤·¨k h l
生根条数
• ²²·¶³¨µ¶«²²·kµ²²·¶l
´幼态 × ±¨§¨µ¶«²²·¶º¬·«¶°¤¯¯¨µ¯¨ ¤√¨ ¶¤±§
²¯±ª¨µ¬±·¨µ±²§¨¶ vy vs {v1vv v1v
µ幼嫩 × ±¨§¨µ¶«²²·¶ vu uv zt1{{ u1u
¶半木质化 ≥ °¨¬2¯¬ª±¬©¬¨§¶«²²·¶ wt v z1wt t1x
·老化 ¬ª±¬©¬¨§¶«²²·¶º¬·«¥¬ªª¨µ¯ ¤¨√¨ ¶¤±§
¶«²µ·¨µ¬±·¨µ±²§¨¶ vx s s s
´类生长旺盛的幼态嫩茎生根率最高 o达 {v1v h ~µ类嫩茎次之 o生根率 zt1{{ h ~¶类半木质化茎
生根率明显降低 o为 z1wt h ~·类老态黄化茎 o很难诱导生根 o生根率为零 ∀因此欲获得较高的生根率
必须调整好嫩茎的生长状态 ∀在保证生长充实的基础上 o获得生长旺盛 !发育阶段处于幼态的嫩茎是诱
导不定根发生的前提条件 ∀
214 品种间试管苗生根的差异和移载
在满足试管嫩茎生根的条件下 o进行了早实核桃品种根诱导试验 o结果见表 v ∀
表 3 核桃品种试管嫩茎生根状况的比较 ≠
Ταβ .3 Χοµπαρισονσ οφ ροοτινγ στατυσ οφσηοοτσιν ϖιτρο φορ ωαλνυτ χυλτιϖαρσ
品种
≤∏¯·¬√¤µ
调查数
≥«²²·¶
生根株数
•²²·¨§¶«²²·¶k¶«²²·¶l
生根率
•²²·¬±ªµ¤·¨k h l
平均根数
• ²²·¶³¨µ¶«²²·kµ²²·¶l
元丰 ≠∏¤±©¨ ±ª zu yv {z1x v1u
新早丰 ÷¬±½¤²©¨ ±ª x{ xu {|1z v1v
辽宁 t号 ¬¤²±¬±ªt zs x{ {u1| u1y
上宋 ≥«¤±ª¶²±ª yy wx y{1u u1s
维纳 ∂¬±¤ xy vw ys1z u1{
强特勒 ≤«¤±§¯ µ¨ zu wy ys1x v1y
≠两步诱导生根法 oŒ…„ x°ª#pt暗处理 tu§q׺²¶·¨³¶²©¬±§∏¦¬±ªº¤¶¤§²³·¨§oŒ…„ x°ª#pt ¤±§§¤µ®©²µ¬±¬·¬¤¯ tu §¤¼¶q
表 v表明 }不同品种试管嫩茎的生根率存在差异 o其中以元丰 !新早丰和辽宁2t号生根率最高 o上
宋 !维纳 !强特勒为生根率中等 ∀品种间生根条数差异不显著 o说明应用上述方法诱导早实核桃品种生
根可以获得较好的生根效果 ∀生根的嫩茎已成功地进行了下地移栽k图版 ´ p v !wl
215 光照和暗培养下嫩茎诱导生根过程中内源 Œ„„和 „…„含量变化
外植体新早丰核桃试管内幼态嫩茎在 ≥培养基中附加 Œ…„ x1s °ª#pt o置于光和暗两种条件下 o
培养初期隔 t ∗ u §取材 t次 ox §以后隔 v ∗ w §取材 t次 o直到第 tu §∀测定结果见图 v !w !x ∀
从图 v可以看出 }ktl在光照培养下 o嫩茎内源 Œ„„会迅速升高 o其高峰为第 x ∗ { §o变化曲线呈圆
头型 ~kul在暗培养下 o第 u ∗ v §Œ„„含量未检测到 ∀而第 w §开始水平升高 o第 x §达到高峰 o第 { §下
降 o第 tu §又有所回升 o变化曲线峰呈尖顶型 o且呈双峰 ~kvl在光照培养条件下 o嫩茎内源 Œ„„含量始
终高于在暗培养条件下 ∀
xv 第 u期 裴 东等 }核桃品种试管嫩茎生根的研究
图 w表明 }ktl不论是光培养或暗培养 o在嫩茎中最初 w §均检测不到 „…„ ~kul从第 x §开始嫩茎
„…„含量逐渐上升 o而且暗培养比光培养上升得快 ∀
图 x 光或暗培养条件下嫩茎 Œ„„Π„…„的变化
ƒ¬ªqx ≤«¤±ª¨ ²©Œ„„Π„…„ ¬±¶«²²·¶¬±§∏¦¬±ªµ²²·¬±ª∏±§¨µ¯¬ª«·
¤±§§¤µ®¦²±§¬·¬²±¶©²µ÷¬±½¤²©¨ ±ª¦∏¯·¬√¤µ
υ光 ¬ª«·Œ„„Π„…„ ~τ 暗 ⁄¤µ®Œ„„Π„…„ q

图 w 在光或暗培养下 „…„含量的变化
ƒ¬ªqw ≤«¤±ª¨ ²© „…„ ¬±¶«²²·¶¬±§∏¦¬±ªµ²²·¬±ª∏±§¨µ¯¬ª«·
¤±§§¤µ®¦²±§¬·¬²±¶©²µ÷¬±½¤²©¨ ±ª¦∏¯·¬√¤µ
υ光 ¬ª«·„…„ ~τ 暗 ⁄¤µ® „…„ q

图 v 在光或暗培养条件下 Œ„„含量的变化
ƒ¬ªqv ≤«¤±ª¨ ²©Œ„„ ¬±µ²²·2¬±§∏¦¨§¶«²²·¶∏±§¨µ¯¬ª«·
¤±§§¤µ®¦²±§¬·¬²±¶©²µ÷¬±½¤²©¨ ±ª¦∏¯·¬√¤µ
υ光 ¬ª«·Œ„„ ~τ 暗 ⁄¤µ®Œ„„ q

为了解 Œ„„和 „…„二者平衡对嫩茎生根的影响 o将 Œ„„Π„…„比值变化绘成图 x ∀结果表明 o在光
培养第 u !v §o由于 „…„ 为零或较少 oŒ„„Π„…„ 的值较高 o第 x §为 tt1y o随后不断下降 o到 tu §时为
u1| ~在黑暗条件下由于 Œ„„ 极低或为 s o因此诱导
第 u ∗ w §Œ„„Π„…„值为 s o第 x §为 tv1{ ~第 y §急
剧下降为 t1t o到 tu §为 s1| oŒ„„Π„…„急剧下降主
要是由于嫩茎内 „…„含量提高得比较快 ∀
v 讨论
311 试管嫩茎根器官发生与内外源生长素的关系
核桃是较难发生不定根的树种k郗荣庭等 o
t||y ~陈正华等 ot|{y ~Š¤¯¨ ετ αλqot|{{l ∀虽然在生
根方面已开展了大量研究 o但对其难生根的机制还
缺乏深入的了解k…¨ µµ²¶ ετ αλqot||vl ∀在核桃品种
的继代培养中发现 o核桃是对生长素类物质较为敏
感而对细胞分裂素类物质不敏感的树种 ∀试管继
代培养仅需附加极其微量的 Œ…„ks1sst°ª#ptl o
但不含 Œ…„ 却不能获得继代效果 ∀如果附加生长
素的浓度稍高 o不但试管嫩茎增殖受到影响 o培养
的材料会产生明显的愈伤化 ∀在试管诱导核桃生
根中发现采用较高浓度生长素进行长时间的诱导 o
试管嫩茎的茎基部极易肿大并愈伤化 o常导致诱导
失败 ∀植物不定根的形成是一系列组织分化顺序
性累积的结果 }首先表现在某一特定组织的细胞脱
分化 o进行有序的分裂并分化出根原基和进一步发
育和生长 ∀这一过程可划分为 w个阶段 }诱导期 !
根原基发端期 !根发育和伸长期 ∀每个阶段各有其
生理生化特征及其相应的调控因素 ∀ ≤«µ¬¶·¬±¨
kt||tl在对烟草器官发生过程详尽的研究中发现 o
器官的发生需要外源生长调节剂的诱导 o而器官原
基的生长发育并不依赖于外源生长调节剂 ∀鉴于
前人的研究结果和核桃对外源生长素类物质反应
较敏感的特点 o我们采用了两步诱导生根法 o首先
利用高浓度的生长素启动根原基的发生 o而后转移
至无生长素的培养基使根原基生长发育 ∀实验证
明这一诱导方法成功地实现了核桃试管嫩茎生根 o
并获得了较高的生根率 ∀这一方法也为其它难于
诱导生根的树种k如板栗l提供了借鉴 ∀
外源生长调节剂可改变内源激素的水平 o通过调节内源激素平衡进而对细胞分化和发育发挥作用 ∀
生长素具有调节细胞分裂周期实现细胞的有序分裂 o与根原基发端密切相关 ∀通常用于不定根诱导的
生长素类物质为 Œ…„ ∀他人研究发现 oŒ…„诱导不定根的主要方式是通过转化为 Œ„„而起作用的k谷瑞
升等 ot|||l o本研究获得了一致的结果 o再次证实了无论在光照还是黑暗条件下外源 Œ…„均可诱导核桃
yv 林 业 科 学 v{卷
嫩茎的内源 Œ„„ 和 „…„升高 o改变了嫩茎内源激素平衡状况 o进而促进不定根的发生 ∀
生根试验表明 o光照条件下试管嫩茎生根率很低 o而黑暗条件下生根率较高 ∀比较两者在内源
Œ„„ !„…„和 Œ„„Π„…„变化 o发现黑暗培养具有较高生根率 o可能与下列变化有关 }第 t o在黑暗条件下 o
内源 Œ„„在第 { §出现峰值下降后第 tu §水平又开始升高 oŒ„„再次升高可能与根原基的发育有关 ~第
u o在光照条件下 o内源 Œ„„变化曲线为圆头峰 o而暗处理为尖头峰 o表明光照条件下嫩茎对外源 Œ…„反
应快 ∀第 v o从第 x ∗ tu§o在光培养嫩茎内的 „…„含量提高了 u1w倍 o而在黑暗下培养却提高了 y1y倍 ∀
内源激素与植物组织和细胞的生长 !分裂和发育联系密切 o内源激素水平及激素间平衡的改变间接说明
了植物生理代谢方式的改变 ∀然而上述证据并不能完全解释为什么光照条件会对不定根产生抑制作
用 ∀光照抑制不定根的发生是一个非常复杂而又有趣的现象 ∀在对其它树种如板栗 !杏属 !橄榄 !枣等
研究中也发现暗处理插条黄化后易生根k²≤²º±ot|{{l ∀因此这一问题尚需深入研究 ∀
312 试管嫩茎的发育状态与生根的关系
大量研究结果表明 o树木发生不定根的难易首先取决于基因型 o受本身遗传因素决定 o表现在不同
树种和同一树种不同个体间发生不定根能力差异悬殊 ∀除本身遗传因素外 o不定根的发生与树木的发
育状态密切相关 o幼龄态较成龄态较易诱导发生不定根 ∀现已证实采取人工措施可使成龄树体复幼 o恢
复其不定根发生能力 ∀这些复壮措施包括对成龄树木进行重剪以促发萌蘖 o诱发树干基部产生不定枝 !
将成龄组织或器官嫁接至幼龄砧木上以及试管内连续多次继代培养等k²µª¤±ot||zl ∀其中试管内连
续多次继代培养的措施对树木嫩茎复幼是有效的 ∀受遗传因素决定 o核桃属于较难发生不定根的树种 o
同时早实核桃品种其组织具有较高的阶段发育年龄 o因此其生根更难 ∀试验材料是经过了 w ¤继代培
养 o使嫩茎不断幼化 o这可能是获得较高的试管诱导生根率的重要原因 o今后应当对不同继代时期与嫩
茎生根的关系进行细致的研究 o提出继代复幼临界期 o用于指导核桃组培生产 ∀另外 o目前对长期的继
代培养使成龄树嫩茎复幼进而提高生根率的机制还不清楚 o这一方面尚需开展大量研究 ∀
参 考 文 献
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